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EPO预处理对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤TNF-α表达的影响及机制

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中华胸心血管外科杂志 2006年第3期22卷 190-192页

作者：秦川肖颖彬钟前进陈林王学锋第三军医大学新桥医院心血管外科

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理对培养心肌细胞缺氧复氧前后TNFα表达的影响,并进一步研究其可能的NFκB信号机制。方法采用培养乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,分为对照组、EPO组[缺氧复氧前24h,培养液中加入终... 详细信息

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理对培养心肌细胞缺氧复氧前后TNFα表达的影响,并进一步研究其可能的NFκB信号机制。方法采用培养乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,分为对照组、EPO组[缺氧复氧前24h,培养液中加入终浓度10Uml的重组人促红素(recombinanthumanerythropoietin,RHuEPO)]、EPO+吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)组(缺氧复氧前24h,加入终浓度10Uml的RHuEPO和5μgml的PDTC)和PDTC组(缺氧复氧前24h,加入终浓度5μgml的PDTC)。分别于缺氧复氧损伤前后,以RTPCR和westernblot检测各组心肌细胞TNFα基因表达变化,同时以EMSA检测各组心肌细胞NFκB活性变化。结果缺氧复氧损伤前,各组心肌细胞TNFα基因表达水平差异无统计学意义,均较弱。损伤后各组心肌细胞TNFα基因表达水平较损伤前对照组显著升高(P<0.01),而EPO组TNFα基因表达水平低于其他各组(P<0.01)。缺氧复氧损伤前EPO组NFκB活性高于其他各组(P<0.01),损伤后各组NFκB活性显著高于损伤前对照组(P<0.01),EPO组NFκB活性低于其他各组(P<0.01)。结论EPO预处理抑制缺氧复氧后心肌细胞TNFα基因表达升高,可能与缺氧复氧后NFκB活性升高被抑制有关。EPO预处理可能通过NFκB活化的负反馈机制抑制缺氧复氧后心肌细胞NFκB活性的升高。

关键词：心肌红细胞生成素肿瘤坏死因子 NF-kB 心肌再灌注损伤动物实验替代试验

p53基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗的体内研究

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中华外科杂志 2002年第6期40卷 451-453,T004页

作者：黄强浦佩玉夏之柏蒋元文张云亭王春燕王广秀天津医科大学总医院神经外科 300052 新疆克拉玛依油田管理局医院

目的　探讨p5 3基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗在动物体内的疗效。　方法　以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型 ,原位注射腺病毒介导p5 3和单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因 ,腹腔给以更昔洛韦 (GCV ,15mg·kg-1·d-1,共 14d)。... 详细信息

目的　探讨p5 3基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗在动物体内的疗效。　方法　以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型 ,原位注射腺病毒介导p5 3和单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因 ,腹腔给以更昔洛韦 (GCV ,15mg·kg-1·d-1,共 14d)。观察荷瘤鼠生存期 ;强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小 ;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。评价p5 3基因对HSV TK GCV系统治疗胶质瘤的优化作用。　结果　p5 3基因明显增强HSV TK GCV的疗效 ,使荷瘤鼠生存期明显延长 ,肿瘤细胞凋亡明显增加 ;强化MRI显示 4周肿瘤消失。　结论　p5 3基因联合HSV TK

关键词： p53基因恶性胶质瘤自杀基因动物实验替代试验基因疗法腺苷激酶

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脱细胞猪肺动脉带瓣管道的支架材料研究

中华胸心血管外科杂志 2005年第5期21卷 286-288页

作者：闫鹏胡盛寿任兵周建业高峰中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院瓣膜研究室北京100037

目的研究心血管组织在经过适当脱细胞处理后的组织结构和生物学特性。方法对带瓣猪肺动脉管道进行脱细胞处理,所得组织和作为对照的新鲜天然组织分别进行HE染色、ETVG染色、免疫组化染色及扫描电镜检查,并测定各种大分子物质的含量;在... 详细信息

目的研究心血管组织在经过适当脱细胞处理后的组织结构和生物学特性。方法对带瓣猪肺动脉管道进行脱细胞处理,所得组织和作为对照的新鲜天然组织分别进行HE染色、ETVG染色、免疫组化染色及扫描电镜检查,并测定各种大分子物质的含量;在小鼠皮下移植6周后测定组织钙含量及钙定位染色。结果脱细胞后的组织内未见细胞结构,基质结构基本保持。胶原和弹性蛋白含量增加。脱细胞后的组织在小鼠皮下移植后钙含量较天然组织明显下降。结论经过合适的脱细胞处理后,可以去除几乎所有的细胞成分,基本保留的基质结构,能显著减轻在异种移植时引起的钙化。

关键词：肺动脉生物假体细胞去除术动物实验替代试验钙质沉着症脱细胞处理带瓣管道材料研究猪肺组织结构

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同种瓣移植后钙含量与免疫排斥反应的关系

中华胸心血管外科杂志 2006年第3期22卷 193-196页

作者：常青李守先徐平张社华谭金山山东大学齐鲁医院心血管外科青岛大学医学院附属医院心血管外科青岛大学医院中心实验室青岛大学医院电镜室

目的探讨同种异体带瓣大血管移植后钙含量与免疫排斥反应的关系。方法同种异体带瓣主动脉腹主动脉异位移植大鼠,随机分为异基因组(SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体)和同基因组(受体供体为同一种系的近交系大鼠)。各组随机分为5个小组,每... 详细信息

目的探讨同种异体带瓣大血管移植后钙含量与免疫排斥反应的关系。方法同种异体带瓣主动脉腹主动脉异位移植大鼠,随机分为异基因组(SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体)和同基因组(受体供体为同一种系的近交系大鼠)。各组随机分为5个小组,每组8只,分别于术后2、4、8、12、16周使用流式细胞仪测定大鼠CD25、CD71的表达,并且取出移植物,原子火焰吸收法测定钙含量,并对移植物进行光镜和电镜观察,同时免疫组化测定CD40L的表达。结果(1)异基因组移植后各个时间段的CD40L、CD25和CD71的表达均较同基因组高(P0.05)。(3)移植后异基因组出现内皮细胞脱落和平滑肌细胞坏死。结论同种瓣移植后的钙含量与免疫关系密切;移植后4周才开始钙化,随着时间的推移,钙含量逐渐升高,在12周达到高峰;移植后不同的时间钙含量并不与当时的免疫排斥水平正相关,但二者互相影响。

关键词：移植,同种心脏瓣膜,人工移植物排斥钙质沉着症流式细胞术动物实验替代试验

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无神经节细胞症大鼠结肠上皮离子转运的变化

中华小儿外科杂志 2005年第12期26卷 653-657页

作者：徐纪荣金先庆陈小章重庆医科大学附属儿童医院外科香港中文大学上皮细胞生物学研究中心

目的建立一种适合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植的实验性无神经节细胞症大鼠模型,并探讨模型大鼠结肠上皮离子转运的变化.方法 8～9周龄SD大鼠80只,随机分为二组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(benzalkon... 详细信息

目的建立一种适合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植的实验性无神经节细胞症大鼠模型,并探讨模型大鼠结肠上皮离子转运的变化.方法 8～9周龄SD大鼠80只,随机分为二组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(benzalkonium chloride,BAC)处理大鼠降结肠浆膜40 min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠X线检查,结肠测压、取处理段结肠行组织学检查,利用短路电流技术检测结肠上皮离子转运的变化.结果 BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,近端结肠扩张,且随着时间延长症状加重.组织学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.短路电流检测提示,与对照组比较,实验组大鼠结肠上皮各时间点跨膜电压、基础电流明显降低,而钠离子吸收电流占基础电流的百分比升高.另外,由Forskolin所引起的氯离子分泌电流也明显高于对照组,但二苯胺-2,2'-二羧酸阻断Forskolin所引起的Isc的百分比下降且小于1,而结肠跨膜电阻二组之间无差异.结论①采用0.1% BAC处理降结肠浆膜成功建立了实验性无神经节细胞症大鼠模型,为进一步结肠内MSCs移植分化为神经细胞的研究奠定了基础; ②实验性无神经节细胞症大鼠模型结肠黏膜屏障功能未受损伤, 结肠上皮离子转运功能紊乱, 提示巨结肠大便排空困难除与失神经之后的平滑肌和括约肌功能失调有关外,可能还与结肠离子转运的变化有关.

关键词：神经节细胞缺乏症结肠动物实验替代试验离子转运

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肺减容手术对肺血流动力学影响的实验研究

中华胸心血管外科杂志 2005年第4期21卷 228-230页

作者：张振葵侯生才李辉胡滨李彤首都医科大学附属北京朝阳医院

目的通过对犬肺气肿模型施行不同体积的肺减容(LVRS)手术观察其对肺血流动力学的影响,并探讨肺减容术肺组织的最佳切除体积。方法健康杂种犬24只,随机分成4组,I组为正常对照组,II～IV组经气管注入牛胰蛋白酶后饲养6周制成犬实验肺气肿模... 详细信息

目的通过对犬肺气肿模型施行不同体积的肺减容(LVRS)手术观察其对肺血流动力学的影响,并探讨肺减容术肺组织的最佳切除体积。方法健康杂种犬24只,随机分成4组,I组为正常对照组,II～IV组经气管注入牛胰蛋白酶后饲养6周制成犬实验肺气肿模型,其中II组用来验证模型的制备结果,III组和IV组行肺减容手术,分别予以切除肺组织重量占平均全肺总重量的20%～30%和30%～40%。术后饲养4周处死。手术前、手术后1h、手术后4周分别查动脉血气,测量平均肺动脉压(MPAP)、肺毛细血管嵌顿压(PCWP)及心排出量(CO),由以上结果计算出肺血管阻力(PVR)。结果III组手术4周后PaO2和PaCO2均明显改善(P0.05)。III组手术后1h的MPAP显著升高(P0.05);IV组术后始终高于手术前(P0.05),4周后有所下降(P<0.05);IV组则始终高于术前(P<0.05)。结论LVRS手术切除双肺总量的20%～30%是安全、有效的,适当的肺减容能够在有效地改善肺功能同时促进心脏功能的恢复。

关键词：肺气肿肺切除术动物实验替代试验血液动力学肺减容手术血流动力学影实验研平均肺动脉压肺气肿模型肺血流动力学

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高钙预处理对未成熟心肌的保护作用机制

中华胸心血管外科杂志 2006年第2期22卷 85-88页

作者：孙忠东高尚志毛志福王志维黄杰夏军武汉大学人民医院胸心外科

目的探讨高钙预处理对未成熟心肌保护作用及其可能的机制。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,24只新生日本长耳大白兔分为对照组(I/R),高钙预处理(HCP)组,多黏菌素B(PMB)组和5-hydroxydecanoate(5-HD)组4组,分别行不同的处理方法。... 详细信息

目的探讨高钙预处理对未成熟心肌保护作用及其可能的机制。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,24只新生日本长耳大白兔分为对照组(I/R),高钙预处理(HCP)组,多黏菌素B(PMB)组和5-hydroxydecanoate(5-HD)组4组,分别行不同的处理方法。以血流动力学指标、生化指标和心肌超微结构作为观察指标。结果HCP组心功能恢复优于I/R、PMB和5-HD组(P0.05)。结论高Ca2+预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制是可能是通过蛋白激酶C激活和线粒体ATP敏感性钾通道开放起作用。

关键词：动物实验替代试验心肌预处理钙元素细胞保护

局部注射不同浓度骨保护素对大鼠正畸牙移动影响的研究

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激光杂志 2011年第5期32卷 89-90,92页

作者：陈雁南裴帆李晓智陈新重庆医科大学附属第一医院口腔科重庆400016 四川康定甘孜州人民医院口腔科康定626000

目的:研究局部注射不同浓度骨保护素对大鼠牙齿移动的影响。方法:选用10周龄雄性SD大鼠60只,分为实验组与对照组,实验组分0.5mg/kg OPG组和0.05mg/kg OPG组,每组20只。在右上颌第一磨牙施加40G左右力使其移向近中。在实验组和对照组大... 详细信息

目的:研究局部注射不同浓度骨保护素对大鼠牙齿移动的影响。方法:选用10周龄雄性SD大鼠60只,分为实验组与对照组,实验组分0.5mg/kg OPG组和0.05mg/kg OPG组,每组20只。在右上颌第一磨牙施加40G左右力使其移向近中。在实验组和对照组大鼠右上颌第一磨牙腭侧粘骨膜下分别注入重组人骨保护素rhOPG-Fc和生理盐水。在ld、4d、7d、14d分别处死实验组与对照组大鼠各5只,通过模型测量实验组与对照组右上颌第一磨牙的移动距离,HE染色观察右第一磨牙近中根压力侧牙周组织形态的变化和TRAP染色观察破骨细胞数量的变化。结果:1.在7天和14天时注射OPG的两组大鼠的牙齿移动量显著低于对照组,同时高浓度0.5mg/kg OPG组的移动量显著小于低浓度0.05mg/kg OPG组。2.对照组压力侧能看到显著的牙槽骨吸收,而注射OPG组大鼠牙槽骨吸收不明显。***染色发现4天、7天和14天时第一磨牙近中根压力侧破骨细胞数量两个实验组显著少于对照组,而0.5mg/kg OPG组破骨细胞数量显著少于另外两组。结论:局部注射OPG后能显著减少破骨细胞的产生,同时能显著降低牙齿移动距离。高浓度的OPG比低浓度的OPG对抑制牙齿移动的作用更大。

关键词：骨保护素破骨细胞牙移动动物实验替代试验

生物材料补片修补大鼠左心室室壁瘤的实验研究

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中华胸心血管外科杂志 2005年第4期21卷 244-246页

作者：张平川张浩胡盛寿周建业王浩中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院外科卫生部心血管疾病再生医学研究重点实验室北京100037 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院超声科北京100037

目的建立大鼠左心室室壁瘤补片模型,比较生物可降解材料p(3HBco3HH)/PU(PHB)与脱细胞牛心包片在该模型上的表现。方法取SD大鼠,结扎左冠状动脉,制成心梗模型。心梗模型制作6周后,行超声心动图检查,筛选合格模型大鼠,随机分成3组,PHB组(9... 详细信息

目的建立大鼠左心室室壁瘤补片模型,比较生物可降解材料p(3HBco3HH)/PU(PHB)与脱细胞牛心包片在该模型上的表现。方法取SD大鼠,结扎左冠状动脉,制成心梗模型。心梗模型制作6周后,行超声心动图检查,筛选合格模型大鼠,随机分成3组,PHB组(9只),脱细胞牛心包片组(9只),对照组(6只),前两组分别行左心室室壁瘤补片术,对照组仅行开胸手术。术后8周再次行超声心动图检查,并取补片做病理学检查。结果PHB组与脱细胞牛心包片组较对照组心功能明显改善(P<0.01),但两组之间差异无统计学意义。大体病理显示两种补片局部均无室壁瘤形成,补片组织相容性好,心室面为内皮细胞覆盖。结论大鼠左心室室壁瘤补片模型可以满足进一步组织工程学心肌补片研究的需要,PHB补片与脱细胞牛心包片经过改进后可作为组织工程学心肌的支架材料。

关键词：心脏室壁瘤生物假体动物实验替代试验左心室室壁瘤补片修补 SD大鼠 p(3HB-co-3HH) 生物材料超声心动图检查实验研