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淫羊藿总黄酮及其含药血清对成骨细胞增殖及功能表达的影响

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中国药理学通报 2009年第5期25卷 613-616页

作者：武密山赵素芝李恩白霞郝秀红河北医科大学中医学院河北石家庄050091 石家庄市桥东区医院河北石家庄050041 河北医科大学生化教研室河北石家庄050091

目的研究淫羊藿总黄酮及其含药血清对体外培养大鼠成骨细胞(ROB)增殖和功能表达的影响。方法将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.2、2、20、100、200 mg.L-15种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2%、4%、8%、16%等4种体积浓度分别加入新生... 详细信息

目的研究淫羊藿总黄酮及其含药血清对体外培养大鼠成骨细胞(ROB)增殖和功能表达的影响。方法将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.2、2、20、100、200 mg.L-15种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2%、4%、8%、16%等4种体积浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究其对细胞增殖和功能表达的影响。细胞增殖采用MTT法进行分析,细胞功能表达是于培养d 5、10、15、20分别检测碱性磷酸酶活性(比色法)、骨钙素分泌量(放射免疫法)、钙盐沉积量(比色法)和矿化结节(组织化学法)等。结果TFE5种质量浓度均对ROB细胞增殖和分化无影响,2%和4%SRAT则表现出强烈的刺激细胞增殖活性并提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、矿化结节数和钙盐沉积量。结论淫羊藿治疗骨质疏松的直接物质基础可能并非TFE,而与其经口给予后吸收入血的TFE代谢产物及其诱生物有关。血清中的TFE代谢产物可促进细胞的功能表达增殖。

关键词：淫羊藿总黄酮含药血清成骨细胞功能表达增殖

人参皂苷Rg1对人神经干细胞功能表达的膜片钳研究

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中国中药杂志 2012年第22期37卷 3477-3480页

作者：姜英虹李英博赵香琴陈笛姜蓉王莎莉重庆医科大学神经科学研究中心重庆市神经生物重点实验室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:观察人参皂苷Rg1诱导人神经干细胞(neural stem cells of human,hNSCs)的功能表达。方法:采用全细胞膜片钳技术分析人参皂苷Rg1诱导hNSCs分化7 d时,神经元样细胞的膜电生理特性以及钠、钾离子通道的功能表达。结果:人参皂苷Rg1(20... 详细信息

目的:观察人参皂苷Rg1诱导人神经干细胞(neural stem cells of human,hNSCs)的功能表达。方法:采用全细胞膜片钳技术分析人参皂苷Rg1诱导hNSCs分化7 d时,神经元样细胞的膜电生理特性以及钠、钾离子通道的功能表达。结果:人参皂苷Rg1(20 mg·L-1)诱导hNSCs分化7 d时,神经元样细胞的膜静息电位为(-45.70±2.63)mV,膜电容为(26.89±1.91)pF,膜输入阻抗为(877.51±20.44)MΩ(与对照组相比均P功能表达和成熟。

关键词：人参皂苷Rg1 人神经干细胞功能表达膜片钳

CTX-M-14和CTX-M-24编码基因的检测及其功能表达

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中华医学杂志 2004年第17期84卷 1454-1459页

作者：熊自忠朱德妹汪复张婴元复旦大学华山医院抗生素研究所上海200040

目的　了解上海华山医院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生的超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的基因型及其流行情况。方法　双纸片法和美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型确定实验检测产ESBL菌株并对产ESBL菌株进行接合实验 ;... 详细信息

目的　了解上海华山医院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生的超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的基因型及其流行情况。方法　双纸片法和美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型确定实验检测产ESBL菌株并对产ESBL菌株进行接合实验 ;提取产ESBL菌株及其转移接合子中的质粒 ,进行电泳分析 ;采用琼脂稀释法 ,测定各种菌株对多种抗菌药物的敏感性 ;TEM、SHV、CTX M 1组、CTX M 13组、Toho 1组通用引物检测产ESBL菌株及其转移接合子 ;编码框以外设计引物、聚合酶链反应 (PCR)扩增转移接合子中的CTX M 13组全编码基因 ,克隆入 pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序 ,分析其基因型 ;对这些产ESBL菌株进行脉冲场电泳 (PFGE)检测。结果　产ESBL菌株对多种 β 内酰胺类和非 β 内酰胺类抗生素耐药 ;产ESBL菌株可通过接合转移方式传递其耐药性 ,转移频率多为 10 -4～ 10 -5,多数非 β 内酰胺类抗生素的耐药性可以和ESBL耐药性发生共转移 ,琼脂糖电泳显示接合子从供体菌得到了一个 >2 3 1kb的质粒 ;转移接合子中仅CTX M 13组通用引物检测为阳性 ;4株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 14编码基因序列的同源性为 10 0 % ,其余 6株转移接合子中CTX M 13组全编码基因序列与CTX M 2

关键词： CTX-M-14 CTX-M-24 编码基因功能表达 β内酰胺酶类头孢噻肟大肠杆菌克雷伯氏菌

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影响汉语话语标记功能表达的三个形式因素

汉语学习 2020年第2期 17-27页

作者：郑贵友北京语言大学人文学院北京100083

影响汉语话语标记功能表达的形式因素有三个:(1)话语标记的话语分布;(2)话语标记在语境中可有的同现成分;(3)话语标记自身在表达过程中的音律特征。其中,话语分布对于话语标记功能表达的影响比较直观也比较薄弱;同现成分通常对话语标记... 详细信息

影响汉语话语标记功能表达的形式因素有三个:(1)话语标记的话语分布;(2)话语标记在语境中可有的同现成分;(3)话语标记自身在表达过程中的音律特征。其中,话语分布对于话语标记功能表达的影响比较直观也比较薄弱;同现成分通常对话语标记的功能表达发挥特定的辅助性作用;话语标记自身的音律特征对其功能表达的影响最为直接、敏感;上述三个形式因素对话语标记功能表达的影响既有个性特征又相互联系。上述三个形式因素既可以作为特定话语标记功能表达考察的不同视角,也可以作为分别确定同一话语标记不同表达功能类型的语言形式特征。

关键词：话语标记功能表达形式因素

欧李八氢番茄红素合成酶cDNA克隆、序列分析及在大肠杆菌中的功能表达

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中国农业科学 2011年第23期44卷 4848-4857页

作者：张建成杜俊杰刘和王鹏飞薛晓芳穆霄鹏陈俊奇山西农业大学园艺学院

【目的】克隆、分析欧李[Cerasus humilis(Bge)Sok]八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,PSY)基因,并利用大肠杆菌异源表达体系验证其功能。【方法】以欧李果实中分离的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增到PSY cDNA中间片段,再利用RACE技术... 详细信息

【目的】克隆、分析欧李[Cerasus humilis(Bge)Sok]八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,PSY)基因,并利用大肠杆菌异源表达体系验证其功能。【方法】以欧李果实中分离的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增到PSY cDNA中间片段,再利用RACE技术获得该基因cDNA全长并分析其序列;然后利用PCR技术获得欧李PSY cDNA编码区全长,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组质粒pET-ChPSY,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并利用工程菌株验证融合蛋白6×His-PSY的催化活性。【结果】欧李PSY cDNA全长1 559 bp,最大开放读码框为1 194 bp,可编码398个氨基酸,命名为ChPSY。核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其它植物PSY核酸、氨基酸序列之间的相似性分别在70%和65%以上,并且发现欧李PSY的N末端存在1—55个氨基酸残基组成的转运肽信号序列,在37—58和219—240氨基酸区域包含2个跨膜结构域。SDS-PAGE分析表明,原核表达获得了具有较高表达水平的融合蛋白6×His-PSY,相对分子量约为45.8 kD。通过大肠杆菌异源表达证实ChPSY可编码一个功能蛋白,促进工程菌株中β-胡萝卜素含量增加。【结论】该研究成功地克隆了欧李PSY cDNA全长并在大肠杆菌中功能表达,为进一步研究该酶蛋白特性和欧李果实类胡萝卜素的合成机制奠定了基础。

关键词：欧李八氢番茄红素合成酶克隆功能表达

红肉脐橙番茄红素β-环化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的功能表达

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园艺学报 2008年第9期35卷 1269-1276页

作者：张建成陶能国周文静徐娟潘志勇邓秀新华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070

以‘红肉脐橙’(Citrussinensis Osbeck ‘Cara Cara’)果实中分离的mRNA为模板,经RT-PCR扩增到约1.6kb的番茄红素β-环化酶(lycopene β-cyclase,Lcyb)cDNA片段。序列分析表明,该cDNA长1654bp,包含两个转录本Lcyb1和Lcyb2,最大开放读码框均为1512bp,可编码504个氨基酸。通过PCR方法获得红肉脐橙Lcyb1和Lcyb2cDNA编码区全长,构建了Lcyb1和Lcyb2的原核表达载体pET-CitL-cyb1和pET-CitLcyb2,并通过颜色互补试验证实表达的融合蛋白6×His-Lcyb1和6×His-Lcyb2均可将番茄红素转化为β-胡萝卜素。

关键词：柑橘番茄红素β-环化酶基因克隆功能表达

血尿酸与纤维蛋白原Bβ链基因多态性及其功能表达的关系

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免疫学杂志 2010年第11期26卷 956-961页

作者：王淑娟许亚茹元小冬李静杨娜华北煤炭医学院附属开滦医院神经内科唐山063000 华北煤炭医学院附属医院医院感染管理科唐山063000

目的研究尿酸异常与纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bcl-1G/A位点基因多态性及其血浆Fg含量和聚合功能表达的关系。方法选取开滦集团离退休职工1386人,均抽取清晨空腹静脉血测定血生化、尿... 详细信息

目的研究尿酸异常与纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bcl-1G/A位点基因多态性及其血浆Fg含量和聚合功能表达的关系。方法选取开滦集团离退休职工1386人,均抽取清晨空腹静脉血测定血生化、尿酸(UA)、血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率(FMPV)、FMPV/Amax等反映Fg聚合功能的指标,并检测FgBβ链6个位点基因多态性。依据尿酸值将人群分为高尿酸血症组与正常尿酸组,探讨尿酸异常与Fg的关系。结果高尿酸与否人群FgBβ各多态性位点等位基因和基因型频率分布差别无统计学意义(P>0.05);在-854GG型、-455GG型、Bcl-1GG型人群中FMPV/Amax,-249CT+TT型人群中Fg浓度、FMPV、FMPV/Amax,-148CC型、448GG型人群中Fg浓度、Amax均为高尿酸血症组低于正常尿酸组(P功能表达的调控作用;高尿酸血症与脂代谢异常及其引发的慢性炎症反应等因素共同作用可导致脑梗死的发病。

关键词：尿酸纤维蛋白原 Bβ链基因多态性功能表达

腈水合酶NHaseK在大肠杆菌中的功能表达

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中国生物工程杂志 2016年第12期36卷 42-48页

作者：王丽燕王煜吴坚平徐刚杨立荣浙江大学化学工程与生物工程学院杭州310027 江南大学无锡214122

腈水合酶由α亚基和β亚基组成,活化元件对其功能表达至关重要,研究腈水合酶基因簇中各元件的表达比例对酶重组表达的影响具有重要意义。以来源于Klebsiella oxytoca KCTC 1686的腈水合酶（NHaseK）为研究对象,构建了多种表达策略,以期... 详细信息

腈水合酶由α亚基和β亚基组成,活化元件对其功能表达至关重要,研究腈水合酶基因簇中各元件的表达比例对酶重组表达的影响具有重要意义。以来源于Klebsiella oxytoca KCTC 1686的腈水合酶（NHaseK）为研究对象,构建了多种表达策略,以期实现α亚基、β亚基和活化元件17k差异表达。利用pETDuet-1质粒具有双T7启动子的特点,将上述基因以八种不同的组合方式分别插入于两个启动子之后。当将三段基因同时插入于第一个启动子之后时,亚基表达量均衡,比活力为0.78 U/mg蛋白,是亚基表达量比例为5∶3时的124%。在此基础上,在第二个启动子之后插入活化元件基因,活化元件表达水平提升2倍,比活提升5%,为0.82 U/mg蛋白。当将α亚基和β亚基插入于不同启动子之后时,酶活仅为对照组的10%,说明NHaseK的亚基必须同时转录才可形成成熟蛋白。进一步考察质粒拷贝数对大肠杆菌表达NHaseK的影响,确定15~20的质粒拷贝数足够实现NHaseK的功能表达。结果表明,亚基的均衡表达以及活化元件的充分表达对NHaseK的重组表达具有积极作用。

关键词：腈水合酶功能表达双启动子质粒拷贝数

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恽代英与纪念活动的社会功能表达

陕西师范大学学报（哲学社会科学版） 2015年第6期44卷 107-112页

作者：陈金龙华南师范大学马克思主义学院广东广州510631

纪念活动有其独特的功能,恽代英对纪念活动的功能表达主要集中于三个方面:借助纪念活动呈现历史事实、界定历史地位、总结历史经验,使历史记忆得到强化;借助纪念活动澄清革命的正当性、阐释革命任务与革命方略,彰显了纪念活动的表达功能... 详细信息

纪念活动有其独特的功能,恽代英对纪念活动的功能表达主要集中于三个方面:借助纪念活动呈现历史事实、界定历史地位、总结历史经验,使历史记忆得到强化;借助纪念活动澄清革命的正当性、阐释革命任务与革命方略,彰显了纪念活动的表达功能;借助纪念活动协调中苏关系、中日关系与促进世界革命的联合,展现了纪念活动的协调功能。

关键词：恽代英纪念活动功能表达