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剑叶龙血树4CL基因的克隆及其功能预测

中国现代中药 2023年第3期25卷 513-522页

作者：孙惠芳宋美芳张越李海涛王云强张忠廉中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所云南分所/云南省南药可持续利用研究重点实验室云南景洪666100 道地药材国家重点实验室北京100700

目的:对剑叶龙血树4CL家族基因进行克隆及功能预测,筛选出可能参与黄酮类生物合成相关的4CL基因,为深入阐述龙血竭的形成机制奠定基础。方法:在前期转录组测序数据的基础上,初步筛选4CL家族基因,并对其进行基因克隆及功能预测,筛选可能... 详细信息

目的:对剑叶龙血树4CL家族基因进行克隆及功能预测,筛选出可能参与黄酮类生物合成相关的4CL基因,为深入阐述龙血竭的形成机制奠定基础。方法:在前期转录组测序数据的基础上,初步筛选4CL家族基因,并对其进行基因克隆及功能预测,筛选可能与黄酮类及木质素类化合物合成相关的4CL基因;以剑叶龙血树组培苗为研究对象,对其进行过氧化氢、茉莉酸、水杨酸等胁迫处理,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析不同胁迫处理条件下4CL基因的相对表达变化规律。结果:在剑叶龙血树转录组数据库中共注释得到6个4CL基因并成功完成其基因克隆;其中3个基因(Dc4CL1、Dc4CL2和Dc4CL3)在龙血竭形成过程中呈现差异表达,Dc4CL1基因和Dc4CL2基因的表达模式与木质素类化合物生物合成的关键酶基因表达变化趋势一致,而Dc4CL3基因的表达模式与黄酮类化合物生物合成的关键酶基因表达变化趋势一致;系统发育分析结果显示,Dc4CL1和Dc4CL2属于Ⅰ类4CL基因,而Dc4CL3基因属于Ⅱ类4CLs基因;胁迫处理结果显示,Dc4CL均有差异性表达变化,其中Dc4CL3基因的相对表达量显著高于其他Dc4CL基因。结论:对龙血竭形成过程中起关键催化作用的4CL基因进行初步的筛选,其中Dc4CL1基因和Dc4CL2基因(Ⅰ类)可能主要参与木质素类化合物的生物合成,Dc4CL3基因(Ⅱ类)可能是龙血竭形成过程中黄酮类化合物生物合成的关键催化酶基因。

关键词：剑叶龙血树 4CL基因木质素黄酮类

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剑叶龙血树叶化学成分研究

中草药 2008年第10期39卷 1456-1458页

作者：李成宋启示中国科学院西双版纳热带植物园云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039

目的对剑叶龙血树叶的化学成分进行研究。方法采用柱色谱技术进行分离纯化，利用理化性质及波谱方法对实验得到的单体化合物进行结构鉴定。结果共得到13个单体化合物，分别鉴定为异鼠李素（Ⅰ）、槲皮素（Ⅰ）、25（R）-螺甾烷-5-烯-3... 详细信息

目的对剑叶龙血树叶的化学成分进行研究。方法采用柱色谱技术进行分离纯化，利用理化性质及波谱方法对实验得到的单体化合物进行结构鉴定。结果共得到13个单体化合物，分别鉴定为异鼠李素（Ⅰ）、槲皮素（Ⅰ）、25（R）-螺甾烷-5-烯-3β醇（Ⅲ）、纤细皂苷（Ⅳ）、25（R）-螺甾烷-5-烯-3β，14α-二醇（Ⅴ）、25（R）-螺甾烷-5-烯-3β，14α-二醇-3-O—β-D-葡萄吡喃糖苷（Ⅵ）、25（R）-螺甾烷-5-烯-3β，14α-二醇-3-O—α—L-鼠李吡喃糖基（1→4）-β-D-葡萄吡喃糖苷（Ⅶ）、25（R）-螺甾烷-14α-羟基-4-烯-3-酮（Ⅶ）、7β-羟基-谷甾醇-3-O—β-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅸ）、β-豆甾醇（Ⅹ）、豆甾醇-3-O—β-D-葡萄糖苷（Ⅺ）、胡萝卜苷（Ⅻ）、β-甲基葡萄糖苷（Ⅻ）。结论剑叶龙血树叶的主要成分为螺甾类化合物。化合物Ⅰ～Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ均为首次从该植物中得到。

关键词：剑叶龙血树螺甾类化合物黄酮醇类化合物

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剑叶龙血树氯仿部位化学成分的研究

药学学报 1998年第10期33卷 755-758页

作者：卢文杰王雪芬陈家源吕扬吴楠康文俊郑启泰广西中医药研究所中国医学科学院

从剑叶龙血树［Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｓ．Ｃ．Ｃｈｅｎ］树皮的氯仿提取物分离得到６个化合物，根据光谱解析和理化性质，分别鉴定为２，３，５，６四氯１，４二甲氧基苯（Ｉ），７羟... 详细信息

从剑叶龙血树［Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｓ．Ｃ．Ｃｈｅｎ］树皮的氯仿提取物分离得到６个化合物，根据光谱解析和理化性质，分别鉴定为２，３，５，６四氯１，４二甲氧基苯（Ｉ），７羟基４′甲氧基黄烷（ＩＩ），４′羟基３，５二甲氧基二苯代乙烯（ＩＩ），４′羟基２，６二甲氧基双氢查耳酮（ＩＶ），４′羟基２，４，６三甲氧基双氢查耳酮（Ｖ），６羟基７甲氧基３（４′羟苄基）色原烷（ＶＩ）。其中ＩＶ、ＶＩ为新化合物。

关键词：剑叶龙血树二甲氧基双氢查耳酮色原烷广西

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剑叶龙血树含树脂木材的生药学研究

中国中药杂志 1994年第11期19卷 648-650页

作者：林安平屠鹏飞郑俊华广西中医学院中药系北京医科大学药学院

剑叶龙血树Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ的树脂作为血竭使用，已有２０多年的历史，药理、毒理和临床研究表明本品与目前的进口血竭作用相似，作为广西血竭，已批准试产（一癸新药）。本文对其资源，形态组织学、理... 详细信息

剑叶龙血树Ｄｒａｃａｅｎａｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ的树脂作为血竭使用，已有２０多年的历史，药理、毒理和临床研究表明本品与目前的进口血竭作用相似，作为广西血竭，已批准试产（一癸新药）。本文对其资源，形态组织学、理化分析等方面进行了较系统的报道。

关键词：剑叶龙血树血竭生药学形态组织学理化分析

剑叶龙血树内生真菌的分离及体外抑菌活性筛选

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广西植物 2021年第7期41卷 1126-1134页

作者：赵玉瑛黄之镨张琼赵庆柏叶涛张晓梅云南中医药大学基础医学院中药学院昆明650500

为研究剑叶龙血树内生真菌资源多样性,初步探讨和筛选具有抑菌活性的特异性菌株以及进一步开发剑叶龙血树内生真菌的抗菌活性化合物。该文采用植物组织分离法从剑叶龙血树茎和叶中分离内生真菌,对内生真菌进行液体发酵7 d,经乙酸乙酯萃... 详细信息

为研究剑叶龙血树内生真菌资源多样性,初步探讨和筛选具有抑菌活性的特异性菌株以及进一步开发剑叶龙血树内生真菌的抗菌活性化合物。该文采用植物组织分离法从剑叶龙血树茎和叶中分离内生真菌,对内生真菌进行液体发酵7 d,经乙酸乙酯萃取后制得粗提物,并采用牛津杯扩散法,以10种常见病原菌和5种临床耐药菌为靶标检测其发酵粗提物的抑菌活性,对有较好抑菌活性的内生真菌进行分子鉴定。结果表明:(1)从剑叶龙血树茎、叶中共分离得到345株内生真菌,294株对一种以上指示菌有抑制活性;(2)其中84株内生真菌对5株临床耐药菌均有不同程度的抑制活性,占所分离菌株总数的24.35%,75%的内生真菌对金黄色葡萄球菌有抑制活性。这说明剑叶龙血树中存在多种有抑菌活性的内生真菌,为剑叶龙血树内生菌抗菌活性成分挖掘及新型抗菌药物筛选奠定了基础。

关键词：剑叶龙血树内生真菌分离抗菌活性真菌鉴定

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剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析

中草药 2005年第10期36卷 1545-1547页

作者：陈定芳宋启示中国科学院西双版纳热带植物园中国科学院研究生院云南昆明650223

目的通过对比剑叶龙血树根、茎、叶成分与龙血竭成分间的异同及对剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素A、B的测定,寻找龙血竭原料的可能来源。方法薄层色谱法及高效液相色谱技术。结果剑叶龙血树根、茎、叶中均含有微量的龙血素A,分别为:58、5... 详细信息

目的通过对比剑叶龙血树根、茎、叶成分与龙血竭成分间的异同及对剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素A、B的测定,寻找龙血竭原料的可能来源。方法薄层色谱法及高效液相色谱技术。结果剑叶龙血树根、茎、叶中均含有微量的龙血素A,分别为:58、53、15μg/g;叶中还含有微量的龙血素B,为2μg/g,而根、茎样品中未能检测到龙血素B。结论从色谱峰的积分面积及保留时间来看,剑叶龙血树根、茎、叶成分与血竭原料有少许的相关性,但差异显著;根、茎、叶3者间的化学组成成分也存在着显著差异,剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素量都较低,不能直接用作生产血竭的原料。

关键词：剑叶龙血树血竭龙血素高效液相色谱

中药龙血竭原植物剑叶龙血树的形态组织学研究及所含树脂的分布和成分检测

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中国中药杂志 2008年第10期33卷 1112-1117页

作者：樊兰兰屠鹏飞何鉴星陈虎彪蔡少青北京大学药学院天然药物学系北京100083 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101 香港浸会大学中医药学院中国香港

目的:对剑叶龙血树进行系统的组织学研究及所含树脂的分布和成分检测研究,为进一步研究剑叶龙血树树脂形成的成因和机理提供参考依据。方法:采用彩色显微照相技术对剑叶龙血树含树脂茎和无树脂茎,以及根、茎皮、叶进行系统的组织学研究... 详细信息

目的:对剑叶龙血树进行系统的组织学研究及所含树脂的分布和成分检测研究,为进一步研究剑叶龙血树树脂形成的成因和机理提供参考依据。方法:采用彩色显微照相技术对剑叶龙血树含树脂茎和无树脂茎,以及根、茎皮、叶进行系统的组织学研究;同时用高效液相色谱仪将含树脂茎和无树脂茎的指纹图谱进行了比较。结果:阐明了含树脂茎的纵切结构以及叶的表面观特征;除了茎木质部导管和纤维中有树脂外,发现剑叶龙血树受到损伤之后在茎皮层薄壁细胞、根的髓部和木质部亦有树脂的分布;含树脂茎和无树脂茎的指纹图谱显示剑叶龙血树茎在形成树脂后的化学成分中出现了较多的黄酮类、茋类成分。结论:剑叶龙血树无分泌组织出现,树脂出现在非分泌细胞中,其树脂形成的机制需要进一步研究。

关键词：剑叶龙血树形态组织学树脂指纹图谱

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剑叶龙血树内生放线菌活性菌株的筛选和鉴定

广西植物 2020年第5期40卷 727-734页

作者：田守征黄之镨赵玉瑛赵庆张晓梅云南中医药大学基础医学院昆明650500 云南中医药大学中药学院昆明650500

为筛选具有抗菌抗肿瘤活性的药用植物内生菌资源,该文对300余株分离自中国云南西双版纳及越南地区剑叶龙血树的内生放线菌采用琼脂块扩散法进行抗病原细菌活性筛选、平板对峙法进行抗真菌活性筛选、SRB法测定菌株的细胞毒活性及PCR扩增... 详细信息

为筛选具有抗菌抗肿瘤活性的药用植物内生菌资源,该文对300余株分离自中国云南西双版纳及越南地区剑叶龙血树的内生放线菌采用琼脂块扩散法进行抗病原细菌活性筛选、平板对峙法进行抗真菌活性筛选、SRB法测定菌株的细胞毒活性及PCR扩增方法筛选非核糖体肽合成酶NRPS基因及聚酮合酶PKS-I、PKS-Ⅱ基因;对得到的优势菌株经8种培养基进行发酵,采用10种病原细菌、3种病原真菌及2种人肿瘤细胞株测试其发酵粗提物的抗菌及抗肿瘤活性以确定最佳发酵培养基;用16S rRNA基因测序方法初步鉴定5株优势菌株的分类地位。结果表明:初筛得到5株抗菌活性、体外细胞毒活性及NRPS、PKS相关基因表达阳性的菌株S01-S05,其中4株(S01-S04)属于链霉菌属、1株(S05)属于类诺卡氏菌属;菌株经不同培养基发酵后产物的抗菌和抗肿瘤活性不同,其中Streptomyces sp.S04在7种培养基中的发酵提取物对8种测试病原菌均有较强抑制作用,且该菌株用Medium C的发酵提取物对人肝癌Hep G2细胞株抑制率达到100%,为剑叶龙血树内生菌活性成分挖掘及新型抗菌药物筛选奠定了基础。

关键词：剑叶龙血树内生放线菌抗菌活性抗肿瘤活性 16S rRNA基因分析

HPLC法测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4′-甲氧基黄烷和紫檀茋

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中草药 2013年第17期44卷 2471-2473页

作者：闵建国周艳林邹准尹文清刘华钢邹节明广西师范大学药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室广西桂林541004 桂林三金药业股份有限公司广西桂林541004 广西医科大学药学院广西南宁530021

目的建立一种同时测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4-甲氧基黄烷和紫檀芪的方法。方法采用HPLC法，色谱柱为YMC pack ODS-AQ C18（150mm×4．6mm，5μm），乙腈-0．2％磷酸（36：64）为流动相，检测波长分别为281、306nm，柱温35℃。结果7-... 详细信息

目的建立一种同时测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4-甲氧基黄烷和紫檀芪的方法。方法采用HPLC法，色谱柱为YMC pack ODS-AQ C18（150mm×4．6mm，5μm），乙腈-0．2％磷酸（36：64）为流动相，检测波长分别为281、306nm，柱温35℃。结果7-羟基-4’-甲氧基黄烷、紫檀芪分别在0．4076～1．5285μg（r=0．9998）、1．6408～6．1530μg（r=0．9997）内呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为97．88％、97．10％，RSD分别为0．82％、0．59％。结论该方法操作简便、重复性好，可用于剑叶龙血树及其提取物的质量控制。

关键词：剑叶龙血树 7-羟基-4′-甲氧基黄烷紫檀茋质量控制 HPLC