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血清素对巨核细胞形成前血小板、细胞骨架重构的影响

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血清素对巨核细胞形成前血小板、细胞骨架重构的影响

作者：谭凤娇汕头大学

学位级别：硕士

背景与目的:在出血性疾病中,血小板减少症是一个临床常见问题,其原因有肿瘤放、化疗及造血干细胞移植后骨髓抑制,化疗药物损伤巨核细胞本身,以及遗传性、免疫性疾病如MYH9相关性疾病、特发性血小板减少性紫癜等。目前治疗血小板减少症... 详细信息

背景与目的:在出血性疾病中,血小板减少症是一个临床常见问题,其原因有肿瘤放、化疗及造血干细胞移植后骨髓抑制,化疗药物损伤巨核细胞本身,以及遗传性、免疫性疾病如MYH9相关性疾病、特发性血小板减少性紫癜等。目前治疗血小板减少症的主要措施是血小板输注,但反复血小板输注,有输血反应或同种免疫的风险,甚至诱生抗血小板抗体而导致输注无效。如何迅速提高血小板数目及质量又避免抗体产生等不良作用已成为目前临床亟待解决的问题。近年来相继发现了粒细胞集落刺激因子、粒细胞单核细胞集落刺激因子、促红细胞生成素等细胞因子,较好的解决了粒细胞缺乏和贫血等问题,也为血小板减少症的治疗开辟了新的思路。1994年成功分离的促血小板生成素是目前临床用于提升血小板的药物之一,但其临床应用时间较短,且单独使用TPO并不能较快的有效治疗血小板减少症,更因其不可预测的副作用,如:TPO抗体的产生导致的严重出血,限制了TPO在临床应用前景。开发能直接、迅速促进血小板生成、释放的药物已经成为了临床的迫切需要。在巨核细胞形成前血小板和血小板释放的终末调节阶段,细胞骨架重组起着关键作用。细胞骨架由微管、微丝及中间纤维组成,是巨核细胞前血小板生成和血小板释放的动力,微管促进前血小板延伸,微丝促进前血小板分支、扩增,微管抑制剂nocodazole和微丝抑制剂细胞松弛素B或D能阻断前血小板的形成。血清素是一种吲哚胺,除了作为神经递质和血管活性物质,在中枢和周围神经系统及外周器官起着重要的生理功能之外,也是巨核细胞造血的一个选择性生长因子。5-HT能通过作用于巨核细胞表面的5-HTR促进巨核细胞增殖、分化。另一方面,5-HT参与细胞骨架重组的调节,能引起平滑肌细胞、神经元等细胞的细胞骨架重构,从而影响这些细胞的运动、分化。我们近期的工作初步观察到:加入5-HT作用后,人巨核细胞白血病细胞株Meg-01细胞增殖分化的同时出现肌动蛋白重构。因此,我们设想:血清素可能通过5-HTR介导细胞骨架重构,促进前血小板形成和血小板释放。本研究希望通过探讨血清素对前血小板形成、巨核细胞骨架重构及巨核细胞表面标志的影响,完善对血小板产生规律以及血清素在血小板生成过程中的作用的认识,有利于新型促血小板生成和释放药物的研发,满足临床迅速提高血小板的迫切需要。方法:本研究主要包括观察血清素促使巨核细胞伪足形成、胞质延伸形成前血小板、细胞骨架重构和探索血清素对巨核细胞表面标志CD41的表达的影响两部分。实验分为4组,分别为:空白对照组;5-HT(200nmol/l)组;5-HT+Kentaserin(5-HT200nmol/l,Kentaserin10μmol/l)组;TPO(50ng/ml)组。首先,分别运用倒置相差显微镜和MTT法再次验证我们的前期工作,即血清素对巨核细胞增殖起促进作用;其次,采用倒置相差显微镜及透射电子显微镜观察血清素对巨核细胞胞质形态改变、形成前血小板及细胞骨架重构的影响;最后通过免疫细胞化学法探讨血清素能否增强巨核细胞表面标志CD41的表达。结果:在倒置相差显微镜下观察,5-HT组和TPO组细胞密度均明显高于对照组和5-HT+Kentaserin组,与MTT法对细胞增殖定量研究的结果同时显示:5-HT组和对照组、5-HT+Kentaserin组比较差别均有统计学意义(P≤0.01),和TPO组比较无显著性差异(P＞0.05)。倒置相差显微镜的观察同时显示,5-HT组和TPO组巨核细胞伸出伪足、胞质延伸明显多于对照组及5-HT+Kentaserin组,部分前血小板轴延伸长度甚至达胞质本身长度的数倍,5-HT组巨核细胞伪足形成但胞质无延伸比率(22.7±5.98%)及伪足形成且胞质延伸的比率(15.4±5.97%)与对照组(7.3±3.27%及3.6±1.56%)、5-HT+Kentaserin组(8.8±4.5%及5.3±3.31%)比较差异均有显著性(P≤0.05),与TPO组(22.4±7.30%及7.5±3.59)比较差异无统计学意义(P＞0.05)。透射电子显微镜的观察可见5-HT组由胞浆延伸形成的轴突较多,其中含较多纵向分布的微管;轴突周边可见张力丝,轴突可见分叉,分叉处致密带形成;胞体及轴突可见散在类似分隔膜系统的空泡状内容物及α颗粒;偶可见释放出的血小板状颗粒,颗粒中含α颗粒或(和)类似分隔膜系统的空泡状内容物。对照组及5-HT加拮抗剂组的巨核细胞形成的轴突较少,分叉不多,类似分隔膜系统的空泡状内容物及α颗粒较少5-HT组或无。TPO组可以见到与5-HT组类似的变化。免疫细胞化学检测巨核细胞表面分化抗原CD41,5-HT组和TPO组CD41阳性细胞率(分别为18.94±3.94%和20.92±7.03%)较对照组(14.28±3.79%)及5-HT+Kentase

关键词：血清素巨核细胞细胞骨架前血小板

影响机采血小板采集量相关因素的Logistic回归分析

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中国输血杂志 2010年第S1期23卷 14-15页

作者：严根兴汪峰潘晔庄小狮湖州市中心血站 313000

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血小板生成研究进展

中国细胞生物学学报 2022年第1期44卷 51-58页

作者：黄柏铭刘翠翠赵晶晶王洪涛周家喜中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心细胞生态海河实验室天津300020

血小板生成,即血小板颗粒由巨核细胞释放,进而在外周血逐步成熟的过程。随着解析血小板功能多样性以及高效再生策略的需求,对于血小板生成过程的全面认知显得尤为重要。然而,以往研究大多聚焦在造血干祖细胞和巨核细胞分化阶段,对于后... 详细信息

血小板生成,即血小板颗粒由巨核细胞释放,进而在外周血逐步成熟的过程。随着解析血小板功能多样性以及高效再生策略的需求,对于血小板生成过程的全面认知显得尤为重要。然而,以往研究大多聚焦在造血干祖细胞和巨核细胞分化阶段,对于后期血小板生成过程的了解相对较少。该文对血小板生成过程中血小板形态、分子特征、功能的动态变化以及调控机制等进行了系统梳理,以期为理解血小板功能多样性、转录组异质性以及体外再生策略等方面提供新的思路。

关键词：血小板生成前血小板血小板前体网织血小板

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血小板生成调控机制研究进展

国际输血及血液学杂志 2013年第2期36卷 167-170页

作者：王敏(综述) 郑以州(审校) 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

血小板（PLT）是参与血栓形成及止血的重要血液成分，其质量或数量的异常可导致多种出血及血栓性疾病的发生。PLT的生成是一个多因素参与的复杂调控过程。目前发现，PLT的产量、大小及形态受多种转录因子、骨架蛋白、凋亡酶、整合素、... 详细信息

血小板（PLT）是参与血栓形成及止血的重要血液成分，其质量或数量的异常可导致多种出血及血栓性疾病的发生。PLT的生成是一个多因素参与的复杂调控过程。目前发现，PLT的产量、大小及形态受多种转录因子、骨架蛋白、凋亡酶、整合素、细胞因子及切应力等因素的调控。深入地探讨及阐明PLT生成的调控机制，不仅有助于明确相关疾病的病理机制，还可为PLT相关疾病的临床诊治提供坚实的理论依据。

关键词：血小板前血小板巨核细胞生成调控机制

糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抑制剂相关性血小板减少症:临床预测指标及其对预后的影响

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世界核心医学期刊文摘（心脏病学分册） 2005年第3期1卷 23-24页

作者： George B.J. Eckart R.E. Shry E.A. Simpson D.E. 高登峰 Department of Internal Medicine Brooke Army Medical Center 3851 Roger Brooke Drive San Antonio TX 78234-6200 United States Dr.

Glycoprotein Ⅱb/Ⅲa inhibitors are used as an adjunct to antiplatelet therapy in percutaneous coronary intervention to reduce postprocedural enzyme elevations. Previous studies have shown a risk for thrombocytopenia that is associated with these agents. We sought to evaluate the incidence and outcomes of glycoprotein Ⅲb/Ⅲa inhibitor-associated thrombocytopenia in an unselected series of patients undergoing percutaneous coronary intervention. We reviewed 984 interventions performed on 908 subjects over a specific time period. Glycoprotein Ⅲb/Ⅳa inhibitors were used in 58.8%of cases. Their use increased from 38 to 82%during the study period(p 0.05). The occurrence of thrombocytopenia was not associated with increased in-hospitalmortality, 1-yearmortality,myocardial infarction or revascularization, but was associated with a hospital stay twice as long as in those patients without thrombocytopenia(5.6±11.3 vs. 2.1±2.2 days, p< 0.001). Of the 5.4%of patients who developed thrombocytopenia, only 2 patients(7.1%) required platelet or blood cell transfusion.

关键词：临床预测介入治疗前血小板年死亡率酶活性

三尖杉酯碱和脾切除治疗原发性血小板减少性紫癜42例疗效分析

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华南国防医学杂志 1994年第3期8卷 228-229页

作者：熊金元瞿群华苏洪武汉总医院武汉430070

原发性血小板减少性紫癜(ITP)系常见的一种出血性疾病,治疗效果不甚满意。基于ITP与自身免疫有关,我们首创采用三尖杉酯碱治疗ITP20例,脾切除治疗ITP22例,总结分析如下。资料和方法本文两组42例均为我院住院病人。

关键词：三尖杉酯碱出血性疾病巨核细胞自身免疫学术会议长春新碱环磷酞胺前血小板复治病例骨髓像

血小板减少患者输注冰冻与新鲜浓缩血小板的对比

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国外医学.输血及血液学分册 1987年第3期 185-186页

作者：王小渝

本文介绍了10例因接受强烈化疗后血小板减少的病人（其中实体瘤9例,缓解的急粒白血病1例）输注冰冻与新鲜血小板疗效的对比观察.冰冻血小板系患者化疗或骨髓移植前采集的自身血小板以二甲亚砜-80℃—-95℃保存,新鲜血小板采自单一正常... 详细信息

本文介绍了10例因接受强烈化疗后血小板减少的病人（其中实体瘤9例,缓解的急粒白血病1例）输注冰冻与新鲜血小板疗效的对比观察.冰冻血小板系患者化疗或骨髓移植前采集的自身血小板以二甲亚砜-80℃—-95℃保存,新鲜血小板采自单一正常供者。作者对冰冻前后的血小板检测了血小板第4因子（PF4-）,丙二醛产物和电子显微镜形态学观察,输注血小板后计算了校正增殖.

关键词：浓缩血小板血小板检测骨髓移植二甲亚砜血小板输注实体瘤冰冻保存出血时间前血小板合成前列腺素

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设定2U机采血小板个体化采集标准的探讨

中国输血杂志 2012年第S1期25卷 140-140页

作者：范莉华王凌峰吕灵杰徐卫平解放军第175医院厦门大学附属东南医院输血科 361000

目的探讨设定2U机采血小板个体化采集标准及可行性分析。方法对机采前血小板计数(Plt)个体化采集标准进行理论推导,确保机采后献血者血循环中Plt≥100×109/L,终产品Plt≥5.0×1011/2U质控标准,机采前Plt最低必须达5.0×1011/TBV+100×1... 详细信息

目的探讨设定2U机采血小板个体化采集标准及可行性分析。方法对机采前血小板计数(Plt)个体化采集标准进行理论推导,确保机采后献血者血循环中Plt≥100×109/L,终产品Plt≥5.0×1011/2U质控标准,机采前Plt最低必须达5.0×1011/TBV+100×109/L的个体化标准,并对个体化采集标准进行可行性分析。结果304例献血者机采2U血小板后,献血者血循环中Plt在正常范围,终产品Plt、WBC、RBC含量符合质控标准。结论符合机采前Plt≥5.0×1011/TBV+100×109/L个体化采集标准的献血者机采2U血小板安全可行。

关键词：机采血小板质控标准可行性分析前血小板

Capropril对SHR血小板内Ang’Ⅱ含量、ACE活性和高血压患者血小板内Ang’Ⅱ含量的影响

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 262-262页

作者：吕俊升马骥张奕方璐浙江医科大学附属第二医院心血管病研究室

Ｃａｐｒｏｐｒｉｌ对ＳＨＲ血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含量、ＡＣＥ活性和高血压患者血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含量的影响浙江医科大学附属第二医院心血管病研究室吕俊升，马骥，张奕，方璐本研究发现ＳＨＲ或高血压患者治疗前血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含... 详细信息

Ｃａｐｒｏｐｒｉｌ对ＳＨＲ血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含量、ＡＣＥ活性和高血压患者血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含量的影响浙江医科大学附属第二医院心血管病研究室吕俊升，马骥，张奕，方璐本研究发现ＳＨＲ或高血压患者治疗前血小板内Ａｎｇ’Ⅱ含量低于Ｗｉｓｔａｒ鼠或正常人。经ｃ...

关键词： ACE Ang Capropril SHR 心血管病前血小板负相关