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前脂肪细胞源il-33在3T3-L1细胞成脂分化过程中的作用及其机制探讨

前脂肪细胞源IL-33在3T3-L1细胞成脂分化过程中的作用及其机制探讨

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作者：庄思琪中南大学

学位级别：硕士

目的:探明前脂肪细胞源il-33在3T3-L1细胞成脂分化过程中的作用及机制,为探究il-33在肥胖及其相关性疾病中起到的具体作用提供新的研究视角。方法:(1)通过高脂饮食喂养构建肥胖小鼠模型,取肠系膜脂肪组织检测il-33的转录与表达水平;(2)... 详细信息

目的:探明前脂肪细胞源il-33在3T3-L1细胞成脂分化过程中的作用及机制,为探究il-33在肥胖及其相关性疾病中起到的具体作用提供新的研究视角。方法:(1)通过高脂饮食喂养构建肥胖小鼠模型,取肠系膜脂肪组织检测il-33的转录与表达水平;(2)对3T3-L1前脂肪细胞进行常规诱导成脂分化及油酸处理的过度成脂分化,诱导过程中收集细胞和培养上清,检测il-33的转录、蛋白表达及分泌水平;(3)使用慢病毒基因干扰载体敲低3T3-L1前脂肪细胞的il-33表达水平,对敲低后的细胞进行常规诱导成脂分化及油酸处理的过度成脂分化,在诱导后D10天收取细胞样本,检测细胞脂滴聚集情况、TG含量、及成脂分化、脂解相关转录因子的表达情况;(4)对敲低il-33表达的3T3-L1前脂肪细胞进行常规诱导成脂分化及油酸处理的过度成脂分化,并在诱导过程中加入小鼠重组il-33蛋白,在诱导后D10天收取细胞样本,检测细细胞脂滴聚集情况、TG含量、及成脂分化、脂解相关转录因子的表达情况;(5)对敲低il-33表达的3T3-L1前脂肪细胞进行常规诱导成脂分化及油酸处理的过度成脂分化,在诱导后D10天收取细胞样本,通过WB方式检测Wnt/β-Catenin经典通路关键蛋白的表达情况,评估Wnt/β-Catenin经典通路是否参与il-33调控成脂分化的过程。结果:(1)高脂饮食肥胖小鼠的肠系膜脂肪组织中,il-33转录水平和蛋白水平显著升高(P前脂肪细胞常规成脂和过度成脂的过程中,il-33转录水平、蛋白表达、分泌水平均显著升高,且过度成脂分化组il-33的表达水平显著高于常规诱导分化组;(3)敲低3T3-L1前脂肪细胞的il-33表达后,成脂分化过程中的脂滴聚集程度显著增加,TG含量显著升高,PPAR-γ、CEBP-α、Fabp-4等成脂分化相关因子,ATGL、HSL、LPL等脂解相关因子的转录水平及蛋白表达水平均显著升高,外源性加入重组il-33蛋白可显著逆转因敲低il-33而导致的升高趋势;(4)敲低3T3-L1前脂肪细胞的il-33表达会显著抑制Wnt/β-Catenin经典通路关键蛋白β-Catenin和Cyclin D1的表达。结论:(1)高脂饮食致肥环境可以促进小鼠肠系膜脂肪组织的il-33表达;(2)前脂肪细胞源il-33抑制3T3-L1细胞成脂分化;(3)Wnt/β-Catenin经典通路参与了前脂肪细胞源il-33调控3T3-L1成脂分化的过程。图14幅,表11个,参考文献64篇

关键词：肥胖前脂肪细胞源il-33 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化 Wnt/β-Catenin

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