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环氧合酶-2蛋白及前列腺素类物质与卵巢浆液性癌生物学行为的关系

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中华妇产科杂志 2002年第11期37卷 687-690页

作者：唐丽霞王敏马坚伟中国医科大学附属第二医院妇产科大连市第六人民医院外科

目的　研究环氧合酶 2 (COX 2 )以及前列腺素类物质与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系。方法　采用免疫印迹法及放射免疫法对 5 4例卵巢浆液性肿瘤组织 (其中良性卵巢浆液性肿瘤 11例 ,交界性良性卵巢浆液性肿瘤 10例 ,卵巢浆液性癌 3 ... 详细信息

目的　研究环氧合酶 2 (COX 2 )以及前列腺素类物质与卵巢浆液性肿瘤发生、发展的关系。方法　采用免疫印迹法及放射免疫法对 5 4例卵巢浆液性肿瘤组织 (其中良性卵巢浆液性肿瘤 11例 ,交界性良性卵巢浆液性肿瘤 10例 ,卵巢浆液性癌 3 3例 )和 10例正常卵巢组织进行COX 2蛋白、前列腺素 (PG)E2 、6 酮前列腺素F1α(6 keto PGF1α)及血栓素 (TX)B2 水平检测。结果　 (1)COX 2蛋白表达 :卵巢浆液性癌组织的阳性表达率为 82 % (2 7/ 3 3 )、相对含量为 2 0 0 8± 3 5 3 ,交界性卵巢浆液性肿瘤分别为 90 % (9/ 10 )、2 0 61± 3 0 3 ,均明显高于良性卵巢浆液性肿瘤及正常卵巢 (阳性表达率均为0 ,相对含量分别为 15 0 4± 0 12及 15 3 3± 0 60 ) ,差异均有显著性 (P 0 0 5 )。 (2 )前列腺素类物质PGE2 、6 keto PGF1α及TXB2 水平 :卵巢浆液性癌明显高于交界性、良性肿瘤和正常卵巢 (P 0 0 5 ) ;卵巢浆液性癌患者不同临床分期 (Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期 )、病理分级及有无腹水、有无淋巴结转移间比较 ,差异均无显著性 (

关键词：卵巢肿瘤前列腺素内过氧化物合酶前列腺素免疫印迹法放射免疫测定

白细胞介素-10抑制人肾系膜细胞环氧化酶-2表达及其催化的前列腺素E_2释放的实验研究

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中国病理生理杂志 2002年第8期18卷 931-934页

作者：吴元俊陈荣华陈吉庆张爱华潘晓勤南京医科大学小儿肾脏病研究中心江苏南京210029 南京医科大学第一附属医院儿科江苏南京210029

目的 :观察IL - 1 0对IL - 1 β诱导的人系膜细胞 (HMC)前列腺素E2 (PGE2 )释放及环氧化酶 - 2 (cy clooxygenase - 2 ,COX - 2 )基因和蛋白表达的影响。方法 :应用放射免疫测定法检测HMC培养上清中PGE2 ,应用RT-PCR和Westernblot分别检... 详细信息

目的 :观察IL - 1 0对IL - 1 β诱导的人系膜细胞 (HMC)前列腺素E2 (PGE2 )释放及环氧化酶 - 2 (cy clooxygenase - 2 ,COX - 2 )基因和蛋白表达的影响。方法 :应用放射免疫测定法检测HMC培养上清中PGE2 ,应用RT-PCR和Westernblot分别检测COX - 2mRNA和蛋白水平。结果 :①IL - 1 β显著上调PGE2 释放及COX - 2基因和蛋白的表达 (P均 0 0 5) ;③IL -1 0可呈剂量依赖性地下调IL - 1 β诱导的PGE2 释放及COX - 2mRNA和蛋白表达 (P <0 0 1 )。结论 :IL - 1 0抑制IL -1 β诱导的HMCPGE2 释放及COX - 2表达 ,提示IL - 1

关键词：白细胞介素10 白细胞介素1 前列腺素E类前列腺素内过氧化物合酶系膜细胞肾小球疾病

RNA干扰对兔角膜基质细胞环氧化酶2与基质金属蛋白酶2表达的抑制作用研究

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中华眼科杂志 2008年第9期44卷 831-838页

作者：赵桂秋杜兆东梁涛刘建伟张丽娜张振华青岛大学医学院附属医院眼科 266003

目的探讨针对环氧化酶2（COX-2）的RNA干扰（RNAi）对兔角膜基质细胞中COX-2与基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。方法实验研究。体外培养兔角膜基质细胞，测定阳离子脂质体介导的小干扰RNA（siRNA）在兔角膜基质细胞中的转染率，设... 详细信息

目的探讨针对环氧化酶2（COX-2）的RNA干扰（RNAi）对兔角膜基质细胞中COX-2与基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。方法实验研究。体外培养兔角膜基质细胞，测定阳离子脂质体介导的小干扰RNA（siRNA）在兔角膜基质细胞中的转染率，设计并合成3条针对兔COX-2基因的短发卡RNA（shRNA）1、2、3和1条阴性对照shRNA，利用阳离子脂质体介导转染正常与IL-1α刺激后的兔角膜基质细胞，在IL-1α刺激后6、12、24、48、72h收集细胞，实时荧光定量聚合酶链反应检测兔角膜基质细胞中COX-2和MMP-2基因的表达变化，并与对照组进行比较。同一时间点各组间比较采用单因素方差分析，处理组两两比较采用q检验。结果阳离子脂质体能够有效介导siRNA转染体外培养的兔角膜基质细胞，转染率可达70％～80％。IL-1α刺激后兔角膜基质细胞中COX-2与MMP-2 mRNA的表达较空白对照组显著升高；在不同时间点，生物合成的3条针对COX-2的靶向shRNA中shRNA-2能显著抑制IL—1α刺激后的兔角膜基质细胞中COX-2、MMP-2 mRNA表达，抑制率最高可分别达83．04％、73．69％，与单纯IL-1α刺激组相比差异均有统计学意义（q=24．03，P=0．00；q=14．76，P=0．00）；而shRNA-1、shRNA-3、阴性对照shRNA转染组与单纯IL-1α刺激组相比，COX-2 mRNA的表达差异无统计学意义（F=0．02，P=0．99），MMP-2 mRNA的表达差异也无统计学意义（F=0．02，P=0．98）。结论针对COX-2的RNAi能够有效抑制IL-1α诱导后的兔角膜基质细胞中COX-2与MMP-2的表达。

关键词： RNA,小分子干扰角膜基质前列腺素内过氧化物合酶明胶酶A

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环氧合酶-2对乳腺癌淋巴管形成的影响

中华外科杂志 2008年第2期46卷 132-135页

作者：郭贵龙杨光伦李卓英尤捷杨凯黄督平胡孝渠张筱骅温州医学院附属第一医院肿瘤外科 325000 重庆医科大学附属第一医院普外科温州医学院附属第一医院ICU 325000

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）对人乳腺癌淋巴管形成的影响。方法1998年11月至2002年3月行手术治疗并经病理证实的乳腺癌患者94例，随访83例，失访11例。免疫组织化学方法检测COX-2、血管内皮生长因子-C（VEGF—C）及D2-40在乳腺癌中的... 详细信息

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）对人乳腺癌淋巴管形成的影响。方法1998年11月至2002年3月行手术治疗并经病理证实的乳腺癌患者94例，随访83例，失访11例。免疫组织化学方法检测COX-2、血管内皮生长因子-C（VEGF—C）及D2-40在乳腺癌中的表达。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western印迹法分别检测加入不同浓度COX-2抑制剂尼美舒利后VEGF-CmRNA及蛋白的变化。Western印迹法检测加入外源性前列腺素E2（PGE2）和曲妥珠单抗后VEGF—C蛋白的变化。结果46．8％的乳腺癌组织呈COX-2高表达，51．1％呈VEGF—C高表达。COX-2与VEGF—C（P〈0．01）、淋巴管密度（P=0．032）和淋巴结转移（P＝0．035）呈正相关，与乳腺癌患者的无病生存率（P=0．010）和总生存率（P＝0．040）呈负相关。尼美舒利以剂量依赖性方式下调VEGF-CmRNA及蛋白表达，而PGE2上调其蛋白表达。曲妥珠单抗可显著降低VEGF—C的蛋白表达。结论COX-2可通过上调VEGF—C的表达，促进乳腺癌的淋巴管形成和淋巴结转移，并影响乳腺癌患者的预后。

关键词：乳腺肿瘤前列腺素内过氧化物合酶内皮生长因子预后

局灶性脑缺血再灌注后炎症反应及黏附分子、环氧合酶-2的表达

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中华神经科杂志 2005年第10期38卷 632-635页

作者：石志鸿贾建平张本恕天津医科大学总医院神经内科首都医科大学宣武医院神经内科

目的探讨环氧合酶2(COX2)和黏附分子在再灌注后炎症损伤中的作用。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)。用免疫印迹及免疫组化方法观察再灌注后不同时间脑组织细胞间黏附分子1(ICAM1)、E选择素及COX2的表达。白细胞髓过氧化物... 详细信息

目的探讨环氧合酶2(COX2)和黏附分子在再灌注后炎症损伤中的作用。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)。用免疫印迹及免疫组化方法观察再灌注后不同时间脑组织细胞间黏附分子1(ICAM1)、E选择素及COX2的表达。白细胞髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒检测MPO活性。结果假手术组及再灌注4、22、46h组,缺血脑皮质及纹状体中COX2含量相对灰度值分别为0.7642±0.0763、1.5382±0.1047、1.6491±0.3265、1.8020±0.3719及0.7104±0.0891、2.2061±0.2143、1.7897±0.3537、1.8018±0.5703;ICAM1相对灰度值分别为0.6845±0.0531、0.9115±0.0422、0.9426±0.0407、1.0756±0.0467及0.6583±0.0361、0.9439±0.0746、0.9975±0.1532、0.8808±0.0497。再灌注各组MPO活性、COX2、ICAM1和E选择素表达均较假手术组高。免疫组化显示,缺血再灌注后,缺血边缘区出现大量E选择素和ICAM1免疫染色阳性的微血管,在皮质的COX2阳性细胞主要为神经元,纹状体出现了免疫阳性的胶质细胞和血管内皮细胞。再灌注后不同时间皮质COX2与ICAM1表达量呈正相关(n=6,r=0.973,P素表达量呈正相关(n=6,r=0.958,P内皮黏附分子的表达都在再灌注后炎症反应中发挥重要的作用。

关键词：脑缺血再灌注胞间黏附分子1 前列腺素内过氧化物合酶

人子宫肌层诱导型环加氧酶剪接变异体cDNA片段的克隆和序列测定

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中华妇产科杂志 2003年第5期38卷 270-272页

作者：黄引平叶笃筠吴萍黄云峰孙炜应红钢盘茜万敬员袁萍张代娟温州医学院附属第一医院妇产科 325000 华中科技大学同济医学院病理生理教研室

目的　寻找人子宫肌层诱导型环加氧酶 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )选择性剪接变异体。方法　运用自行设计的COX 2mRNA引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离临产与未临产产妇子宫肌层COX 2mRNA ,再对电泳所获条带进行亚克隆... 详细信息

目的　寻找人子宫肌层诱导型环加氧酶 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )选择性剪接变异体。方法　运用自行设计的COX 2mRNA引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离临产与未临产产妇子宫肌层COX 2mRNA ,再对电泳所获条带进行亚克隆、测序。结果　未临产产妇子宫肌层未检测到COX 2mRNA ,临产产妇子宫肌层不仅检测到COX 2mRNA ,而且分离出一新条带 ,经亚克隆及测序 ,证实该条带系人子宫肌层COX 2蛋白DNA的第 7、8外显子间的内含子序列被保留所致。结论　临产产妇子宫肌层COX 2mRNA存在选择性剪接变异体。该变异体的发现。

关键词：子宫肌层诱导型环加氧酶 cDNA片段克隆序列测定逆转录聚合酶链反应分娩前列腺素内过氧化物合酶

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翼状胬肉中环氧合酶2的表达及其相关研究

中华眼科杂志 2007年第10期43卷 881-884页

作者：高媛张明昌彭云华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科武汉430022

目的探讨翼状胬肉中环氧合酶2（COX-2）的表达及其选择性抑制剂尼美舒利的相关抑制作用。方法翼状胬肉组织与对照的正常结膜组织标本分别取自在华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科行手术治疗的患者，采用免疫组织化学法分别检测组... 详细信息

目的探讨翼状胬肉中环氧合酶2（COX-2）的表达及其选择性抑制剂尼美舒利的相关抑制作用。方法翼状胬肉组织与对照的正常结膜组织标本分别取自在华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科行手术治疗的患者，采用免疫组织化学法分别检测组织中COX-2的表达情况；原代培养人翼状胬肉成纤维细胞（HPF），经鉴定后，分别应用浓度0、1、10、100ng／ml碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）作用24h，采用Western—blot法分别检测HPF中COX-2蛋白的表达变化；分别应用浓度0、25、50、100、200μmol／L尼美舒利作用于HPF，分别培养24、48、72、96h，四唑氮蓝还原法（MTT）检测不同浓度尼美舒利在不同时间对HPF增殖的影响。结果免疫组织化学结果显示翼状胬肉组织中COX-2阳性表达率为70％。Western blot法显示在不同浓度bFGF刺激下，HPF中COX-2蛋白的表达均呈阳性，且表达呈剂量依赖性；MTT试验证实尼美舒利呈剂量依赖性和时间依赖性抑制成纤维细胞的增殖。用药24h后50μmol／L浓度即开始明显抑制（P〈0．05）。结论bFGF可以刺激HPF的增殖并诱导翼状胬肉中COX-2的表达上调。COX-2可能参与翼状胬肉的形成；而应用选择性COX-2抑制剂尼美舒利可显著抑制HPF的增殖。

关键词：翼状胬肉成纤维细胞前列腺素内过氧化物合酶成纤维细胞生长因子磺胺类

Cox-2在乳腺癌多药耐药中的作用及其与P-gp、MRP1的关系

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实用肿瘤杂志 2010年第5期25卷 542-545页

作者：田波陈铜兵鲁常青陈同钰苏州大学附属第三医院病理科江苏常州213003

目的通过检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)抑制剂尼美舒利(nimesulide)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的对化疗药物敏感性及其对P-gp、MRP1表达的影响,探讨Cox-2在乳腺癌细胞肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)中的作用及其作用机制。方法 (1)MTT法检测丝裂霉素(MMC)及其与不同浓度Cox-2抑制剂nimesulide联合作用对MDA-MB-231的抑制作用(IC50);(2)流式细胞术检测不同浓度nimesulide作用后,细胞凋亡率的变化及Cox-2、P-gp、MRP1的表达情况。结果 (1)以25、50μmol/L的nimesulide与MMC联合作用,MDA-MB-231细胞的IC50值(5.89±0.66、3.31±0.30)小于MMC单独作用的IC50值(8.59±1.16)且呈剂量依赖性,差异有统计学意义;(2)nimesulide可诱导细胞凋亡,且随着浓度的增加,凋亡率也随之增加(0.13±0.15至29.2±0.95),差异有统计学意义;(3)25、50μmol/L nimesulide作用于MDA-MB-231细胞后,Cox-2、P-gp、MRP1的表达值均下降。结论 nimesulide能增加乳腺癌细胞株MDA-MB-231对化疗的敏感性,诱导细胞凋亡;Cox-2参与肿瘤多药耐药(MDR),且可能通过影响P-gp、MRP1的表达来实现。

关键词：乳腺肿瘤/病理学前列腺素内过氧化物合酶基因,MDR 尼美舒利/治疗应用糖蛋白类细胞凋亡

小白菊内酯抑制胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及信号转导机理

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中国药理学与毒理学杂志 2002年第5期16卷 331-335页

作者：翁少翔单江徐耕马骥浙江大学医学院附属二院心内科浙江杭州310009

目的　探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法　培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周... 详细信息

目的　探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法　培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周期情况 ,[3H ]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果小白菊内酯 (30 μmol·L- 1)以时间依赖关系上调IκBα ,p2 1,p2 7蛋白表达和以时间依赖关系抑制COX 2蛋白表达 ,10～ 30 μmol·L- 1以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0 /G1期细胞比例明显增多 ,S期细胞比例显著减少 ,同时抑制VSMC的 [3H]TdR参入。结论　①小白菊内酯可能通过上调IκBα蛋白表达抑制核因子 κB活性 ,从而抑制COX 2蛋白表达 ,通过抑制COX 2蛋白表达来抑制VSMC增殖 ;②小白菊内酯可能通过上调调控G1 S周期转换的p2 1,p2 7蛋白来抑制VSMC增殖。

关键词：血管平滑肌细胞信号转导小白菊内酯细胞周期原癌基因蛋白质p21 细胞增殖前列腺素内过氧化物合酶动脉粥样硬化药理学