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葡萄籽提取物诱导前列腺癌pc-3细胞凋亡的实验研究

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南京理工大学学报 2008年第6期32卷 782-787页

作者：张丽商学军滕文荟南京理工大学化工学院江苏南京210094 南京军区南京总医院中心实验科江苏南京210002

该文研究葡萄籽提取物(GSE)对前列腺癌pc-3细胞的生长抑制及凋亡作用,分析GSE诱导pc-3细胞凋亡的途径。采用四唑盐(MTT)比色法测定GSE对pc-3细胞的毒性作用;利用倒置显微镜、透射电镜观察GSE对pc-3细胞引起的形态学改变;碘化丙啶(PI)、... 详细信息

该文研究葡萄籽提取物(GSE)对前列腺癌pc-3细胞的生长抑制及凋亡作用,分析GSE诱导pc-3细胞凋亡的途径。采用四唑盐(MTT)比色法测定GSE对pc-3细胞的毒性作用;利用倒置显微镜、透射电镜观察GSE对pc-3细胞引起的形态学改变;碘化丙啶(PI)、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染法观察GSE诱导pc-3细胞凋亡的作用;Western blot探索细胞凋亡途径。结果表明,MTT法测定GSE能显著抑制pc-3细胞生长。倒置显微镜、透射电镜下可见细胞形态改变。PI染色显示,GSE将pc-3细胞周期阻滞在G0/G1期;GSE诱导pc-3细胞凋亡,AO/EB染色,荧光显微镜下可明显看到凋亡细胞、死亡细胞。Western blot显示GSE通过caspase途径诱导细胞凋亡。从细胞和亚细胞水平研究证实了GSE对人雄激素非依赖性pcapc-3细胞具有毒性作用,GSE可通过线粒体途径诱导pc-3细胞凋亡和坏死,抑制细胞生长。

关键词：葡萄籽提取物前列腺癌pc-3细胞细胞凋亡凋亡途径

缺氧诱导因子1α的RNAi表达载体构建及其在前列腺癌pc-3细胞研究中的作用

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生物医学工程学杂志 2011年第1期28卷 129-134页

作者：刘荣福耿爱民李博安厦门大学附属第一医院泌尿外科厦门361003 福建医科大学福州350005 厦门大学生命科学院厦门361003

本研究根据***载体的特有结构,构建缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNA干扰(RNAi)表达载体,将其与GFP共转染前列腺癌pc-3细胞36 h后转染效率为(87.15±2.36)%;通过与对照组的比较,质粒转染pc-3细胞48 h后可显著降低胞内HIF-1αmRNA及蛋白的... 详细信息

本研究根据***载体的特有结构,构建缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNA干扰(RNAi)表达载体,将其与GFP共转染前列腺癌pc-3细胞36 h后转染效率为(87.15±2.36)%;通过与对照组的比较,质粒转染pc-3细胞48 h后可显著降低胞内HIF-1αmRNA及蛋白的表达;利用重组质粒的嘌呤霉素的抗药性,加药筛选2周,可观察到单克隆生成;收集稳定转染得到的pSUPER-siHIF-1α/pc-3细胞株,再次通过West blot检测到pc-3细胞的HIF-1α蛋白表达亦显著降低。结果表明,利用RNAi技术可成功构建抑制前列腺癌HIF-1α表达的si RNA重组表达载体,为研究HIF-1α在前列腺癌发病机理及增殖、转移中的功能奠定了基础,同时可以用于其在其他肿瘤的功能研究。

关键词：缺氧诱导因子1 αRNAi载体前列腺癌pc-3细胞研究作用

表没食子儿茶素没食子酸脂对前列腺癌pc-3细胞体外生长的抑制作用

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武汉大学学报（医学版） 2010年第3期31卷 317-319,330页

作者：江文凛杨志伟武汉大学中南医院泌尿外科湖北武汉430071

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对人前列腺癌细胞体外生长的抑制作用,以及其对细胞增殖周期的影响。方法:用不同浓度的EGCG处理体外生长的前列腺癌pc-3细胞,通过对细胞形态的对比观察和MTT法检测EGCG对pc-3细胞的抑制作用,通... 详细信息

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对人前列腺癌细胞体外生长的抑制作用,以及其对细胞增殖周期的影响。方法:用不同浓度的EGCG处理体外生长的前列腺癌pc-3细胞,通过对细胞形态的对比观察和MTT法检测EGCG对pc-3细胞的抑制作用,通过流式细胞术检测其对细胞周期的影响。结果:与对照组相比,EGCG处理组可使细胞明显变圆,体积增大,细胞内颗粒及脱壁细胞增多;MTT法显示,EGCG能明显抑制前列腺癌pc-3细胞生长,并呈时间、剂量依赖性(P细胞术显示,EGCG处理的pc-3细胞被阻止在G0/G1期,并有凋亡峰出现。结论:EGCG通过阻滞细胞的增殖周期对前列腺癌pc-3细胞体外生长有明显的抑制作用。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸脂前列腺癌pc-3细胞细胞凋亡

葡萄籽提取物对前列腺癌pc-3细胞形态结构的影响

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中华男科学杂志 2008年第12期14卷 1090-1093页

作者：商学军印洪林葛京平孙怡滕文荟黄宇烽南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院男科江苏南京210002 南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院病理科江苏南京210002 南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院泌尿外科江苏南京210002

目的：观察葡萄籽提取物（GSE）对前列腺癌pc-3细胞形态结构的影响。方法：采用相差显微镜、HE染色和透射电镜观察不同浓度（100、200、300μg／ml）GSE与pc-3细胞作用24、48和72h后细胞形态结构的改变。结果：对照组pc-3细胞在相差显... 详细信息

目的：观察葡萄籽提取物（GSE）对前列腺癌pc-3细胞形态结构的影响。方法：采用相差显微镜、HE染色和透射电镜观察不同浓度（100、200、300μg／ml）GSE与pc-3细胞作用24、48和72h后细胞形态结构的改变。结果：对照组pc-3细胞在相差显微镜下可观察到细胞呈不规则梭形爬壁生长，贴壁牢固，折光性强；HE染色后光镜下观察显示细胞呈梭形，核规整，染成均一蓝色；透射电镜观察结果显示对照组pc-3细胞有丰富的微绒毛，细胞质内线粒体完整，线粒体嵴清晰，内质网无明显扩张，胞质、胞核无水肿，核膜、质膜完整。采用不同浓度的GSE作用24—72h后，相差显微镜下可见pc-3细胞变圆、变小，细胞膜透亮，高浓度组（300μg／mlGSE作用72h）出现悬浮细胞，表明细胞分裂减少，生长受到抑制；光镜下见pc-3细胞核质比增大，呈多核、巨核，异染色质增多，细胞轮廓模糊。电镜显示GSE作用后pc-3细胞微绒毛结构多数消失，细胞萎缩，胞内出现大量的空泡、染色质凝集、核膜皱缩和核下出现微小空泡等坏死和凋亡的形态特征。结论：GSE可造成pc-3细胞形态结构改变，并诱导pc-3细胞凋亡与坏死，其具体作用机制有待进一步研究。

关键词：葡萄籽提取物前列腺癌pc-3细胞相差显微镜 HE染色透射电镜

葡萄籽提取物对前列腺癌pc-3细胞的生长抑制作用

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中华男科学杂志 2008年第4期14卷 331-333页

作者：黄婷婷商学军姚根宏葛京平滕文荟孙怡黄宇烽南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院男科江苏南京210002 南京大学医学院临床学院／南京军区南京总医院输血科江苏南京210002 南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院泌尿外科江苏南京210002

目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对前列腺癌pc-3细胞的生长抑制作用。方法:经预试选用不同浓度(100、200、300μg/ml)的GSE分别作用pc-3细胞24、48、72h,以原代培养的1～3日龄SD大鼠肾细胞作为正常对照;采用四唑氮蓝(MTT)显色法检测GSE对pc-... 详细信息

目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对前列腺癌pc-3细胞的生长抑制作用。方法:经预试选用不同浓度(100、200、300μg/ml)的GSE分别作用pc-3细胞24、48、72h,以原代培养的1～3日龄SD大鼠肾细胞作为正常对照;采用四唑氮蓝(MTT)显色法检测GSE对pc-3细胞和SD大鼠肾细胞的生长抑制作用。结果:GSE以浓度和时间依赖性方式抑制pc-3细胞生长(P细胞生长仅有轻度抑制作用。结论:GSE可抑制前列腺癌pc-3细胞生长,有可能成为治疗前列腺癌的一种新药物。

关键词：葡萄籽提取物前列腺肿瘤前列腺癌pc-3细胞原代培养肾细胞大鼠

RNA干扰对前列腺癌pc-3细胞血管内皮生长因子表达的研究

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中华男科学杂志 2006年第12期12卷 1095-1098页

作者：潘周辉陈昭典郑州大学第三附属医院泌尿外科河南郑州450052 浙江大学附属第一医院泌尿外科浙江杭州310003

目的:构建前列腺癌血管内皮生长因子(VEGF)RNA干扰(RNAi)真核表达载体,并研究RNAi对前列腺癌VEGF表达的影响。方法:合成VEGFRNAi片段,将RNAi片段定向克隆于RNAi表达载体,测序鉴定;RNAi表达载体转染人前列腺癌pc-3细胞,Western印迹法检测... 详细信息

目的:构建前列腺癌血管内皮生长因子(VEGF)RNA干扰(RNAi)真核表达载体,并研究RNAi对前列腺癌VEGF表达的影响。方法:合成VEGFRNAi片段,将RNAi片段定向克隆于RNAi表达载体,测序鉴定;RNAi表达载体转染人前列腺癌pc-3细胞,Western印迹法检测VEGFRNAi表达载体对VEGF蛋白表达的影响,MTT法检测转染VEGFRNAi表达载体对细胞生长的抑制作用。结果:成功构建VEGFRNAi真核表达载体;VEGFRNAi组VEGF蛋白的表达明显降低,显著低于空载体组和未转染的对照组;前列腺癌pc-3细胞24、48、72h的生长抑制率分别为23.5%、33.5%、40.8%。结论:VEGFRNAi可以抑制前列腺癌pc-3细胞蛋白的表达和抑制细胞生长,为前列腺癌的生物治疗提供一定的实验基础。

关键词：血管内皮生长因子前列腺癌pc-3细胞 RNA干扰

CRISPR/Cas9技术敲除人前列腺癌pc-3细胞BLM解旋酶基因的研究

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中国细胞生物学学报 2018年第9期40卷 1547-1553页

作者：陈琨许厚强赵佳福段志强吴萍贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵阳550025 贵州省人民医院贵阳550003

BLM解旋酶是人类RecQ解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用。BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。该研究设计了5个Cas9/SgRNA载体,并通过T7E1酶筛... 详细信息

BLM解旋酶是人类RecQ解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用。BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。该研究设计了5个Cas9/SgRNA载体,并通过T7E1酶筛选出活性最强的SgRNA3载体,利用脂质体LTX将其与供体载体共同导入前列腺癌pc-3细胞。BLa和Puro抗性筛选及荧光蛋白标记甄别获得带阳性标记的细胞。Western blot及RTq-pcR检测证明,前列腺癌pc-3细胞中的BLM解旋酶基因被成功敲除,为深入研究BLM解旋酶基因在前列腺癌中的作用提供了重要的科学数据。

关键词： BLM解旋酶基因 CRISPR/Cas9表达载体基因敲除前列腺癌pc-3细胞

坦索罗辛对前列腺癌pc-3细胞增殖与凋亡的影响

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中国药房 2016年第7期27卷 896-899页

作者：赵明金珊何锦华天津中医药大学第一附属医院泌尿外科天津300193

目的:研究坦索罗辛对前列腺癌pc-3细胞增殖与凋亡的影响。方法:以0(空白对照组)、12.5、25、50μmol/L坦索罗辛(坦索罗辛低、中、高浓度组)作用于pc-3细胞48 h后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡率,Western blot... 详细信息

目的:研究坦索罗辛对前列腺癌pc-3细胞增殖与凋亡的影响。方法:以0(空白对照组)、12.5、25、50μmol/L坦索罗辛(坦索罗辛低、中、高浓度组)作用于pc-3细胞48 h后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡率,Western blot法检测核糖体Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达及蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、S6蛋白激酶(p70S6K)、4E结合蛋白1(4E-BP1)的磷酸化水平。结果:与空白对照组比较,坦索罗辛低、中、高浓度组pc-3细胞活力和Akt、p70S6K、4E-BP1磷酸化水平均降低,Bax蛋白表达水平升高(Ppc-3细胞的凋亡率升高,Bcl-2蛋白表达和m TOR磷酸化水平降低(P前列腺癌pc-3细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制Akt/m TOR信号通路激活有关。

关键词：坦索罗辛前列腺癌pc-3细胞增殖凋亡蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

白藜芦醇和顺铂联合作用对前列腺癌pc-3细胞增殖的影响及可能机制

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白藜芦醇和顺铂联合作用对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及可能机制

作者：林国伟福建医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨白藜芦醇和顺铂联合作用对前列腺癌pc-3细胞增殖影响及可能机制。方法：体外培养前列腺癌pc3细胞，进行实验分组，加入不同浓度的白藜芦醇和顺铂（①单独加入不同浓度的白藜芦醇24h②单独加入不同浓度的顺铂24h;③5mmol/... 详细信息

目的：探讨白藜芦醇和顺铂联合作用对前列腺癌pc-3细胞增殖影响及可能机制。方法：体外培养前列腺癌pc3细胞，进行实验分组，加入不同浓度的白藜芦醇和顺铂（①单独加入不同浓度的白藜芦醇24h②单独加入不同浓度的顺铂24h;③5mmol/L的白藜芦醇和顺铂在不同浓度下同时作用24h④加入1mmol/L、5mmol/L的白藜芦醇24h后,再分别加入不同浓度的顺铂继续作用24h⑤顺铂在不同浓度下作24h后,再分别加入1mmol/L、5mmol/L的白藜芦醇继续作用24h）。采用MTT法检测不同组细胞增殖情况、流式细胞仪检测细胞周期时相、RT-pcR和Western Blot检测LC3、P糖蛋白、多药耐药相关蛋白以及mTOR的mRNA表达及蛋白表达情况。结果： 1、白藜芦醇及顺铂单独作用,均可抑制前列腺癌pc-3细胞增殖，在一定浓度范围内呈剂量相关性;2、白藜芦醇和顺铂联合作用可抑制前列腺癌pc-3的生长,效果更优于单独用药组，并将细胞阻滞在G2期,诱导细胞凋亡。顺铂与白藜芦醇联合作用对细胞增殖的影响,与二者的用药顺序有关。 3、白藜芦醇单独作用或与顺铂联合作用下，多药耐药相关蛋白MRP、蛋白P糖蛋白、mTOR mRNA及蛋白的表达量均降低。而LC3的mRNA及蛋白的表达量增高。白藜芦醇与顺铂联合用药组对LC3、mTOR、多药耐药相关蛋白、蛋白P糖蛋白的mRNA和蛋白表达的影响均高于单独用药组，各组间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：白藜芦醇和顺铂联合作用可增强对前列腺癌pc-3细胞增殖的抑制作用，并与二者的用药方式有关,其相关作用机制与白藜芦醇通过增强细胞自噬、影响细胞周期分布、诱导细胞凋亡及调节耐药相关蛋白有关。

关键词：白藜芦醇顺铂前列腺癌pc-3细胞增殖机制