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卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体疫苗免疫方案的探讨

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中华妇产科杂志 2006年第1期41卷 52-56页

作者：祝洪澜李艺昌晓红崔恒冯捷魏丽惠北京大学人民医院妇科肿瘤中心 100044

目的探讨卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体(6B11微抗体)的最佳免疫剂量和免疫间隔时间,为用于临床治疗卵巢上皮性癌打下基础。方法(1)采用基因工程方法构建6B11微抗体的重组表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21中进行表达。直接酶联免疫... 详细信息

目的探讨卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体(6B11微抗体)的最佳免疫剂量和免疫间隔时间,为用于临床治疗卵巢上皮性癌打下基础。方法(1)采用基因工程方法构建6B11微抗体的重组表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21中进行表达。直接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定其免疫学活性。(2)将BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E、F组,于第1、14、28天时均分别给予6B11微抗体150、100、50μg及小鼠IgG100μg、人IgG100μg、磷酸盐缓冲液100μl,其中A、B、C组为实验组,D、E、F组为对照组。间接ELISA法测定各组小鼠血清中抗卵巢上皮性癌6B11抗独特型抗体(6B11抗体)的抗体(即Ab3)的水平,并观察其变化规律。(3)将小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞作为靶细胞,设定效靶比为250∶1、125∶1、60∶1、30∶1,51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的抗体依赖的细胞毒效应(ADCC);设定血清稀释度为1∶2、1∶25、1∶50,51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的补体依赖的细胞毒效应(CDC)。分别于紫外光波长490nm时测定其吸光度(A)值。结果(1)大肠杆菌BL21中成功表达6B11微抗体,并证实其保留了6B11抗体的免疫学活性。(2)用上述不同剂量6B11微抗体免疫BALB/c小鼠,在第14天注射后1周,血清中可检测到较低水平Ab3;第28天注射后1周,Ab3水平达到最高值,A、B、C组平均A值分别为1·16、1·11、1·06;此Ab3水平持续6周,6周内A、B、C组平均A值分别为1·05、1·06、0·94,B组略高于A、C两组,但3组间比较,差异无统计学意义(P>0·05);第7周Ab3水平明显下降。此时,给予加强免疫,1周后Ab3水平很快升高,并持续至少2周。(3)在4个不同的效靶比条件下,实验组小鼠脾淋巴细胞诱导产生的ADCC明显高于对照组(P0·05)。结论6B11微抗体可作为卵巢上皮性癌疫苗,其较佳的动物免疫方案为:免疫剂量为100μg;基础免疫分别于第1、14、28天进行,共3次;间隔6周给予加强免疫。

关键词：卵巢肿瘤抗体,抗独特型免疫接种,加强剂量效应关系,免疫小鼠

Nogo66蛋白疫苗接种对大鼠免疫应答的影响

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解放军医学杂志 2009年第5期34卷 630-632页

作者：程茗肖虹贺翔鸽第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆400042 第三军医大学西南医院神经外科

目的观察不同浓度Nogo66蛋白疫苗接种大鼠后产生的免疫效应变化,筛选最佳接种浓度。方法48只SD大鼠随机分为5个实验组和1个对照组,每组8只。实验组大鼠分别接种浓度为50μg/300μl、100μg/300μl、200μg/300μl、400μg/300μl、800μ... 详细信息

目的观察不同浓度Nogo66蛋白疫苗接种大鼠后产生的免疫效应变化,筛选最佳接种浓度。方法48只SD大鼠随机分为5个实验组和1个对照组,每组8只。实验组大鼠分别接种浓度为50μg/300μl、100μg/300μl、200μg/300μl、400μg/300μl、800μg/300μl的Nogo66蛋白弗氏佐剂疫苗,接种大鼠;对照组不接种疫苗。ELISA法检测不同时间不同浓度组大鼠血清特异性IgG抗体滴度变化,MTT法检测大鼠脾T细胞增殖情况,并进行实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)评分。结果各实验组大鼠血清IgG抗体滴度从接种第4周开始迅速增高直至第8周,第10周开始达一平台期,此时200μg/300μl组IgG抗体滴度高于其他各浓度组。各实验组大鼠脾T细胞增殖第4周时明显增强,第8周时达最高值;200μg/300μl组从第8周开始活性T细胞水平即高于其他浓度组(P>0.05),于第12周时仍然高于其他浓度组(P效应明显强于其他组,且均未发生毒性反应,故200μg/300μl为最佳接种浓度。

关键词：疫苗,合成剂量效应关系,免疫动物实验

兔抗肠道病毒71型血清制备中免疫剂量对抗体效价的影响

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国际生物制品学杂志 2021年第4期44卷 186-189页

作者：张玉平胡云光殷安国李亚东杜宋婷王雯慧李晓颖常亚军段男宋杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所质量检定室昆明650118

目的研究兔抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响。方法将9只实验兔简单随机分为3组,每组3只。5、50和100μg 3个剂量EV71灭活疫苗和弗氏佐剂均匀混合后,通过肌内注射途径分别免疫3组动物,于第0... 详细信息

目的研究兔抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响。方法将9只实验兔简单随机分为3组,每组3只。5、50和100μg 3个剂量EV71灭活疫苗和弗氏佐剂均匀混合后,通过肌内注射途径分别免疫3组动物,于第0、7、14及28天各免疫1次,每7天采血,分离血清,检测抗EV71中和抗体效价。结果100μg剂量组兔血清抗体效价显著高于5和50μg剂量组(第42天t值分别为-3.282和-2.486,P值均免疫剂量(5~100μg范围内)呈线性关系,回归方程y=478.229x-2041.820。结论在本实验选择的3个免疫剂量中,随着免疫剂量升高,产生的血清抗体效价也升高,且呈线性关系。

关键词：免疫血清剂量效应关系,免疫肠道病毒71型抗体效价