检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库博看期刊

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

补骨脂定-刺甘草查尔酮配伍减毒机制

中国实验方剂学杂志 2023年第1期29卷 45-51页

作者：刘婷婷梁龙鑫徐广肖小河赵艳玲柏兆方成都中医药大学药学院成都611137 中国人民解放军总医院第五医学中心北京100039 遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院) 贵州563000

目的:基于小鼠原代骨髓巨噬细胞(BMDM),建立补骨脂定诱导的炎症小体活化模型,探索补骨脂定联合刺甘草查尔酮免疫调控的作用效应。方法:联用脂多糖与补骨脂定激活炎症小体,使用脂多糖(LPS)刺激BMDM 4 h后,给予刺甘草查尔酮(40μmol·L^(-... 详细信息

目的:基于小鼠原代骨髓巨噬细胞(BMDM),建立补骨脂定诱导的炎症小体活化模型,探索补骨脂定联合刺甘草查尔酮免疫调控的作用效应。方法:联用脂多糖与补骨脂定激活炎症小体,使用脂多糖(LPS)刺激BMDM 4 h后,给予刺甘草查尔酮(40μmol·L^(-1))进行预保护,1 h后用补骨脂定(10、20、40μmol·L^(-1))刺激4 h,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测同时检测细胞上清中剪切成熟的胱天蛋白酶^(-1) p20(Caspase^(-1) p20)和细胞裂解液中Caspase^(-1)前体(pro-Caspase^(-1))、白细胞介素^(-1)β前体(pro-IL^(-1)β)的蛋白表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒测定BMDM细胞上清液中IL-β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:Western blot分析显示,与空白组比较,刺甘草查尔酮可明显抑制补骨脂定诱导的pro-Caspase^(-1)剪切成熟(P刺甘草查尔酮组均可显著减少IL^(-1)β、TNF-α释放(P刺甘草查尔酮可显著抑制补骨脂定介导的过激的免疫炎症反应,从而达到配伍减毒的效应,该研究探索了补骨脂定-刺甘草查尔酮配伍减毒的效应,在一定程度上为临床安全用药提供依据。

关键词：补骨脂定刺甘草查尔酮配伍减毒免疫调控炎症小体

维普期刊数据库

刺甘草查尔酮抑制破骨细胞分化预防骨丟失的机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

刺甘草查尔酮抑制破骨细胞分化预防骨丟失的机制研究

作者：江长幸广西医科大学

学位级别：硕士

背景和目的:骨质疏松症作为一种全身退化性的骨骼疾病,其特征为全身骨量降低和骨小梁微结构薄弱化,使受影响的患者易于发生脆性骨折。虽然目前的抗骨质疏松药物可显著减少骨折的发生,但部分患者仍具有严重的副作用(颌骨坏死、非典型股... 详细信息

背景和目的:骨质疏松症作为一种全身退化性的骨骼疾病,其特征为全身骨量降低和骨小梁微结构薄弱化,使受影响的患者易于发生脆性骨折。虽然目前的抗骨质疏松药物可显著减少骨折的发生,但部分患者仍具有严重的副作用(颌骨坏死、非典型股骨骨折),从而限制了抗骨质疏松药物的长期使用。在开发高度安全的抗骨质疏松新型药物中,天然产物发挥着至关重要的作用,且一直被认为是新疗法的潜在候选物。而刺甘草查尔酮(Echinatin,Ecn)作为一种常用中药甘草的化学活性提取物,具有抗氧化、心血管保护、抗炎症和抗癌的药理作用。但其对破骨细胞分化、吸收功能以及骨破坏的作用未见报道。因此本研究旨在探讨刺甘草查尔酮对RANKL诱导破骨细胞分化,骨吸收功能的影响及其相关分子机制,以及在体内是否对卵巢缺失小鼠的骨丢失具有预防作用。为开发新型抑制破骨细胞的天然药物提供研究基础。方法:1.体外细胞实验:为验证刺甘草查尔酮在体外对RANKL诱导的破骨细胞形成和骨吸收功能以及相关通路的影响。首先,我们用CCK-8检测试剂盒来验证48h内不同浓度刺甘草查尔酮对骨髓单核巨噬细胞增殖活性的影响以排除刺甘草查尔酮对破骨前体细胞的毒性作用。然后,我们用RANKL和M-CSF刺激BMMs向破骨细胞分化,并用不同浓度的刺甘草查尔酮进行干预,通过抗酒石酸酸性磷酶染色(TRAP staining)和罗丹明-鬼笔环肽染色观察破骨细胞的形成数量(细胞核≥3个的TRAP阳性细胞数)和F-actin环的形态来验证刺甘草查尔酮对RANKL诱导的成熟破骨细胞形成的影响。为验证刺甘草查尔酮在破骨细胞骨吸收功能上的作用,我们在骨片上培养破骨细胞,用不同浓度的刺甘草查尔酮进行干预,通过扫描电子显微镜(SEM)观察骨片表面吸收坑并统计吸收坑面积比以评估不同浓度药物对破骨细胞吸收功能的影响。为进一步验证刺甘草查尔酮影响破骨细胞形成和吸收功能的分子机制,我们用不同浓度刺甘草查尔酮干预RANKL诱导的破骨细胞分化,并通过实时定量PCR技术测定破骨细胞相关基因的表达水平和Western-blot实验检测刺甘草查尔酮对RANKL诱导的破骨细胞分化相关信号通路的影响(如:MAPK信号通路、NF-κB信号通路以及AKT/GSK3β-c-Fos-NFATc1信号通路等)。2.体内实验:为了验证刺甘草查尔酮对卵巢缺失小鼠(OVX小鼠)骨量丢失的影响及其代谢毒性。我们将28只10周龄雌性小鼠随机分为4组:sham+vehicle组,OVX+vehicl组,OVX+Ecn(5 mg/kg)组,OVX+Ecn(10 mg/kg)组,经刺甘草查尔酮六周的干预治疗后,小鼠股骨进行Micro-CT扫描和组织病理切片分析相关骨组织参数。心、肝、脾等主要脏器则通HE病理切片分析药物在小鼠体内的代谢毒性。结果:1.体外实验:刺甘草查尔酮对破骨前体细胞的增殖没有毒性作用并且可显著抑制RANKL诱导的破骨细胞生成和骨吸收功能。2.刺甘草查尔酮可降低RANKL诱导的MAPK信号通路ERK的磷酸化和AKT/GSK3β-c-Fos-NTATc1通路的活化以及破骨细胞分化相关基因的表达。3.体内实验:刺甘草查尔酮通过抑制骨小梁破骨细胞数量对卵巢缺失小鼠的骨量丢失、骨密度降低和骨小梁破坏具有预防作用且无代谢毒性。结论:刺甘草查尔酮可通过下调RANKL诱导的MAPK信号通路ERK的磷酸化和AKT/GSK3β-c-Fos-NTATc1通路的活化抑制破骨细胞的生成和骨吸收功能以及防止卵巢缺失小鼠的骨丢失。刺甘草查尔酮可作为治疗破骨细胞相关溶骨性疾病的新型天然破骨细胞抑制剂。

关键词：刺甘草查尔酮破骨细胞骨吸收 OVX 信号通路

刺甘草查尔酮调节自噬和NLRP3炎症小体减轻脓毒症心肌损伤

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

内蒙古医科大学学报 2023年第4期45卷 361-365页

作者：范芳芳王燕董雪王舒钧田秀青日照市人民医院重症医学科山东日照276800 山东第一医科大学第一附属医院心内科山东济南250013

目的探究刺甘草查尔酮对自噬、NLRP3炎症小体和脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法将大鼠按照随机数表法分为Col、LPS、Ech L、Ech M、Ech H、阳性对照组。检测大鼠心功能指标(LVEDD、LVESD、FS、EF);ELISA检测血清中炎症因子(TNF-α、IL-1... 详细信息

目的探究刺甘草查尔酮对自噬、NLRP3炎症小体和脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法将大鼠按照随机数表法分为Col、LPS、Ech L、Ech M、Ech H、阳性对照组。检测大鼠心功能指标(LVEDD、LVESD、FS、EF);ELISA检测血清中炎症因子(TNF-α、IL-1β)水平和心肌损伤标志物(cTnΙ、CK-MB)含量;HE染色检测心肌组织病理学变化;TUNEL检测心肌细胞凋亡率;蛋白质印迹检测心肌组织中自噬相关蛋白及炎性小体相关蛋白表达。结果和Col组相比,LPS组大鼠心功能指标LVEDD、LVESD和血清中TNF-α、IL-1β、cTnΙ、CK-MB水平明显升高,FS、EF明显降低,心肌组织中p62、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达和心肌细胞凋亡率均明显升高,组间差异有统计学意义(P刺甘草查尔酮可减轻脓毒症大鼠心肌损伤,其可能和促进心肌组织中自噬和抑制NLRP3炎症小体激活有关。

关键词：刺甘草查尔酮自噬 NLRP3炎症小体脓毒症心肌损伤

维普期刊数据库

甘草活性成分对抗抑郁药诱导的肝损伤的防治作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中药杂志 2022年第22期47卷 6146-6154页

作者：牟文清徐广赵佳陈媛媛柏兆方肖小河成都中医药大学药学院四川成都611137 中国人民解放军总医院第五医学中心肝病医学部北京100039 首都医科大学中医药学院北京100069

由于现代精神疾病发病率的激增,抗抑郁药的应用增加。然而,令人担忧的是,抗抑郁药诱导的肝损伤已经逐渐成为严重的健康负担。此外,由于人们对抗抑郁药肝毒性的认知大多来源于药物警戒和临床病例报告,而缺乏观察性的研究,所以对其潜在的... 详细信息

由于现代精神疾病发病率的激增,抗抑郁药的应用增加。然而,令人担忧的是,抗抑郁药诱导的肝损伤已经逐渐成为严重的健康负担。此外,由于人们对抗抑郁药肝毒性的认知大多来源于药物警戒和临床病例报告,而缺乏观察性的研究,所以对其潜在的分子机制知之甚少并且缺乏有效的治疗策略。在该研究中,抗抑郁药帕罗西汀(paroxetine)直接触发了炎症小体(inflammasome)的活化,表现为caspase-1的成熟和下游效应因子interleukin(IL)-1β的分泌,并且这种活化可以经甘草活性成分刺甘草查尔酮(echinatin)的预处理完全阻断。另外,研究还发现,刺甘草查尔酮有效地抑制了帕罗西汀诱导的炎症小体非依赖性的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的产生。从机制上讲,线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species, mtROS)的累积是帕罗西汀诱导炎症小体活化的关键上游事件,并且可以被刺甘草查尔酮显著抑制。在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)介导的特异质性药物性肝损伤(idiosyncratic drug-induced liver injury, IDILI)模型中,LPS与抗抑郁药帕罗西汀共同暴露于小鼠触发了炎症小体的异常活化从而诱导了特异质肝毒性,而这种损伤可以通过刺甘草查尔酮预处理得到改善。值得注意的是,此研究还发现甘草的多种活性成分对帕罗西汀触发的炎症小体活化有显著的抑制作用,同时,多种抗抑郁药诱导的炎症小体异常活化可以被刺甘草查尔酮预处理完全阻断。总而言之,该研究为抗抑郁药诱导肝损伤的机制提供了新的见解,同时为抗抑郁药肝毒性的治疗提供了一种新的策略。

关键词：抗抑郁药帕罗西汀肝毒性甘草刺甘草查尔酮

维普期刊数据库

基于NLRP3炎症小体的多种抗抑郁药致肝损伤的作用机制及防控策略研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于NLRP3炎症小体的多种抗抑郁药致肝损伤的作用机制及防控策略...

作者：牟文清成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:以炎症小体信号通路为桥梁,探寻多种抗抑郁药的作用靶点,进而揭示这些抗抑郁药诱导肝损伤的作用机制,并寻求潜在的治疗策略。另外,考虑到甘草“解百毒”的科学内涵,从药食同源、靶标互作和协同增效减毒几个方面阐释传统中药甘草在... 详细信息

目的:以炎症小体信号通路为桥梁,探寻多种抗抑郁药的作用靶点,进而揭示这些抗抑郁药诱导肝损伤的作用机制,并寻求潜在的治疗策略。另外,考虑到甘草“解百毒”的科学内涵,从药食同源、靶标互作和协同增效减毒几个方面阐释传统中药甘草在防控抗抑郁药肝毒性方面的潜在价值。方法:本课题拟以抗抑郁药相关临床肝毒性报道为基础,构建体外炎症小体活化体系,评估抗几种常用的抑郁药对炎症小体通路的调控作用。进一步地,结合NLRP3炎症小体的特异性抑制剂MCC950和Nlrp3敲除小鼠骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)确定药物潜在的靶标。此外,还结合Nlrp3敲除小鼠和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的免疫应激模型,通过免疫学,毒理学和细胞生物学探究抗抑郁药诱导肝损伤的分子机制,并在此条件下,初步评估甘草及其活性成分对抗抑郁药致肝损伤的防控作用。结果:本课题首先评估了几种常用的抗抑郁药对炎症小体活化的调控作用,发现这些抗抑郁药能直接诱导炎症小体的活化,表现为caspase-1成熟,interleukin-1β(IL-1β)的分泌和gasdermin D(GSDMD)的切割。此外,证明了炎症小体的活化在抗抑郁药氟西汀驱动的肝损伤中的作用。通过MCC950预处理和Nlrp3敲除BMDMs发现了抗抑郁药的作用靶点:NLRP3炎症小体。同时在体内研究中阐明了抗抑郁药氟西汀能通过触发NLRP3炎症小体的异常活化从而诱导肝损伤。从机制上讲,线粒体损伤和线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生是氟西汀诱导NLRP3炎症小体活化的关键上游事件。另外,在更深入的研究中,发现甘草活性成分能通过抑制抗抑郁药触发的线粒体ROS的产生完全阻断抗抑郁药诱导的NLRP3炎症小体的异常活化。值得注意的是,在LPS介导免疫应激模型中,甘草活性成分刺甘草查尔酮能有效改善抗抑郁药介导的肝毒性。结论:本课题阐明了多种抗抑郁药诱导肝损伤可能的共性机制,即通过触发线粒体损伤和线粒体ROS的累积诱导NLRP3炎症小体的异常活化,从而导致药物性肝损伤。同时表明了甘草活性成分对抗抑郁药的肝毒性有显著治疗效果。这对进一步认识抗抑郁药驱动的肝损伤有着潜在的指导意义,同时为中医药防控抗抑郁药介导的肝损伤提供了科学依据。

关键词：抗抑郁药药物性肝损伤 NLRP3炎症小体甘草刺甘草查尔酮

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

甘草两类成分抗炎互作效应的机制研究

甘草两类成分抗炎互作效应的机制研究

作者：梁龙鑫江西中医药大学

学位级别：硕士

研究背景:甘草是临床常用中药,具有补脾益气、清热解毒的功效。现代研究表明,甘草具有显著的抗炎作用,可用于治疗多种炎性疾病,目前已被开发为甘利欣、美能、天晴甘美等多种制剂。迄今,包括课题组在内的多个团队的研究证明了甘草中主要... 详细信息

研究背景:甘草是临床常用中药,具有补脾益气、清热解毒的功效。现代研究表明,甘草具有显著的抗炎作用,可用于治疗多种炎性疾病,目前已被开发为甘利欣、美能、天晴甘美等多种制剂。迄今,包括课题组在内的多个团队的研究证明了甘草中主要的三类成分三萜类、黄酮类以及多糖均具有很强的抗炎效应。中药具有多成分、多靶点协同的作用特点,然而,甘草抗炎的多成分协同效应及作用机制尚不清楚,阻碍了对甘草抗炎进一步的认知,影响了甘草新的相关制剂的研发。为此,本文拟对甘草中两类主要活性成分的联合抗炎作用进行研究,并对其互作效应的机制开展探索,以期为甘草相关制剂的开发及应用提供参考依据。研究目的:本研究旨在探索甘草三萜、黄酮两类主要活性成分的协同互作效应进行评价,探讨甘草多成分联合抗炎协同增效的客观性,以及对甘草成分联合抗炎的机制进行研究。研究方法:1.基于小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）,构建LPS诱导的NLRP3炎症小体激活模型及HO诱导的氧化应激模型,筛选甘草中调控炎症反应相关通路的活性成分。采用Western bolt技术分析炎症小体激活相关蛋白Caspase-1 p20表达,以酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测炎症小体激活下游指标白介素-1β（IL-1β）的释放,以流式细胞术、氯化硝基四氮唑蓝（NBT）法测定氧化应激相关指标ROS释放及SOD活性。2.基于C57BL/6小鼠,构建LPS诱导的小鼠脓毒血症模型,以小鼠的生存率、腹腔渗出免疫细胞的水平、血清炎症因子的含量为指标,评价单独、联合使用甘草活性成分以及甘草提取物对脓毒血症小鼠的治疗效果,采用持续观察小鼠72 h内死亡情况统计生存率,以流式细胞术检测腹腔灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞细胞比例,以ELISA法测定血清IL-1β及TNF-α的含量。3.基于C57BL/6小鼠,构建MCD诱导的小鼠NASH模型,以肝组织病理变化、血清肝功能评价指标和炎症因子水平、肝脏炎症因子和纤维化指标的表达水平变化,综合评价单独、联合使用活性成分对NASH模型小鼠治疗效果。以赖氏法、ELISA法测定血清AST、ALT及TNF-α的含量、采用QRT-PCR法检测肝脏组织中IL-1β和TNF-α、α-SMA m RNA表达水平,利用苏木精/伊红（H&E）染色法分析肝脏病理学变化。研究结果:1.在NLRP3炎症小体激活模型中,甘草黄酮类成分刺甘草查尔酮显著抑制Caspase-1 p20的蛋白表达及炎症因子IL-1β的释放;在HO诱导的氧化应激模型中,甘草多组分均可减少ROS产生,其中三萜皂苷类成分甘草酸的抑制效果最为显著,并可显著提高SOD活性。以此,我们筛选出甘草中抗炎的重要成分-刺甘草查尔酮、甘草酸,以两者为研究对象,进行下一步的试验。2.在LPS诱导的小鼠脓毒血症模型中,甘草酸组（高剂量）、刺甘草查尔酮组（高、低剂量）以及甘草酸-刺甘草查尔酮联合组均可显著升高小鼠生存率,并且联合用药组的效果最佳;给药组均可显著降低巨噬细胞和中性粒细胞在渗出细胞中的占比、降低血清中IL-1β和TNF-α水平,与单药组对比,联合组显示出更佳的作用效果;另外,与甘草提取物组对比,联合组对腹腔内释放的炎症因子水平也具有更强的抑制作用。3.在MCD的小鼠NASH模型中,给药组均可显著降低小鼠血清中ALT、AST、IL-1β、TNF-α水平、显著降低肝组织中IL-1β、TNF-α、α-SMA m RNA表达,还可不同程度地缓解肝细胞病理损伤和脂肪变性,且联合组所有的动物指标均显示更强的抑制效果。研究结论:本研究采用体外NLRP3炎症小体激活模型及氧化应激模型筛选出甘草中主要抗炎、抗氧化的成分-刺甘草查尔酮、甘草酸,采用脓毒血症模型、NASH模型对两成分联用的治疗效果进行了评价,发现了刺甘草查尔酮和甘草酸联用具有更佳的疾病治疗效果。证明了甘草多成分可通过不同的作用靶点起到协同增效抗炎的作用:NLRP3炎症小体的活化受刺激调控,可释放大量炎症因子以介导炎症,对该通路的阻断可显著抑制炎症的发生与发展;机体氧化应激时产生过量自由基,可导致核酸损伤、细胞功能紊乱,对氧化应激的抑制可有效修复受炎症损伤的细胞与组织,降低机体对炎症的易感性。本研究证实了甘草多成分多靶点协同抗炎的客观性,发现了两类主要活性成分抗炎互作效应的机制,进一步深化了对甘草抗炎作用的认知,为基于甘草多成分多靶点抗炎的组分中药开发提供参考依据。

关键词：甘草抗炎刺甘草查尔酮甘草酸成分联合 NLRP3炎症小体氧化应激

二黄祛脂方治疗非酒精性脂肪性肝病的系统药理学及机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

二黄祛脂方治疗非酒精性脂肪性肝病的系统药理学及机制研究

作者：何倞婧石河子大学

学位级别：硕士

目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)影响着全球约四分之一的人口。目前仍未有FDA批准的治疗药物,临床上主要以改变饮食和生活方式作为治疗的主要手段,辅以药物治疗(包括胰岛素增敏剂、抗氧化剂、降脂药... 详细信息

目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)影响着全球约四分之一的人口。目前仍未有FDA批准的治疗药物,临床上主要以改变饮食和生活方式作为治疗的主要手段,辅以药物治疗(包括胰岛素增敏剂、抗氧化剂、降脂药等),但西药作用靶点单一、副作用较多,长期安全性和有效性仍存在争议。二黄祛脂方(Er Huang Qu Zhi recipe,Er H)是新疆兵团国医大师袁今奇教授根据中医理论和临床经验得出治疗NAFLD的经验方,临床治疗效果显著,目前对于该复方治疗NAFLD的作用机制尚不明确,不利于临床疗效提升及相关新药研究。本课题拟从小鼠体内模型评价Er H治疗NAFLD的药效学特点,结合超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析和系统药理学方法筛选成药分子及预测相关靶标通路,在体外模型上初步探讨Er H中代表活性成分刺甘草查尔酮(Echinatin,Ech)对游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)诱导Hep G2细胞凋亡的对抗作用,从中药复方药理学角度研究Er H治疗NAFLD的机理并提供初步理论依据。方法:*** H方剂组成与成药性分子靶标预测:综合2020版《中国药典》、多数据库及UHPLCMS/MS分析Er H中药物归经、活性成分、作用靶标以及疾病相关靶标信息,预测关键成药性分子靶标并进行富集分析;2.小鼠体内NAFLD模型建立:蛋氨酸-胆碱缺乏(Methionine and Choline-Deficient,MCD)饮食喂养C57BL/6J小鼠4周成功建立体内NAFLD模型,综合组织外观观察、肝功检测以及病理切片染色等结果分析Er H对于小鼠脂质代谢、炎症以及纤维化发展的影响;***诱导NAFLD体外模型建立:不同浓度FFA诱导Hep G2细胞,结合细胞活力测定、油红O染色和Nile Red染色判断脂质积累情况以及观察细胞形态变化确立FFA用于诱导Hep G2细胞建立体外NAFLD模型的适宜浓度;4.代表成分药效学研究:基于荧光探针染色、透射电子显微镜观察、细胞流式术等技术探究Er H中的关键活性成分Ech对于体外NAFLD模型的作用;*** H及代表成分的分子机制研究:借助IHC染色、RCR技术、分子对接技术以及Western blotting实验检测Er H及其关键活性成分对炎症、纤维化和凋亡关键通路的蛋白表达量的影响。结果:1.系统药理学分析得Er H治疗NAFLD主要参与炎症反应、细胞凋亡和纤维化反应等生物过程,与MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路等信号通路密切相关,提示Er H在NAFLD病程的多个阶段发挥作用;***饮食喂养C57BL/6J小鼠4周成功建立NAFLD模型。体内药效学结果显示,Er H干预改善了MCD饮食诱导的小鼠肝脏状态,显著降低了肝脏甘油三酯(TG)水平,油红O染色结果示Er H减轻了脂质积累,综合HE染色NAS评分以及Masson染色结果,Er H缓解了MCD饮食诱导的炎症和纤维化的发展;*** H的治疗降低了MCD饮食诱导的小鼠肝脏组织SREBP-1c和FATP2的m RNA表达量,降低了炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的m RNA表达量以及NF-κB p65和i NOS的蛋白表达量,同时F4/80 IHC染色的阳性表达减少。与MCD组相比,Er H降低了α-SMA的在肝脏组织中的阳性表达,同时降低SMAD2/3的蛋白表达量,缓解了纤维化的发展。Er H降低了BAX的蛋白表达量和Caspase3的活性,并增加了BCL-2蛋白表达量,主要是与抑制了ASK1-JNK信号通路有关;4.确定0.75 m M FFA诱导Hep G2细胞48 h建立体外NAFLD模型;基于该模型,发现Ech可减少FFA诱导后Hep G2细胞脂质积累,增加细胞线粒体膜电位以及改善线粒体超微结构的损伤。DCFH-DA以及CMF-DA荧光染色结果示Ech可缓解FFA诱导细胞内的氧化应激水平。细胞流式术以及Hoechst 33258染色结果中Ech可以显著减少FFA诱导Hep G2细胞的凋亡;Ech可降低FFA诱导后Hep G2细胞内NF-κB p65、BAX的蛋白表达量,主要是通过降低了ASK1的蛋白表达量和JNK磷酸化。结论:综上所述,本课题结合系统药理学技术以及体内验证,首次阐明了Er H治疗NAFLD的作用机理。Er H通过对MCD诱导的NAFLD小鼠中ASK1-JNK信号通路的抑制,抑制ASK1和JNK的磷酸化,减轻了小鼠肝脏的凋亡,进一步影响NF-κB通路,缓解了小鼠炎症情况,同时提示Er H至少部分通过抑制肝星状细胞的激活以及Smad 3通路缓解肝脏纤维化进程;Er H中的关键活性成分Ech可改善F

关键词：二黄祛脂方非酒精性脂肪性肝病系统药理学游离脂肪酸刺甘草查尔酮