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早期口腔初乳涂抹对极低出生体重早产儿的免疫保护作用:前瞻性随机安慰剂对照试验

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中华围产医学杂志 2020年第12期23卷 809-816页

作者：欧阳夏杨长仪修文龙胡燕华福建省妇幼保健院福建医科大学附属医院新生儿科福州350001

目的探讨生后早期口腔初乳涂抹(oropharyngeal administration of colostrum,OAC)对极低出生体重早产儿的免疫保护作用。方法采用前瞻性随机安慰剂对照非盲试验方法,纳入2019年1月至12月间在生后24 h内收住福建省妇幼保健院新生儿科的... 详细信息

目的探讨生后早期口腔初乳涂抹(oropharyngeal administration of colostrum,OAC)对极低出生体重早产儿的免疫保护作用。方法采用前瞻性随机安慰剂对照非盲试验方法,纳入2019年1月至12月间在生后24 h内收住福建省妇幼保健院新生儿科的出生体重≤1500 g且胎龄≤32周的早产儿,随机分为干预组和对照组,在生后48 h内开始分别给予OAC(0.4 ml母乳涂抹口腔,每3小时一次,每天8次)或生理盐水进行口腔护理直至生后10 d。主要结局指标为坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)和晚发型败血症(late-onset sepsis,LOS)的发生率。次要结局指标包括达完全肠内喂养日龄、达完全经口喂养日龄、体重增长速率、有创机械通气及无创通气时间、经皮中心静脉置管时间、住院时间以及相关并发症如动脉导管未闭、Ⅲ级及以上脑室内出血、脑室周围白质软化、支气管肺发育不良、早产儿视网膜病变、胆汁淤积症的发生率。不良反应为口腔黏膜破损。采用两独立样本t检验、非参数秩和检验及χ2检验进行统计学分析。结果研究期间共收治符合纳入标准的早产儿207例,排除7例,5例退出研究,最终纳入195例,其中对照组97例,干预组98例。(1)主要结局指标:干预组Ⅱ期及以上NEC以及LOS的发生率均低于对照组[3.1%(3/98)与10.3%(10/97),χ2=4.116,P=0.042;4.1%(4/98)与13.4%(13/97),χ2=5.322,P=0.021]。(2)次要结局指标:干预组达完全肠内喂养日龄较对照组小[22.0 d(16.0~29.0 d)与25.0 d(19.0~40.0 d),Z=3814.000,P=0.017],Ⅲ级及以上脑室内出血的发生率低于对照组[1.0%(1/98)与7.2%(7/97),Fisher精确概率法,P=0.035]。2组间其他次要结局指标差异无统计学意义(P值均>0.05)。(3)干预组内超低出生体重儿与对照组内超低出生体重儿相比,LOS发生率降低(0/13与3/7,P=0.031),达完全肠内喂养日龄较小[36.0 d(31.0~42.0 d)与46.0 d(42.0~71.0 d),Z=13.500,P=0.008],其他结局指标比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(4)2组均未观察到口腔黏膜破损发生。结论极低出生体重早产儿生后早期给予OAC可以降低NEC、LOS和严重脑室内出血的发生率,并缩短达完全肠内喂养的时间,且无明显不良反应。

关键词：婴儿,极低出生体重婴儿,早产初乳肠道营养口咽小肠结肠炎,坏死性投药,口服

初乳对早产儿免疫球蛋白A水平影响的Meta分析

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预防医学 2023年第5期35卷 431-435,439页

作者：门光国鲁徐丹王丽丽宁波市妇女儿童医院新生儿中心浙江宁波315012 东阿县中医院山东聊城252201

目的系统评价初乳对早产儿免疫球蛋白(IgA)水平的影响,为初乳喂养改善早产儿健康提供依据。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、PubMed和Web of Science等中英文数据库,收集建库至2022年9月30日发表的有关初乳对早产儿IgA水平影... 详细信息

目的系统评价初乳对早产儿免疫球蛋白(IgA)水平的影响,为初乳喂养改善早产儿健康提供依据。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、PubMed和Web of Science等中英文数据库,收集建库至2022年9月30日发表的有关初乳对早产儿IgA水平影响的随机对照试验(RCT)或临床对照试验(CCT)研究文献;以标准化平均差(SMD)作为效应指标进行Meta分析;采用敏感性分析检验结果的稳定性;采用Begg检验、Egger检验和漏斗图评估发表偏倚。结果初期检索文献650篇,最终纳入10篇,其中9篇为RCT,1篇为CCT,样本量为677例。Meta分析结果显示,实施初乳干预的早产儿唾液sIgA水平高于对照组(SMD=0.49,95%CI:0.08~0.89),尿sIgA(SMD=0.19,95%CI:-0.39~0.77)和血IgA水平(SMD=0.29,95%CI:-0.01~0.59)与对照组差异无统计学意义。敏感性分析显示Meta分析结果较为稳定。未发现发表偏倚。结论初乳喂养可提高早产儿唾液sIgA水平,但未发现其对尿sIgA和血IgA水平有影响。

关键词：初乳免疫球蛋白早产儿系统评价

人初乳来源外泌体负载治疗性miRNA的探索

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人初乳来源外泌体负载治疗性miRNA的探索

作者：白佳佳山东大学

学位级别：硕士

MicroRNA(miRNA)通常作为肿瘤抑制因子和癌基因,与肿瘤的发生和发展密切相关,我们课题组前期的研究发现,叶状肿瘤较乳腺纤维腺瘤,检测到miR-140-3p的表达量明显降低,在人纤维肉瘤细胞系HT1080中过表达miR-140-3p,能够抑制肿瘤细胞的增... 详细信息

MicroRNA(miRNA)通常作为肿瘤抑制因子和癌基因,与肿瘤的发生和发展密切相关,我们课题组前期的研究发现,叶状肿瘤较乳腺纤维腺瘤,检测到miR-140-3p的表达量明显降低,在人纤维肉瘤细胞系HT1080中过表达miR-140-3p,能够抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。但游离状态的miRNA易被环境中广泛存在的核糖核酸酶所分解,所以欲将miR-140-3p应用到肿瘤的治疗中需保持其稳定不受破坏。细胞外囊泡是从细胞膜上脱落产生的双层膜囊状小体,包括外泌体、微囊泡和凋亡小体,外泌体作为胞外囊泡的一种,直径在30-200nm之间,其双层脂膜结构能够防止miRNA被核糖核酸酶降解,所以使用外泌体包裹miRNA治疗肿瘤有可能成为一个新方向。人初乳中含有丰富的外泌体,但目前尚未发现将人初乳外泌体作为miRNA载体治疗肿瘤的报道。研究目的1.提取人初乳中外泌体并进行验证。2.探究使用人初乳中的外泌体作为治疗性miR-140-3p载体的可行性。研究方法1.收集健康产妇产后1周内的乳汁,使用超速离心法自人初乳中提取出外泌体囊泡。2.鉴定提取的外泌体:①Western blot检测初乳外泌体中的膜蛋白CD9及膜结合蛋白TSG101及细胞核蛋白TFIIB、Lamin A/C的表达情况;②使用透射电子显微镜,观察外泌体的形态大小及膜完整情况;③使用纳米颗粒追踪分析仪,分析外泌体浓度及粒径分布。3.外泌体的荧光标记:PKH67绿色荧光染料标记外泌体膜蛋白,合成miR-140-3p并使用红色荧光Cy3进行标记。通过反复冻融的方式将荧光标记的miR-140-3p转到外泌体中,再与HT1080细胞共同孵育24h,荧光显微镜下观察miR-140-3p是否转入外泌体,是否随外泌体进入细胞中。4.将转入miR-140-3p的外泌体与HT1080细胞孵育24h后,提取细胞中的RNA,实时荧光定量PCR检测miR-140-3p,将其表达情况与空载外泌体组进行对照。结果1.先后共收集健康产妇的初乳14例,分别进行超速离心,BCA法检测到提取物中总蛋白浓度较高。Western blot结果显示初乳提取物中膜蛋白CD9、膜结合蛋白TSG101表达为阳性,核蛋白TFIIB、Lamin A/C均为阴性,符合外泌体的蛋白表达。2.透射电镜显示初乳提取物中可见“杯垫”状形态的囊泡,虽经冻融过程膜结构仍完整,符合正常外泌体形态大小。3.使用纳米颗粒追踪分析仪检测显示:初乳提取物中囊泡的平均直径为197.7±27.6nm,浓度为1.47±0.89×1012 Particles/ml,符合外泌体的直径范围,与本课题组先前测得的成熟乳及乳头溢液的外泌体相比,初乳外泌体粒径较大、浓度更高。4.荧光检测结果显示Cy3标记的miR-140-3p可以通过反复冻融的方式进入人初乳外泌体内,并能通过共同孵育过程进入HT1080细胞中。5.负载miR-140-3p外泌体与HT1080细胞共孵育组,与对照组相比,细胞中miR-140-3p表达明显增加。结论超速离心提取人初乳外泌体具有较高的效率,可以达到外泌体的富集。初乳外泌体可以通过反复冻融的方法转载入miR-140-3p并通过孵育的方法转入人纤维肉瘤细胞内部。人初乳中含有丰富的外泌体可以作为miR-140-3p的载体进行肿瘤的治疗。

关键词：外泌体初乳 microRNA miR-140-3p HT1080

初乳口腔滴注对极低出生体质量儿胃肠功能的影响

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现代实用医学 2023年第9期35卷 1213-1215页

作者：应玲静戴玉璇陈美仙金华市中心医院浙江省金华321000

孕后期和分娩后7 d之内的乳汁称为初乳,含有丰富的细胞因子和免疫活性物质,拥有抗病毒、抑菌、杀菌及免疫调节等保护作用[1]。早产儿母体初乳较足月儿母体含有更高浓度的保护因子[2]。然而大多数极低出生体质量儿因脏器发育不成熟、胎... 详细信息

孕后期和分娩后7 d之内的乳汁称为初乳,含有丰富的细胞因子和免疫活性物质,拥有抗病毒、抑菌、杀菌及免疫调节等保护作用[1]。早产儿母体初乳较足月儿母体含有更高浓度的保护因子[2]。然而大多数极低出生体质量儿因脏器发育不成熟、胎龄小、体质量低,消化功能不成熟,容易出现喂养进程缓慢,发生喂养不耐受、新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)等并发症,不利于生长发育[3]。极低出生体质量儿出生后就被收住新生儿监护病房致母婴分离.

关键词：初乳口腔滴注极低出生体质量儿胃肠功能

初乳口腔护理对极/超低出生体重儿建立全肠道喂养过程的影响

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中国实用护理杂志 2020年第26期36卷 2039-2043页

作者：向美芹赵希平李玮桐任雪云江延秋济宁医学院附属医院新生儿ICU 272029

目的探讨初乳口腔护理对极/超低出生体重儿建立全肠道喂养过程的影响。方法选取在济宁医学院附属医院新生儿监护病房住院的62例极/超低出生体重儿,根据患儿入院顺序将患儿分为观察组和对照组各30例。对观察组实施初乳口腔护理,对照组使... 详细信息

目的探讨初乳口腔护理对极/超低出生体重儿建立全肠道喂养过程的影响。方法选取在济宁医学院附属医院新生儿监护病房住院的62例极/超低出生体重儿,根据患儿入院顺序将患儿分为观察组和对照组各30例。对观察组实施初乳口腔护理,对照组使用0.9%氯化钠溶液进行口腔护理,擦拭方法及频次相同。观察2组患儿完全无胃潴留的时间、完全经口进奶时间、达到肠内喂养的时间(100 ml·kg^-1·d^-1)、达到足量肠内喂养时间(150 ml·kg^-1·d^-1),出院时的体质量、头围、身长,和相关感染并发症的发生率。结果观察组患儿出生第10天胃潴留发生次数为(1.90±1.30)次,显著低于对照组(2.77±1.50)次,2组比较差异有统计学意义(t值为-2.449,P初乳口腔护理可以减少极/超低出生体重儿发生胃潴留的次数,改善患儿喂养不耐受,缩短患儿达到全肠道喂养的时间,促进生长发育,但并不能证实可以降低相关感染并发症的发生率。

关键词：初乳口腔护理极低出生体重儿超低出生体重儿肠内营养

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奶牛与水牛初乳中乳寡糖组分比较研究

生物化学与生物物理进展 2017年第10期44卷 942-948页

作者：孟宪璞焦思明秦胜旗杨贤蓓李建设未金花王倬杜昱光首都医科大学附属北京友谊医院北京100050 中国科学院过程工程研究所北京100190

乳寡糖是由乳汁中含量丰富的固体物质组成.研究结果表明,乳寡糖有提高免疫、益生元及抗感染等作用,已发现与婴儿肠道发育、神经智力发育等多方面关系密切.水牛奶是除牛奶外的第二大奶源,国际上公认其为营养含量高、口感好的优质乳制品,... 详细信息

乳寡糖是由乳汁中含量丰富的固体物质组成.研究结果表明,乳寡糖有提高免疫、益生元及抗感染等作用,已发现与婴儿肠道发育、神经智力发育等多方面关系密切.水牛奶是除牛奶外的第二大奶源,国际上公认其为营养含量高、口感好的优质乳制品,但目前针对水牛乳寡糖的研究多以美洲水牛为研究对象,尚无中国水牛的相关研究.本研究利用固相萃取对已脱脂和除去蛋白质的广西水牛初乳乳汁样品进行纯化,并采用苯胺(aniline,Bn)衍生化试剂对其进行衍生化处理,通过UPLC-ESI-Q-TOF-MS液相质谱进行优化后,对水牛初乳中的寡糖组分进行测定并与牛乳进行了对比,最终测得奶牛初乳中19种及水牛初乳中的9种乳寡糖组分,并对二者的种类及含量进行比较,发现在两种初乳的乳寡糖中,中性糖二糖m/z385.15和中性糖三糖m/z 547.21以及酸性糖m/z 635.23均为其主要寡糖成分,与其他乳寡糖相比含量相对较高.总体而言水牛初乳中的中性寡糖占比比奶牛初乳高,二者中性糖占乳寡糖总量的比例分别为88.88%和63.16%.

关键词：乳寡糖初乳奶牛水牛 UPLC-ESI-Q-TOF-MS

初乳口腔涂抹/滴注预防早产儿坏死性小肠结肠炎meta分析

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临床儿科杂志 2019年第9期37卷 712-717页

作者：王琪张先红魏璐余静重庆医科大学儿科学院儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆医科大学附属儿童医院新生儿诊治中心重庆400014

目的评价初乳口腔涂抹或滴注预防早产儿坏死性小肠结肠炎的有效性和安全性。方法计算机系统检索PubMed、Ovid-Embase、Web of Science、Cochrane Library、中国知网、万方数据库、维普数据库,收集早产儿初乳口腔涂抹/滴注的随机对照试验... 详细信息

目的评价初乳口腔涂抹或滴注预防早产儿坏死性小肠结肠炎的有效性和安全性。方法计算机系统检索PubMed、Ovid-Embase、Web of Science、Cochrane Library、中国知网、万方数据库、维普数据库,收集早产儿初乳口腔涂抹/滴注的随机对照试验(RCT),检索时间从建库至2019年1月。2名研究员独立筛选文献,提取资料并对文献进行质量评价;采用RevMan5.3软件进行meta分析。结果共纳入7篇随机对照试验(研究对象368例)。Meta分析结果显示,与对照组相比,初乳口腔涂抹/滴注早产儿坏死性小肠结肠炎的发生率(OR=0.85,95%CI:0.40~1.79,P=0.67)、住院时间(WMD=-7.09,95%CI:-16. 84~2. 67,P=0. 15)、病死率(OR=0. 64,95%CI:0. 20~2. 06,P=0. 46)的差异均无统计学意义,而达到全肠道喂养时间(WMD=-1.90,95%CI:-2.15^-1.65,P初乳口腔涂抹/滴注不能降低早产儿坏死性小肠结肠炎的发生率和病死率,不能缩短早产儿住院天数,但能缩短住院早产儿达到全肠道喂养时间与抗生素使用天数。

关键词：坏死性小肠结肠炎口腔涂抹初乳早产儿

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萨能奶山羊初乳和常乳的代谢组学分析

食品科学 2023年第24期44卷 245-252页

作者：康佳欣李萌廖敏和商佳琦任皓威卢玺丞刘宁齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150030 哈尔滨腾凝科技有限公司黑龙江哈尔滨150028

以萨能奶山羊初乳和常乳为研究对象,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱的非靶向代谢组学方法,探究不同泌乳期萨能奶山羊乳中代谢物的差异以及相关代谢通路的变化。结果表明:初乳中共有118个代谢物与常乳存在差异,其中有62个代... 详细信息

以萨能奶山羊初乳和常乳为研究对象,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱的非靶向代谢组学方法,探究不同泌乳期萨能奶山羊乳中代谢物的差异以及相关代谢通路的变化。结果表明:初乳中共有118个代谢物与常乳存在差异,其中有62个代谢物相对含量高于常乳,56个代谢物相对含量低于常乳,这些差异性代谢物主要为脂质类、氨基酸类、核苷类等。在代谢通路分析中筛选出与这些差异性代谢物最高的9条关键通路,它们共同调节萨能奶山羊的泌乳过程,其中柠檬酸循环可作为连接其他代谢通路的桥梁。这些代谢通路的命中差异性代谢物数量为12个,初乳中相对含量高的差异性代谢物为牛磺酸、亚牛磺酸、牛磺胆酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、琥珀酸、异柠檬酸、D-麦芽糖、α-乳糖、4-羟基苯基丙酮酸和甘氨酸,常乳中相对含量高的差异性代谢物为N1-甲基-4-吡啶酮-3-羧酰胺,它们可作为萨能奶山羊初乳和常乳中潜在的标志性代谢物。本研究采用代谢组学技术鉴别不同泌乳期萨能奶山羊乳差异性代谢物,为分析不同泌乳期的其他物种原料乳提供参考。

关键词：代谢组学萨能奶山羊初乳常乳差异性代谢物

初乳及其饲喂时间对新生羔羊血液生化指标、肠道发育和骨代谢的影响

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初乳及其饲喂时间对新生羔羊血液生化指标、肠道发育和骨代谢的影...

作者：阳利湖南农业大学

学位级别：硕士

本试验选取赣西黑山羊作为试验动物,分别开展新生羔羊有无初乳饲喂和延迟初乳饲喂动物试验,通过检测新生羔羊血液生化指标、骨代谢和肠道发育相关指标,初步探究有无初乳饲喂和初乳饲喂时间对新生羔羊骨代谢和肠道发育的分子机理,为新生... 详细信息

本试验选取赣西黑山羊作为试验动物,分别开展新生羔羊有无初乳饲喂和延迟初乳饲喂动物试验,通过检测新生羔羊血液生化指标、骨代谢和肠道发育相关指标,初步探究有无初乳饲喂和初乳饲喂时间对新生羔羊骨代谢和肠道发育的分子机理,为新生黑山羊初乳饲喂技术策略的建立提供数据和理论支撑。试验一:有无初乳对新生羔羊血液生化指标、肠道发育及骨代谢的影响。本试验选择体重、日龄相近,健康状况良好的新生赣西黑山羊16只,分为2组,每组8只,即初乳组（Colostrum feeding group,CG）和无初乳组（No colostrum feeding group,NCG）。CG组的新生羔羊出生后4h内饲喂初乳,NCG组的新生羔羊出生后4 h内饲喂代乳料,12h后采集新生羔羊血样、肠道和肝脏样品,以进行血液生化指标、肠道发育及肝脏骨代谢相关指标测定。结果表明:（1）无初乳饲喂显著降低新生羔羊血清GLU和TG含量（P＜0.05）,同时显著增加新生羔羊血清GH、IGF-1和BAGP/OCN含量（P＜0.05）。（2）无初乳饲喂显著降低新生羔羊十二指肠VEGF、FLT1、FGF2、TIE1、VEGFR和ANGPT1的基因表达水平（P＜0.05）,显著降低空肠VEGF、FLT1、FGF2、TIE1、VEGFR、ANGPT1的基因表达水平（P＜0.05）;（3）无初乳饲喂显著上调新生羔羊肝脏COL6A1、ALPL、β-catenin、BMP2、BGLAP、RUNX2、Cnx43、OPG、Smad1基因表达水平（P＜0.05）。试验二:初乳饲喂时间对新生羔羊血液生化指标、肠道发育及骨代谢的影响。本试验选择体重、日龄相近,健康状况良好的16只新生赣西黑山羊,分为2组,每组8只,即正常饲喂初乳组（Ordinary colostrum feeding group,OCG）和延迟饲喂初乳组（Delay colostrum feeding group,DCG）。OCG组的新生羔羊出生后4h内饲喂初乳,之后间隔8h饲喂代乳料;DCG组的新生羔羊于出生后4h内饲喂代乳料,之后间隔8h饲喂代乳料,44h后饲喂初乳,8h后采集血样,肠道和肝脏样品,以进行血液生化指标、肠道发育及肝脏骨代谢相关指标测定,试验持续52h。结果表明:（1）延迟饲喂初乳显著增加新生羔羊血清TG,降低血清HDL含量（P＜0.05）;此外,延迟饲喂初乳显著增加新生羔羊血清GH,BAGP/OCN和25-OH-VD含量（P＜0.05）;（2）延迟饲喂初乳显著降低了新生羔羊空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度（P＜0.05）,此外,延迟饲喂初乳降低十二指肠VEGFR基因表达水平（P＜0.05）,显著升高回肠FLT1和ANGPT2基因表达水平（P＜0.05）;（3）延迟饲喂初乳显著上调了新生羔羊肝脏VDR,LRP5,β-catenin,BGLAP,RUNX2,Cnx43,Smad1,OPGL/RANKL基因表达水平（P＜0.05）。以上试验发现:（1）无初乳饲喂降低了新生羔羊小肠上段VEGF、VEGFR、FGF2、FLT1、ANGPT1和ANGPT2的基因表达水平,这可能在一定程度抑制了小肠发育;无初乳饲喂显著增加新生羔羊血清GH、IGF-1和BAGP/OCN含量,同时显著上调了羔羊肝脏COL6A1、ALP、β-catenin、BMP2、BGLAP、RUNX2、Cnx43、OPG、Smad1基因表达水平,这说明在一定程度上影响了羔羊的骨代谢。（2）延迟饲喂初乳降低了小肠绒毛高度,同时调控了肠道VEGFR、FLT1、ANGPT2的基因表达水平,这说明延迟初乳饲喂不利于羔羊小肠发育;延迟饲喂初乳增加了新生羔羊血清GH和BAGP/OCN的激素水平,同时显著上调了肝脏VDR,LRP5,β-catenin,BGLAP,RUNX2,Cnx43和Smad1等基因的表达水平,这说明新生羔羊的骨代谢为异常状态,进而影响新生羔羊的骨代谢水平。

关键词：新生山羊初乳延迟饲喂初乳骨代谢肠道发育