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组织蛋白酶L/G对创伤性深静脉血栓模型大鼠静脉壁的影响(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第24期15卷 4525-4529页

作者：李文胡继红李兴国李宏昆章玉冰赵学凌王兵云南省人民医院心内科云南省昆明市650032 昆明医学院第一附属医院骨科云南省昆明市650032

背景:目前,深静脉血栓的分子病因学机制及其形成的核心调控网络仍未完全阐明,对于深静脉血栓的早期诊断预测也无理想的方法。目的:研究组织蛋白酶L/G与创伤性深静脉血栓的预测。方法:采用蚊式钳夹闭50只SD大鼠双侧股静脉的3个不同部位3... 详细信息

背景:目前,深静脉血栓的分子病因学机制及其形成的核心调控网络仍未完全阐明,对于深静脉血栓的早期诊断预测也无理想的方法。目的:研究组织蛋白酶L/G与创伤性深静脉血栓的预测。方法:采用蚊式钳夹闭50只SD大鼠双侧股静脉的3个不同部位3s随后予以模具制动制备大鼠创伤性深静脉血栓模型,根据股静脉血栓形成的不同阶段和生物学特征,将模型大鼠分为血栓形成前组、血栓形成组和无血栓形成组,另取10只正常大鼠作为对照组。在相应时间点取大鼠创伤静脉,提取总RNA,经过基因芯片技术筛选差异表达基因,并进一步应用real-time PCR进行验证。结果与结论:基因芯片杂交结果发现组织蛋白酶L/G基因在各组间差异表达明显,其中血栓形成组最高,无血栓形成组和血栓形成前组次之,均明显高于对照组(P静脉血管壁中组织蛋白酶L/G表达水平升高与创伤性深静脉血栓形成有关,可作为深静脉血栓形成早期诊断、预测的候选分子标志。

关键词：组织蛋白酶L 组织蛋白酶G 基因候选分子创伤性深静脉血栓静脉壁

消栓饮对创伤性深静脉血栓兔股静脉血管内皮细胞上TM、mEPCR的影响

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消栓饮对创伤性深静脉血栓兔股静脉血管内皮细胞上TM、mEPCR的影响

作者：谭剑涛湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究消栓饮对创伤性深静脉兔股静脉血管内皮细胞上TM、m EPCR的影响。方法:将36只健康成年雄性新西兰大白兔,根据体重分层后编号,随机分成4组,分别为A(消栓饮组),B(低分子肝素钠组),C(生理盐水组),D(假手术组),每组9只;其中A、B、... 详细信息

目的:研究消栓饮对创伤性深静脉兔股静脉血管内皮细胞上TM、m EPCR的影响。方法:将36只健康成年雄性新西兰大白兔,根据体重分层后编号,随机分成4组,分别为A(消栓饮组),B(低分子肝素钠组),C(生理盐水组),D(假手术组),每组9只;其中A、B、C三组采用钳夹联合石膏外固定法复制兔股静脉血栓模型,D组同前三组做相同手术切口;造模成功后分组给药治疗,在术后第1、3、7天第2次灌胃4小时后每次每组随机选取3只进行股静脉血管组织采集,置于-80℃液氮环境中保存。经解冻,研磨,离心处理后选取Elisa法检测各组兔子股静脉血管内皮细胞膜上TM,m EPCR含量变化,收集数据,并进行统计学分析。结果:在整个实验过程中,D组假手术组TM含量水平,m EPCR含量水平在各个阶段无明显数据差异(P>0.05),说明假手术组并未形成血栓,血管内皮细胞完整,屏障功能稳定,实验过程中两个指标数据并无明显变化。造模组A,B,C三组各阶段的TM,m EPCR含量均低于D组,其中A组术后第1d,TM,m EPCR含量均低于B组低分子肝素钠组(P0.05),说明在实验初期低分子肝素钠比消栓饮起效快,在术后第3d,第7d,A,B两组无明显差异(P>0.05),远高于C组TM,m EPCR的表达(P0.05);可能是自身抗凝作用的影响,血管内皮细胞会通过促进TM表达来尽量维持自身屏障功能,但这种功能在第3d至第7d之间可能达到高峰。结论:1.通过兔股静脉钳夹联合石膏外固定,成功的制造出DVT兔模型;2.血管内皮细胞损伤初期,细胞膜上TM和m EPCR含量水平会因机体自身凝血反应,炎性因子的影响会减少。3.在蛋白C系统介导的抗凝血途径中,消栓饮能够促进血管内皮细胞膜上TM,m EPCR水平升高,来促进蛋白PC的活化,从而灭活凝血因子Ⅴ和Ⅷ发挥出抗凝作用,在整个治疗过程中消栓饮起效比低分子肝素钠慢,但最终两者效果无明显差异。

关键词：创伤性深静脉血栓消栓饮蛋白C系统血栓调节蛋白(TM) 内皮细胞蛋白C受体(mEPCR)

消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔股静脉血管TMmRNA、mEPCRmRNA表达的影响

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消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔股静脉血管TMmRNA、mEPCRmRNA表...

作者：宋良琛湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:本实验建立创伤性深静脉血栓兔模型,以消栓饮进行干预,观察其对大兔股静脉血管组织TMm RNA、m EPCRm RNA表达的影响,探讨消栓饮抗深静脉血栓形成的机制。方法:将36只成年新西兰大白兔,3-5月龄,适应性喂养1周后,随机选取27只采用钳... 详细信息

目的:本实验建立创伤性深静脉血栓兔模型,以消栓饮进行干预,观察其对大兔股静脉血管组织TMm RNA、m EPCRm RNA表达的影响,探讨消栓饮抗深静脉血栓形成的机制。方法:将36只成年新西兰大白兔,3-5月龄,适应性喂养1周后,随机选取27只采用钳夹联合石膏外固定法建立创伤性股静脉血栓兔模型,造模成功后随机分为A消栓饮组,B低分子肝素钠组,C生理盐水组,剩下的归为D假手术组,每组9只;之后分组给药喂养,连续1周,在术后第1、3、7d第二次给药后4h取股静脉血管进行实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测;对实验数据进行统计学分析。结果:造模成功后的相同时间段里,完成造模的消栓饮组、低分子肝素钠组、生理盐水组的TMm RNA、m EPCRm RNA的表达均明显低于假手术组,差异具有显著性(P均0.05)。术后第3、7d,与生理盐水组相比,消栓饮与低分子肝素钠两组TMm RNA、m EPCRm RNA水平均显著升高(P性(P>0.05)。在同组内不同时间点的比较,消栓饮与低分子肝素钠两组术后第3、7d的TMm RNA、m EPCRm RNA表达较术后第1d均升高,具有统计学意义(P性(P0.05);假手术组的TMm RNA、m EPCRm RNA一直保持最高表达,且不同时间点的表达差异无显著性(P>0.05)。结论:中药消栓饮能提升创伤性深静脉血栓兔股静脉血管上TMm RNA、m EPCRm RNA的表达,促进蛋白C抗凝系统活性,达到治疗DVT的目的。

关键词：创伤性深静脉血栓 TMmRNA mEPCRmRNA 消栓饮实验研究中医药

消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔血浆IFN-γ、IL-4的影响

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消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔血浆IFN-γ、IL-4的影响

作者：潘德银湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究观察消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔模型血浆中IFN-γ、IL-4含量及其IFN-γ/IL-4比值的变化。方法:将50只健康的新西兰大白兔,随机选取30只采用钳夹联合石膏外固定法复制兔股静脉血栓模型,随机分为消栓饮组(A)、低分子肝素钠... 详细信息

目的:研究观察消栓饮对创伤性肢体深静脉血栓兔模型血浆中IFN-γ、IL-4含量及其IFN-γ/IL-4比值的变化。方法:将50只健康的新西兰大白兔,随机选取30只采用钳夹联合石膏外固定法复制兔股静脉血栓模型,随机分为消栓饮组(A)、低分子肝素钠组(B)、模型组(C)。剩下20只,不做特殊处理,随机分为假手术组(D)及空白组(E),每组10只。A组予以消栓饮浓缩药液灌胃,B组以腹壁皮下注射低分子肝素钠注射液,C、D、E三组分别予同消栓饮等量生理盐水灌胃,治疗第1、3、7天后,于第2次灌胃4小时后采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测兔血浆IFN-γ、IL-4含量变化,对实验数据进行比值处理,行统计学分析。结果:在相同时间段比较,假手术组、空白组兔血浆中IFN-γ、IL-4含量差异不明显,不具统计学意义(P>0.05),术后1天模型组IFN-γ、IL-4含量较假手术组中含量均有显著增高,差异具有统计学意义(P深静脉血栓形成过程中存在着炎症与抗炎系统的失衡,中药消栓饮可以通过干预IFN-γ、IL-4含量变化,维持两者的平衡来达到治疗的目的。

关键词：创伤性深静脉血栓 IFN-γ、IL-4 消栓饮实验研究中医药

创伤性深静脉血栓形成前KLF2表达变化的实验与临床初步研究

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创伤性深静脉血栓形成前KLF2表达变化的实验与临床初步研究

作者：王辉昆明医学院

学位级别：硕士

目的：研究KLF2在大鼠创伤性深静脉血栓模型中,血栓形成前、后所采集相应状态的血管组织、血细胞中的表达变化;在临床患者血细胞中,深静脉血栓形成、不形成的关键状态下,检测创伤患者血细胞中的KLF-2表达变化。探讨KLF-2的表达情况与深... 详细信息

目的：研究KLF2在大鼠创伤性深静脉血栓模型中,血栓形成前、后所采集相应状态的血管组织、血细胞中的表达变化;在临床患者血细胞中,深静脉血栓形成、不形成的关键状态下,检测创伤患者血细胞中的KLF-2表达变化。探讨KLF-2的表达情况与深静脉血栓形成的关系;为预测诊断深静脉血栓分子标记物的确立提供实验依据。方法：1、建立大鼠创伤性深静脉血栓模型,将50只大鼠分为五组,A组(正常对照组,0h),B组(创伤即刻组,0h),C组(血栓形成前组,2.5h),D组(血栓形成高峰组,24h),E组(血栓不形成组,168h)。对Affymetrix Rat230基因表达谱芯片检测出的基因芯片数据结果采用倍数变化分析方法(两组间同一基因的Signal log2 ratio比较,上调基因:Log2 Ratio≥1,下调基因:Log2 Ratio≤-1,)筛选出差异表达的基因并进行GO分类;以‘’Coagulation、Anticoagulant、platelet"为检索词在NCBI数据库、CNKI数据库中查询,并应用倍数变化分析方法筛选与凝血-抗凝系统血小板相关高表达基因(Signal log2 ratio比较,差值必须≥3或≤-3);选取大鼠股静脉血管组织来源的高表达基因中的KLF-2。分析KLF-2在深静脉血栓形成过程中的表达变化趋势。2、通过ncbiGenBank数据库和cnki数据库,将两者的基因序列代入BLAST中进行比较,明确KLF-2在大鼠与人类之间的同源性(序列比对使用MEGA 4.0软件)。分析实验数据并总结。3、制定临床统一观察、诊断标准及纳入和排除标准,根据制定的标准收集临床资料。实验分组：正常对照组(A1组)、创伤对照组(A2)、血栓形成组(B组),血栓不形成组(C组)。收集血样本,应用0ligo6.69引物设计软件对人KLF-2设计反转录引物,将各组人血细胞RNA反转录为cDNA,以GAPDH为内参照运用RT-PCR检测KLF-2在临床血液样本血细胞中的表达情况。4、对实验数据进行处理、分析,将KLF-2在大鼠血管组织、血液中以及人血中的表达变化作比较,结合其生理作用和参与其他疾病发生发展的机理,分析其在深静脉血栓形成中的地位和作用。结果：1,大鼠创伤性深静脉模型股静脉Affymetrix基因芯片数据中,KLF2具有自创伤即刻组(B组)开始,到血栓形成高峰组(D组)逐渐下调表达的共同趋势(KLF2-BvsA:-0.104, CvsA:-0.715, DvsA:-1.565:).其中血栓形成高峰组较正常对照组(A组)出现显著差异下调表达。无血栓形成组(G组)较正常对照组表达水平略有升高(KLF2-GvsA:0.135;).2,大鼠KLF-2基因与人KLF-2基因具有高度同源性。3,Real-timePCR检测结果与芯片检测结果变化趋势上基本一致,但Real-timePCR的灵敏度大于基因芯片(Z=-4.137.P=0.00血栓形成组和无血栓组靶基因表达无明显差异。结论：1.KLF-2在大鼠DVT模型自创伤即刻到血栓形成高峰期静脉血管组织、血细胞中均出现显著下调,可能在深静脉血栓形成中起着重要作用。2.第二部分试验采集样本数不足,可能对实验结果产生影响,随着样本数量不断补充并继续深入研究,KLF-2基因在人TDVT血液中的表达情况可能会出现与大鼠相类似的结果。

关键词：创伤性深静脉血栓 KLF-2 血液人

消栓饮对创伤性深静脉血栓兔股静脉血浆中sTM、sEPCR表达的影响

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消栓饮对创伤性深静脉血栓兔股静脉血浆中sTM、sEPCR表达的影响

作者：陈佳栋湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究消栓饮对创伤性深静脉血栓兔模型股静脉血浆中sTM、sEPCR表达的影响。方法:将36只健康成年雄性新西兰大白兔,根据体重分层后随机分成4组,分为A(消栓饮组),B(低分子肝素钠组),C(生理盐水组),D(假手术组),每组为9只;其中A、B、C... 详细信息

目的:研究消栓饮对创伤性深静脉血栓兔模型股静脉血浆中sTM、sEPCR表达的影响。方法:将36只健康成年雄性新西兰大白兔,根据体重分层后随机分成4组,分为A(消栓饮组),B(低分子肝素钠组),C(生理盐水组),D(假手术组),每组为9只;其中A、B、C三组采用钳夹联合石膏外固定法制造兔股静脉血栓模型,D组同前三组做相同手术切口,然后分组给药治疗,在术后第1、3、7天第2次灌胃4小时后每次每组随机选取3只进行耳缘静脉血采集,置于抗凝管中,放入-20℃环境下保存,处理后选取Elisa法检测各组兔子血浆中sTM、sEPCR含量变化,并对实验检测的数据进行统计学分析。结果:造模成功后,治疗第一天,D组假手术组血浆中sTM、sEPCR含量明显低于其他三组,与其他三组比较具有明细差异(P0.05)。分析结果得到,随着治疗时间变化,D组假手术组含量无明显变化,始终低于其他三组,证明在无血栓的情况下,血液中的sTM与sEPCR的含量是基本维持不变的;C组生理盐水组始终处于缓慢下降趋势,表明由于自身抗凝机制发挥作用,对体内的sTM及sEPCR的含量具有调节效果;A组消栓饮组在第1天呈上升趋势,证明药物暂未发挥效用,但在第3天到第7天则呈持续下降,表明消栓饮开始见效;B组低分子肝素钠组则在7天内持续下降,与C组生理盐水组有显著性差异(P深静脉血栓形成的过程中,血浆中sTM、sEPCR含量发生变化。中药消栓饮可以通过调控深静脉血栓兔模型血浆中的sTM、sEPCR含量的变化来达到治疗DVT的目的。

关键词：创伤性深静脉血栓蛋白C系统 sTM sEPCR 消栓饮实验研究中医药

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IL-6在创伤性深静脉血栓中的研究进展

赣南医学院学报 2020年第3期40卷 302-307页

作者：石锦莫建文赣南医学院江西赣州341000 赣南医学院第一附属医院江西赣州341000

创伤性深静脉血栓(traumatic deep vein thrombosis,TDVT)是骨科大手术后常见的并发症,会影响患者的日常生活,甚至最终会危及患者生命,而白介素6(Interleukin-6,IL-6)在深静脉血栓的形成过程中起着不可或缺的作用。现对创伤后深静脉血... 详细信息

创伤性深静脉血栓(traumatic deep vein thrombosis,TDVT)是骨科大手术后常见的并发症,会影响患者的日常生活,甚至最终会危及患者生命,而白介素6(Interleukin-6,IL-6)在深静脉血栓的形成过程中起着不可或缺的作用。现对创伤后深静脉血栓的形成机制以及IL-6的相关研究作一概述。

关键词：创伤性深静脉血栓血栓危险因素白介素6

消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型外周血APC、PS的影响

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消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型外周血APC、PS的影响

作者：张普成湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过建立兔创伤性深静脉血栓形成模型,观察消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型外周血APC、PS的影响,探讨消栓饮对抗深静脉血栓的作用机制,为其临床治疗深静脉血栓形成提供实验依据。方法:选取36只健康的成年雄性新西兰大白兔,随... 详细信息

目的:通过建立兔创伤性深静脉血栓形成模型,观察消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型外周血APC、PS的影响,探讨消栓饮对抗深静脉血栓的作用机制,为其临床治疗深静脉血栓形成提供实验依据。方法:选取36只健康的成年雄性新西兰大白兔,随机分为A组消栓饮组、B组低分子肝素钠组、C组生理盐水组、D组假手术组,每组9只。A、B、C组通过钳夹联合石膏外固定法建立兔股静脉血栓模型,造模成功后分组给药治疗,分别在在术后第1、3、7d第二次给药4h后,然后通过酶联免疫吸附测定(Elisa)法检测各组外周血APC、PS的含量变化,对实验检测所得数据进行统计学分析。结果:在所有的相同时间段,D假手术组APC及PS没有明显的差异(P>0.05)。A消栓饮组、B低分子肝素钠组APC及PS水平都明显高于C生理盐水组,且C生理盐水组APC及PS水平均高于D假手术组。治疗后第1天,A消栓饮组与B低分子肝素钠组APC及PS水平均高于C生理盐水治疗组,有统计学意义(P0.01)。在治疗第3、7天,C生理盐水组APC及PS不断增加,较D假手术组有明显差异(P性差异(P深静脉血栓形成,其作用机制可能是与促进APC及PS生成有关。

关键词：创伤性深静脉血栓 APC PS 消栓饮实验研究中医药

消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型Thl（CD4+TNF-α+）、Th2（CD4+IL-4+）亚群漂移的影响

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消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型Thl（CD4+TNF-α+）、Th2（C...

作者：徐文杰湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型Th1(CD4+TNF-α+)/Th2(CD4+IL-4+)亚群漂移的影响方法:将45只健康的足龄新西兰大兔,分成5个组,每组9只;用A组代表空白实验组,B组代表假手术组,C组代表生理盐水对照组,D代表低分子肝素组,E... 详细信息

目的:研究消栓饮对兔创伤性深静脉血栓形成模型Th1(CD4+TNF-α+)/Th2(CD4+IL-4+)亚群漂移的影响方法:将45只健康的足龄新西兰大兔,分成5个组,每组9只;用A组代表空白实验组,B组代表假手术组,C组代表生理盐水对照组,D代表低分子肝素组,E代表消栓饮组。C、D、E组采用钳夹联合石膏外固定法复制兔股静脉血栓模型,造模成功分组给药治疗,连续治疗1周,在术后第1、3、7d给药4h后,采用流式细胞术检测各组大鼠Th1(CD4+TNF-α+)、Th2(CD4+IL-4+)含量变化,对实验检测所得数据进行统计学分析。结果:治疗第1天,C生理盐水组、D消栓饮组、E低分子肝素钠组中Th1(CD4+TNF-a+)、Th2(CD4+IL-4+)比例明显高于A空白组与B假手术组(P0.05),在治疗第3,7天,A空白组与B假手术组的仍没有明显差异,且Th1(CD4+TNF-a+)、Th2(CD4+IL-4+)波动无明显变化(P>0.05)。C生理盐水组Th1(CD4+TNF-a+)所占比例在第3天达到最高,在第7天时稍有下降;较D消栓饮组、E低分子肝素钠组有明显差异(P性差异(P性差异(P性差异(P>0.05)。结论:深静脉血栓形成过程中存在Th1(CD4+TNF-α+)、Th2(CD4+IL-4+)亚群动态平衡被打破;中药消栓饮可以通过干预Th1(CD4+TNF-α+)、Th2(CD4+IL-4+)含量变化,维持两者的平衡来达到治疗的目的。

关键词：创伤性深静脉血栓 Th1(CD4+TNF-α+) Th2(CD4+IL-4+) 消栓饮实验研究中医药