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保加利亚乳杆菌盐胁迫响应基因对菌体分裂增殖的影响

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保加利亚乳杆菌盐胁迫响应基因对菌体分裂增殖的影响

作者：邬慧颖哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

保加利亚乳杆菌是乳酸菌发酵剂主体菌株,其在高密度培养过程中会受到由于流加碱法抑制酸而产生的盐胁迫。前期研究表明外源添加甜菜碱可有效地缓解菌体所受到的胁迫压力,但是这种方法不能使菌体恢复正常状态,分析其主要原因是在盐胁迫... 详细信息

保加利亚乳杆菌是乳酸菌发酵剂主体菌株,其在高密度培养过程中会受到由于流加碱法抑制酸而产生的盐胁迫。前期研究表明外源添加甜菜碱可有效地缓解菌体所受到的胁迫压力,但是这种方法不能使菌体恢复正常状态,分析其主要原因是在盐胁迫条件下,菌体分裂增殖受到影响。目前,以保加利亚乳杆菌应答盐胁迫引起自身分裂增殖受到影响为切入点的研究很少,因此本课题以保加利亚乳杆菌为研究对象,分析盐胁迫响应基因的差异表达水平并构建突变株,进一步分析相关基因在菌体分裂增殖过程中起到的作用,为保加利亚乳杆菌分裂增殖机理的深入研究奠定一定的理论基础。本文采用荧光定量PCR手段对信号响应因子和膜转运蛋白等可能对盐胁迫产生应答的基因进行了相对mRNA表达量分析。研究发现,在盐胁迫条件下,来自*** 34.5的6个信号响应因子rr1-rr6基因的表达量均有提高,外源添加甜菜碱使这些基因的表达水平下调。分析5个膜转运基因的表达量发现,***34.5主要通过调控初级转运体基因的表达来响应盐胁迫压力。其中,膜转运体基因feoA在盐胁迫条件下表达量上调了3.59倍,添加甜菜碱后,表达量仍上调了2.65倍。为研究feoA基因对保加利亚乳杆菌分裂增殖的影响,本实验构建了基因敲除表达载体p UC19-F-t,利用同源重组技术,以tet基因为抗性筛选标记,敲除*** 34.5的feoA基因,并从生长曲线、菌体形态变化和分裂相关基因的差异表达水平等多个方面对feoA基因与菌体生长、分裂增殖的关系进行了初步探讨。研究发现,基因feoA的缺失导致*** 34.5的迟滞期被延长了1.5 h,菌体的生物量在生长对数后期下降了15%,稳定期时,恢复到野生株的同期水平。显微观察发现,突变体△feoA菌株在对数生长期呈现出不规则的弯曲或半圆形的菌体形态,稳定期则呈现典型的乳酸菌的密集短杆状形态。通过比较分裂相关基因的表达水平发现,*** 34.5野生型菌株在对数期会显著地提高基因ftsZ、mbl和mreB的表达水平以适应菌体的高速分裂增殖状态。基因feoA的缺失使ftsZ和mreB的表达与野生型相比产生一定的差异,在分裂趋于缓慢的生长对数后期,这两种基因的表达量分别下降了0.61倍和0.31倍。推断基因feoA的缺失能够通过影响ftsZ和mreB的表达而影响菌体自身的分裂增殖,这种影响体现在突变体△feoA菌株在对数期生长量下降,形态异变,但是稳定期的菌体不再受到明显影响。

关键词：保加利亚乳杆菌盐胁迫胁迫响应基因敲除分裂增殖

冻土毛霉菌(Mucor hienalis)线粒体分裂增殖的电子显微镜观察

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科学通报 1966年第8期 371-374页

作者：焦瑞身吳經綸中国科学院植物生理研究所

近年来有关动物线粒体生物化学和超微结构的研究已有很多报导,但对线粒体来源问题意见比较分歧,有的认为线粒体来源于亚显微结构的前体,也有认为来源于膜质结构、胞核或者已存在的线粒体。最近Lehninger在讨论这个问题时指出,线粒体来... 详细信息

近年来有关动物线粒体生物化学和超微结构的研究已有很多报导,但对线粒体来源问题意见比较分歧,有的认为线粒体来源于亚显微结构的前体,也有认为来源于膜质结构、胞核或者已存在的线粒体。最近Lehninger在讨论这个问题时指出,线粒体来源于线粒体的观点比较有可靠的论据。和动物细胞线粒体比较,人们对真菌线粒体的了解更不完整,有关线粒体来源也同样存在分

关键词：线粒体粒线体分裂增殖 Mucor hienalis 电子显微镜电镜

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高钼日粮可引起雏鸡肝脏细胞分裂增殖受阻

中国家禽 2011年第10期33卷 65-65页

四川农业大学肖杰等研究了高钼日粮对雏鸡肝细胞周期和凋亡的影响。他们将300只1日龄健康Avian肉鸡随机分为4组，分别饲喂对照组日粮（Mo13mg／kg）和高钼日粮（Mo500mg／kg，I组；Mo1000mg／kg，Ⅱ组；Mo1500mg／kg，Ⅲ组）6周，于14... 详细信息

四川农业大学肖杰等研究了高钼日粮对雏鸡肝细胞周期和凋亡的影响。他们将300只1日龄健康Avian肉鸡随机分为4组，分别饲喂对照组日粮（Mo13mg／kg）和高钼日粮（Mo500mg／kg，I组；Mo1000mg／kg，Ⅱ组；Mo1500mg／kg，Ⅲ组）6周，于14、28、42日龄每天随机抽取5只以流式细胞术研究高钼对雏鸡肝脏细胞周期和凋亡的影响。结果显示：高钼Ⅱ组和Ⅲ组雏鸡体重和肝脏重量显著低于对照组，脏器指数显著高于对照组。电镜下肝细胞内质网扩张，线粒体肿胀、空泡化。高钼Ⅱ组和Ⅲ组肝细胞G0／G1期极显著升高，s期、G2＋M期和增殖指数与对照组比不同程度地降低；同时细胞凋亡率极显著高于对照组。该研究结果表明，日粮含钼1000mg／kg以上时可引起肝细胞分裂增殖能力受阻，凋亡细胞显著增多。

关键词：肝脏细胞分裂增殖含钼日粮受阻雏鸡四川农业大学细胞凋亡

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细胞损伤微环境多核巨细胞的形成与分裂观察

中国医药导报 2021年第26期18卷 4-7,23,F0003页

作者：王佳叶冬梅袁小林大连大学附属中山医院中心实验室辽宁大连116001

目的观察细胞损伤微环境多核巨细胞(MGC)形成过程,为MGC形成的机制研究提供科学依据。方法将巨噬细胞(RAW 264.7)和心肌细胞(HL-1)按照1∶3的比例共培养15 d,实验组不换液不传代、对照组定期换液。观察细胞损伤微环境MGC形成现象,采用... 详细信息

目的观察细胞损伤微环境多核巨细胞(MGC)形成过程,为MGC形成的机制研究提供科学依据。方法将巨噬细胞(RAW 264.7)和心肌细胞(HL-1)按照1∶3的比例共培养15 d,实验组不换液不传代、对照组定期换液。观察细胞损伤微环境MGC形成现象,采用活细胞工作站观察MGC形成过程和两种细胞相互作用;采用扫描电镜对细胞融合进行确认。结果细胞损伤微环境中,MGC形成且细胞数量随着停止换液时间的延长而增多;光学显微镜观察到MGC形成的动态过程;活细胞工作站观察到MGC形成分裂的全过程及染色细胞融合形成MGC;扫描电镜观察到未染色细胞融合形成MGC。结论巨噬细胞与受损心肌细胞融合形成MGC并且能够诱导其分裂增殖。

关键词：巨噬细胞心肌细胞多核巨细胞分裂增殖

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椎间盘髓核细胞老化的微环境因素研究现状

中国脊柱脊髓杂志 2016年第4期26卷 370-374页

作者：康新桂吴小涛时睿蔡峰王锋东南大学附属中大医院脊柱外科中心南京市210009

椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）继发的脊柱不稳与椎管狭窄是引起腰腿痛的主要原因。老化的髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）在退变的椎间盘组织中广泛聚集,这些老化的NPCs能诱导并加速IDD。与细胞程序性... 详细信息

椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）继发的脊柱不稳与椎管狭窄是引起腰腿痛的主要原因。老化的髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）在退变的椎间盘组织中广泛聚集,这些老化的NPCs能诱导并加速IDD。与细胞程序性凋亡不同,老化细胞仍有代谢活性,却停止分裂增殖,同时上调炎症因子和基质降解酶的表达,通过形成老化分泌表型（senescent-associated secretory phenotypes,SASP）来恶化邻近细胞生存的微环境。

关键词：微环境细胞老化椎间盘髓核髓核细胞分裂增殖椎间盘组织 intervertebral 椎管狭窄 degeneration 程序性凋亡

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胎鼠海马神经干细胞生物学特性的研究

中国神经精神疾病杂志 2001年第4期27卷 273-275,I002页

作者：刘辉杨树源高永中张建宁张文治天津医科大学总医院神经外科天津300052 天津市环湖医院

目的研究胎鼠脑组织中海马神经干细胞的自我繁殖特性及多向分化潜能。方法在碱性成纤维生长因子（FGF-2）作用下从胎鼠脑组织中分离、培养神经干细胞并诱导其分化,然后采用间接免疫荧光和免疫组化技术研究神经干细胞的特性。结果由... 详细信息

目的研究胎鼠脑组织中海马神经干细胞的自我繁殖特性及多向分化潜能。方法在碱性成纤维生长因子（FGF-2）作用下从胎鼠脑组织中分离、培养神经干细胞并诱导其分化,然后采用间接免疫荧光和免疫组化技术研究神经干细胞的特性。结果由胎鼠海马中分离出的神经干细胞在体外分裂增殖形成干细胞团,分化产生神经元和胶质细胞,它们分别对神经上皮干细胞蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白等抗原标记呈现阳性。结论胎鼠脑海马中存在神经干细胞,其具有自我增殖特性和多向分化潜能,在FGF-2的作用下分裂增殖,并分化成神经元、胶质细胞。

关键词：神经干细胞海马碱性成纤维生长因子分裂增殖分化胎鼠

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小鼠精原干细胞体外培养的一般特性

中国兽医学报 2001年第2期21卷 160-163页

作者：李德雪张学明李子义赖良学文兴豪杜惜明岳占碰解放军军需大学动物科技系吉林长春130062

将分离纯化的 7～ 8d小鼠精原干细胞进行体外培养 ,结果显示 ,精原干细胞 2 4 h后可完全贴壁 ,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形 ,直径 ( 1 1± 1 ) μm,以链、团状或散在方式贴附于混杂其中的睾丸体细胞层上 ;睾丸体细胞为多突起细胞 ,胞质... 详细信息

将分离纯化的 7～ 8d小鼠精原干细胞进行体外培养 ,结果显示 ,精原干细胞 2 4 h后可完全贴壁 ,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形 ,直径 ( 1 1± 1 ) μm,以链、团状或散在方式贴附于混杂其中的睾丸体细胞层上 ;睾丸体细胞为多突起细胞 ,胞质形成 2～ 4个突起 ;体外培养 50～ 6 0 h后 ,精原干细胞开始分裂。上述结果表明 ,在本试验培养基所提供的体外环境中 ,精原干细胞能够存活一定时间并发生贴壁。

关键词：精原干细胞体外培养小鼠贴壁速度贴壁行为一般形态学分裂增殖

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应重视发展我省五倍子生产

山西林业科技 1991年第3期20卷 46-,44页

作者：张之平

1 五倍子生产现状及发展意义五倍子是倍子蚜虫寄生在盐肤木和青肤杨等复叶组织内而生成的疣状虫瘿,依寄主不同而通常有肚倍、角倍、倍花三大类。五倍子的主要成分为单宁酸,含量约为60％～70％,是生产单宁酸、焦性没食子酸、药用鞣酸的... 详细信息

1 五倍子生产现状及发展意义五倍子是倍子蚜虫寄生在盐肤木和青肤杨等复叶组织内而生成的疣状虫瘿,依寄主不同而通常有肚倍、角倍、倍花三大类。五倍子的主要成分为单宁酸,含量约为60％～70％,是生产单宁酸、焦性没食子酸、药用鞣酸的主要原料。其抽提物被广泛应用于医药、化工、国防、科研等方面,有着极其显著的经济阶值。五倍子生产和应用在我国已有悠久历史。这一传统的土特产在国际市场上有很高的声誉,通称“中国五倍子单宁酸”,在国内亦有广阔的市场。但是由于它对生境条件要求比较苛刻,从而限制了自身的发展和产量,市场上供不应求的紧张局面始终存在。据资料介绍。

关键词：五倍子单宁疣状生境条件焦性没食子酸国际市场抽提物干母采摘期分裂增殖组织细胞

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默艾德公司的肿瘤抑制剂研究

药学进展 1995年第1期19卷 49-50页

作者：殷海峰

默艾德公司的肿瘤抑制剂研究美国默艾德（Ｍｙｒｉａｄ）基因公司的研究人员最近发现一种有效的肿瘤抑制基因ＭＴＳ１（复合肿瘤抑制因子１），这种基因控制生成Ｐ１６蛋白，而Ｐ１６蛋白则通过抑制细胞周期酶调节细胞的分裂增殖。电解... 详细信息

默艾德公司的肿瘤抑制剂研究美国默艾德（Ｍｙｒｉａｄ）基因公司的研究人员最近发现一种有效的肿瘤抑制基因ＭＴＳ１（复合肿瘤抑制因子１），这种基因控制生成Ｐ１６蛋白，而Ｐ１６蛋白则通过抑制细胞周期酶调节细胞的分裂增殖。电解槽试验表明，肺癌、乳腺癌、脑癌、骨...

关键词：抑制剂浮选药剂艾德分裂增殖基因控制登记专利