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分子杂交化学发光法检测血清中乙型肝炎病毒DNA

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临床检验杂志 2002年第1期20卷 45-46页

作者：邬光惠范公忍张桂霞黄耀煊北京军区总医院肝病研究所北京100700

目的　用非放射性的异羟基洋地黄毒甙 (地高辛 ,Dig)标记探针与靶DNA杂交 ,结合化学发光检测系统检测乙肝患者血清中HBVDNA。方法　应用宝灵曼公司生产的DigDNA标记检测试剂盒。将Dig标记的HBVDNA探针与点印迹在尼龙膜或硝酸纤维素膜上... 详细信息

目的　用非放射性的异羟基洋地黄毒甙 (地高辛 ,Dig)标记探针与靶DNA杂交 ,结合化学发光检测系统检测乙肝患者血清中HBVDNA。方法　应用宝灵曼公司生产的DigDNA标记检测试剂盒。将Dig标记的HBVDNA探针与点印迹在尼龙膜或硝酸纤维素膜上的靶DNA杂交 ,杂交后的膜与Dig AP抗体保温 ,然后用化学发光底物CSPD与之作用 ,导致在波长 4 77nm处发光 ,感光于X光底片上。结果　待检的 12 9份血清标本 ,用此法检测HBVDNA阳性率达 5 8 4 % ,敏感性 2 0pg～0 5 pg。为了比较 ,3 2 9份血清标本用显色法测定 ,阳性率 4 5 0 % ,敏感性 5 0 pg～ 1 0 pg。对照组呈阴性结果。结论　Dig标记探针分子杂交化学发光法具有较高特异性、敏感性和简便等优点 ,可用于血清中HBVDNA的检测。

关键词：分子杂交化学发光检测乙型肝炎病毒血管诊断 HBV-DNA

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分子杂交策略设计的喹诺酮类抗菌化合物进展

石油化工 2024年

作者：宋润喆郑刚中石化(北京)化工研究院有限公司

喹诺酮类化合物是一类广泛用于细菌感染临床治疗的药物，部分药物是特定感染的首选治疗药物。随着抗菌药物的长期使用，具有新型结构的化学合成抗菌药物的研究与开发很有必要。采用分子杂交策略将两种生物活性片段糅合，可得到对靶标活... 详细信息

喹诺酮类化合物是一类广泛用于细菌感染临床治疗的药物，部分药物是特定感染的首选治疗药物。随着抗菌药物的长期使用，具有新型结构的化学合成抗菌药物的研究与开发很有必要。采用分子杂交策略将两种生物活性片段糅合，可得到对靶标活性更高或作用多个靶标的新化合物，提高体内药物对疾病的整体活性，实现“1+1＞2”的效果。综述了喹诺酮类抗菌药的作用机制和构效关系，概述了分子杂交策略下得到的新型喹诺酮类抗菌化合物的进展以及对喹诺酮类化合物进行优化得的研究进展。

关键词：喹诺酮类抗菌分子杂交

分子杂交技术对外周血单个核细胞及肝细胞内HBV-DNA的初步研究

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第三军医大学学报 1991年第6期13卷 556-559页

作者：崔晓红李梦东顾长海第三军医大学西南医院传染病科 630038

本文分别用转移印迹杂交和斑点杂交检测61例乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)及血清中的HBV-DNA。同时用转移印迹杂交和原位杂交检测其中31例患者肝活检组织中的HBV-DNA。结果发现血清、PBMC及肝组织HBV-DNA阳性率分别为26.2％(16/61),2... 详细信息

本文分别用转移印迹杂交和斑点杂交检测61例乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)及血清中的HBV-DNA。同时用转移印迹杂交和原位杂交检测其中31例患者肝活检组织中的HBV-DNA。结果发现血清、PBMC及肝组织HBV-DNA阳性率分别为26.2％(16/61),24.6％(15/61)及48.4％(15/31)。同一个体内,血清、PBMC及肝组织内HBV-DNA之间无明确的关联,血清HBV-DNA阴性时,仍可在11例患者的PBMC或肝内检出HBV-DNA。结果表明,PBMC可能也是独立于肝外的HBV贮存及复制的场所。血清HBV-DNA阴性不能否定体内仍有HBV复制的可能。

关键词：单核细胞乙型肝炎分子杂交

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土壤微生物PCR及分子杂交检测

微生物学报 1999年第4期39卷 381-384页

作者：丁志勇许崇任北京大学生命科学学院环境生物学及生态学系

ＰＣＲ技术在环境微生物的检测方面已得到越来越广泛的应用，Ｓｔｅｆａｎ等［１］利用ＰＣＲ技术检测土壤中的转基因细菌，后来用于检测土壤中不可培养的微生物［２］，跟踪环境中的特定细菌或ＤＮＡ［３］，揭示土壤生态系统的基因多... 详细信息

ＰＣＲ技术在环境微生物的检测方面已得到越来越广泛的应用，Ｓｔｅｆａｎ等［１］利用ＰＣＲ技术检测土壤中的转基因细菌，后来用于检测土壤中不可培养的微生物［２］，跟踪环境中的特定细菌或ＤＮＡ［３］，揭示土壤生态系统的基因多样性［４］等。利用ＰＣＲ技术来检测...

关键词： PCR 分子杂交苏云金芽孢杆菌检测土壤微生物

肺心病患者绿脓杆菌分型耐药质粒DNA分子杂交的临床意义

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中华结核和呼吸杂志 1995年第6期18卷 357-359页

作者：缪竞智张秀珍李焕娄何依萍王小平张桂兰林凤如卫生部北京医院中国医学科学院医药生物技术研究所

对８所医院住院肺心病患者痰培养获绿脓杆菌（ＰＡ）６００株进行分型分析，结果Ｐ６型占２５．６％。不同地区和医院的假单胞菌及ＰＡ型别分布不同，可作为流行病学调查依据。１５０株中的６８株ＰＡ含有质粒，用β－内酰胺酶和氨基苷... 详细信息

对８所医院住院肺心病患者痰培养获绿脓杆菌（ＰＡ）６００株进行分型分析，结果Ｐ６型占２５．６％。不同地区和医院的假单胞菌及ＰＡ型别分布不同，可作为流行病学调查依据。１５０株中的６８株ＰＡ含有质粒，用β－内酰胺酶和氨基苷钝化酶耐药基因探针各６种，与６０株含质粒的ＰＡ菌落杂交，证实从院内感染患者分离到的３株ＰＡ均带有与ＯＸＡ－２、ＡＡＣ（６＇）－１ｂ同源的ＤＮＡ序列并均来自同一个菌株，在传播院内感染时，又获得了新的耐药基因。

关键词：肺心病绿脓杆菌分型质粒 DNA 分子杂交

66例早期钩体病患者血和尿标本的聚合酶链反应及生物素分子杂交分析

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华西医科大学学报 1997年第2期28卷 132-135页

作者：熊秋芳鲍朗张明李胜富伍卫华万波邱洪宇基础医学院钩端螺旋体病研究室荷兰皇家热带医学研究院

采用国际通用引物Ｇ１Ｇ２对６６例发病在一周内钩体病患者的血和尿标本进行了ＰＣＲ检测及生物素－链霉抗生素蛋白碱性磷酸酶体系标记的重组ＤＮＡ探针杂交分析。结果表明，ＰＣＲ技术结合生物素分子杂交分析，不仅排除了非特异性扩增... 详细信息

采用国际通用引物Ｇ１Ｇ２对６６例发病在一周内钩体病患者的血和尿标本进行了ＰＣＲ检测及生物素－链霉抗生素蛋白碱性磷酸酶体系标记的重组ＤＮＡ探针杂交分析。结果表明，ＰＣＲ技术结合生物素分子杂交分析，不仅排除了非特异性扩增，增加了可靠性，同时也提高了检测的敏感性（从７１．３％升至８６．１％）；经统计学分析发现早期尿标本的ＰＣＲ检测阳性率与同期血标本的ＰＣＲ检测阳性率没有统计学差别，由于尿标本易于收集和处理，所以对尿标本进行ＰＣＲ检测对钩体病的早期诊断和后期监测更值得重视和推广。

关键词：钩端螺旋体聚合酶链反应分子杂交早期诊断

应用分子杂交对钩端螺旋体DNA同源性的研究

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华西医科大学学报 1990年第3期21卷 230-233页

作者：肖建国戴保民华西医大钩端螺旋体病研究室

作者以^(32)P标记的黄疸出血群赖型017株钩体DNA为探针,分别与2个属5个血清群的6株钩体DNA进行分子杂交。结果表明,黄疸出血群赖型017株与同群、型的56601株同源性较高,与秋季群(56606株)、七日热群(56610株)次之,与双曲钩体patoc型Pat... 详细信息

作者以^(32)P标记的黄疸出血群赖型017株钩体DNA为探针,分别与2个属5个血清群的6株钩体DNA进行分子杂交。结果表明,黄疸出血群赖型017株与同群、型的56601株同源性较高,与秋季群(56606株)、七日热群(56610株)次之,与双曲钩体patoc型Patoc Ⅰ株、细螺旋体属illini细螺旋体同源性很低;^(32)P标记的钩体DNA探针能检测四川地区流行的致病性钩体。

关键词：钩端螺旋体 DNA 分子杂交探针

用分子杂交法检测实验小鼠体内柯萨基B组病毒RNA

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病毒学报 1989年第3期5卷 241-246页

作者：张红毅 G.E.Yousef N.E.Bowles L.C.Archard G.F.Mann J.F.Mowbray 西安第四军医大学傲生物学教研室英国圣玛丽医院医学实验病理科英国伦敦查理十字和西敏斯特医学院生化教研室英国伦敦卫生与热带病医学院微生物学教研室

用来自柯萨基B组3型病毒基因组5′末端的cDNA克隆pCB111/51为探针,检测病毒感染小鼠动物模型中肠道病毒RNA。用柯萨基B组病毒CBU1和CBU2型分别攻击易感小白鼠乳鼠和成年鼠,可导致实验性急、慢性肌炎和急性心肌炎。冰冻和福尔马林固定、... 详细信息

用来自柯萨基B组3型病毒基因组5′末端的cDNA克隆pCB111/51为探针,检测病毒感染小鼠动物模型中肠道病毒RNA。用柯萨基B组病毒CBU1和CBU2型分别攻击易感小白鼠乳鼠和成年鼠,可导致实验性急、慢性肌炎和急性心肌炎。冰冻和福尔马林固定、石蜡包埋组织标本,分别用于^(?)P标记探针槽印染膜杂交和生物素标记探针原位杂交。结果两种分子杂交方法都能从动物心肌炎、肌炎标本中检出柯萨基B组病毒RNA,并发现慢性肌炎持续存在长达6个月以上。槽印染膜杂交技术具有结果客观、信号便于扫描定量等特点。生物素标记探针原位杂交结果与槽印染膜杂交法相一致,避免了同位素的缺点。并可以对病毒基因组进行细胞水平定位,有助于发病机理的研究。

关键词：分子杂交 CBV 心肌炎

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分子杂交鉴定杆状病毒

病毒学杂志 1991年第1期6卷 49-52页

作者：吴中心蔡宜权中国科学院武汉病毒研究所

利用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcNPV) DNA EcoRI-I片段作为同源探针,在35℃条件下,通过Southern-blot hybridization将斜纹夜蛾核型多角体病毒(Prodenia Iiturs nuclear polyhedrosis virus. PlNPV)多角体蛋白基因定位于其HindⅢ-A片段。以PlNPV DNA HindⅢ-A片段和PlNPV DNA HindⅢ-C片段分别制备探针,在不同的杂交条件下,对PINPV,甘兰夜蛾NPV(Mamestra brassicae nuclear polyhedrosis virus,MbNPV)油桐尺蠖NPV(Buzura suppresseria nuclear polyhedrosis virus,BsNPV)进行了鉴定。结果表明:由A片段制备的探针,在不同的杂交条件下,具有相应不同的非特异性,而由C片段制备的探针则具有严格的特异性。

关键词：杆状病毒分子杂交鉴定