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实验生物学报 2003年第2期36卷 137-144页

作者：李波陈誉华中国医科大学发育生物学研究室沈阳110001 卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

多细胞生物体发育的实质是基因的选择性表达,表达蛋白的成熟有赖于分子伴侣的协助,但迄今分子伴侣特别是内质网分子伴侣在脑发育过程中的作用尚不清楚。本文应用RT-PCR、蛋白质免疫印迹和免疫组织化学的方法研究了小鼠发育不同阶段的脑... 详细信息

多细胞生物体发育的实质是基因的选择性表达,表达蛋白的成熟有赖于分子伴侣的协助,但迄今分子伴侣特别是内质网分子伴侣在脑发育过程中的作用尚不清楚。本文应用RT-PCR、蛋白质免疫印迹和免疫组织化学的方法研究了小鼠发育不同阶段的脑组织中grp78的表达和定位分布随时间变化的情况。结果发现grp78在小鼠脑发育过程中呈时空性表达:胚胎早期表达较高,胚胎发育末期逐渐下降,出生后逐渐升高,至生后一周时达到成年鼠的水平;在胚胎期grp78蛋白在脑组织的表达呈现从端脑到后脑逐渐降低的趋势。研究结果还表明grp78蛋白的免疫染色阳性产物在神经细胞中出现的时间早于神经胶质细胞。这些首次观察到的结果提示grp78与脑的早期发生和形态建成有一定的关系。

关键词：内质网分子伴侣grp78 脑发育过程时空性表达葡萄糖调节蛋白形态建成

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缺血预处理通过减轻内质网应激保护全脑缺血大鼠

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国际脑血管病杂志 2013年第8期21卷 618-623页

作者：缪亦锋邱永明张晓华上海交通大学医学院附属仁济医院神经外科 200032 南京医科大学附属无锡市第二人民医院神经外科 214002

目的探讨抑制内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）在缺血预处理诱导脑缺血耐受中的作用。方法120只成年雄性Sprague—Dawley大鼠，随机分为假手术组、全脑缺血组和缺血预处理组（缺血预处理3min，2d后全脑缺血15min），设1... 详细信息

目的探讨抑制内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）在缺血预处理诱导脑缺血耐受中的作用。方法120只成年雄性Sprague—Dawley大鼠，随机分为假手术组、全脑缺血组和缺血预处理组（缺血预处理3min，2d后全脑缺血15min），设1、3和7d共3个时间点。应用Sugawara法观察大鼠行为学变化，TUNEL染色观察皮质神经元凋亡情况，免疫荧光染色和蛋白质印迹分析检测ERS相关蛋白CHOP、grp78和胱天蛋白酶-12表达情况。结果神经行为学评分显示，假手术组无神经功能缺损，全脑缺血组和缺血预处理组均出现明显的神经功能缺损，而且随着时间推移出现逐步改善，但全脑缺血组在模型制作后各时间点的神经功能评分均显著性低于缺血预处理组：1d时：（11．00±0．63）分对（14．33±0．33）分（t=21．74，P=0．001）；3d时：（12．17±0．31）分对（15．17±0．48）分（t=27．93，P=0．000）；7d时：（14．67±0．49）分对（16．33±0．33）分（t=7．81，P=0．020）。TUNEL染色显示，缺血后7d时，假手术组、全脑缺血组和缺血预处理组每娜奇TUNEL染色阳性细胞计数分别为（4．83±1．85）个、（395．67±43．43）个和（146．17±27．38）个（F=23．62，P=0．001），缺血预处理组显著性低于全脑缺血组（P=0．001）。免疫荧光染色显示，缺血后7d时，缺血预处理组CHOP[（26．50±3．89）个对（82．33±4．25）个；P=0．000]、grp78[（15．00±2．02）对（35．67±2．99）个；P=0．000]和胱天蛋白酶一12[（22．33±2．76）个对（66．50±7．25）个；P=0．000]阳性细胞数量均显著性少于全脑缺血组。蛋白质印迹法显示，缺血后7d时，缺血预处理组CHOP[（1．22±0．38）对（3．22±0．51）；t=24．50，P=0．001]、grp78[（1．78±0．45）对（3．16±0．76）；t=14．29，P=0．005]和胱天蛋白酶-12[（2．89±0．53）对（5．96±0．67）；t=77．73；P=0．000]表达显著性低于全脑缺血组。结论缺血预处理对第2次致死性缺血表现出神经保护作用，其机制可能与ERS减轻，ERS相关蛋白表达下调有关。

关键词：脑缺血缺血预处理内质网转录因子CHOP 分子伴侣grp78 胱天蛋白酶12 细胞凋亡疾病模型,动物大鼠

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