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一株凤丹皮内生真菌Fusarium acutatum的次生代谢产物研究

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安徽中医药大学学报 2022年第3期41卷 78-84页

作者：孔垂皓孙磊赵焕赵宏苏张培良吴德玲黄圣卓许凤清安徽中医药大学中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012 浙江康恩贝制药股份有限公司浙江杭州310052 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

目的研究来源于凤丹皮中分离得到的一株内生菌Fusarium acutatum的次生代谢产物。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、开放ODS结合半制备高效液相色谱分离技术进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定结构。结果从固体发酵产物中分离得到1... 详细信息

目的研究来源于凤丹皮中分离得到的一株内生菌Fusarium acutatum的次生代谢产物。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、开放ODS结合半制备高效液相色谱分离技术进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定结构。结果从固体发酵产物中分离得到15个化合物,分别鉴定为neosartorin(1),cyclonerodiol(2),enniatin H(3),(3R,6R)-4-甲基-6-(1-甲基乙基)-3-苯甲基全氢-1,4-噁嗪-2,5-二酮(4),赤霉菌吡喃酮D(5),赤霉菌吡喃酮F(6),麦角甾醇(7),过氧化麦角甾(8),麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(9),(7E,9E)-6,11-dioxononadeca-7,9-dienoic acid(10),5-羟甲基-2-呋喃甲醛(11),α-D-吡喃葡萄糖基-(1→1′)-3′-氨基-3′-去氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(12),α-D-alloypyranose(13),豆甾醇(14),β-谷甾醇(15)。结论化合物1~15为首次从该内生菌中分离得到。

关键词： Fusarium acutatum 化学成分凤丹皮内生菌

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凤丹皮HPLC指纹图谱研究

南京中医药大学学报 2011年第1期27卷 66-68页

作者：孔昭琰胡煜雯巢建国谷巍孔令婕南京中医药大学药学院江苏南京210046

目的建立安徽凤丹皮HPLC指纹图谱,为凤丹皮的质量控制提供依据。方法采用HPLC法,以甲醇∶乙腈（1∶1）-0.5‰甲酸水为流动相进行梯度洗脱,在265 nm波长下,以丹皮酚为参照物,建立10批丹皮的指纹图谱。结果凤丹皮有10个共有峰。采用《中... 详细信息

目的建立安徽凤丹皮HPLC指纹图谱,为凤丹皮的质量控制提供依据。方法采用HPLC法,以甲醇∶乙腈（1∶1）-0.5‰甲酸水为流动相进行梯度洗脱,在265 nm波长下,以丹皮酚为参照物,建立10批丹皮的指纹图谱。结果凤丹皮有10个共有峰。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）版》,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度,10批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度在0.914-0.991,并得出了凤丹皮的对照指纹图谱。结论该指纹图谱方法简便、重现性好,可专属性地研究丹皮的指纹图谱,为有效地控制凤丹皮的内在质量提供了科学依据。

关键词：凤丹皮丹皮酚指纹图谱 HPLC

凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分含量的经时变化特征分析

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中药材 2019年第3期42卷 541-544页

作者：严安定宋帅孙银华谢晋安徽医科大学附属阜阳医院安徽阜阳236000 安徽医科大学第一附属医院安徽合肥230022 安徽医科大学药学院安徽合肥230032 马鞍山市药品不良反应监测中心安徽马鞍山243000

目的:分析凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分含量的经时变化特征,丰富凤丹皮品质评价的科学内涵。方法:通过对凤丹根次生木质部的生长轮显微鉴定,获取不同生长年限的凤丹皮。采用HPLC法测定凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分的含量,流动相... 详细信息

目的:分析凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分含量的经时变化特征,丰富凤丹皮品质评价的科学内涵。方法:通过对凤丹根次生木质部的生长轮显微鉴定,获取不同生长年限的凤丹皮。采用HPLC法测定凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分的含量,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长选择258、230、270 nm。结果:建立并验证了同时测定凤丹皮中丹皮酚、丹皮酚新苷、丹皮酚原苷、芍药苷、氧化芍药苷和苯甲酰芍药苷含量的HPLC法,上述6种成分在其定量范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率98.62%~101.89%,RSD均丹皮酚类(除丹皮酚新苷)及芍药苷类成分质量分数呈逐年下降的趋势;丹皮酚类成分相对含量随生长年限逐步增加,至第4年趋于稳定;5年生凤丹皮中丹皮酚类成分含量是芍药苷类成分的2.09倍。结论:丹皮酚新苷是多年生凤丹皮中丹皮酚类成分的主要存在形式。丹皮酚新苷的质量分数、丹皮酚类与芍药苷类成分的相对质量分数可作为多年生凤丹皮品质的评价指标。

关键词：凤丹皮生长轮丹皮酚芍药苷丹皮酚新苷经时变化趋势生长年限

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凤丹皮降血糖的活性成分研究

凤丹皮降血糖的活性成分研究

作者：王松笛湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的：研究凤丹皮对链脲佐菌素诱发的2型糖尿病小鼠降血糖、降血脂的作用并且确定出凤丹皮的主要活性成分,初步研究其降血糖的作用机制,为凤丹皮的临床应用提供理论依据。方法：连续喂养高脂饲料(炼猪油10%、蔗糖20%、胆固醇2.5%、胆酸... 详细信息

目的：研究凤丹皮对链脲佐菌素诱发的2型糖尿病小鼠降血糖、降血脂的作用并且确定出凤丹皮的主要活性成分,初步研究其降血糖的作用机制,为凤丹皮的临床应用提供理论依据。方法：连续喂养高脂饲料(炼猪油10%、蔗糖20%、胆固醇2.5%、胆酸盐1%、常规饲料66.5%)4周建立雄性昆明种小鼠高脂血症模型,再通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)130mg·kg-1复制实验性小鼠2型糖尿病模型。首先用10倍量的双重水煎煮凤丹皮3次每次2小时,每次煎煮完后先用纱布过滤接着用滤纸抽滤合并3次过滤液后减压浓缩,再往浓缩液中加入含醇量为95%的乙醇使浓缩液中最终含醇量为30%,静置在4℃的冰箱中24小时后减压抽滤得滤液和滤渣,将滤液进行减压浓缩后再冷冻干燥成凤丹皮小分子组份,滤渣直接经过冷冻干燥得凤丹皮多糖组份。糖尿病模型造模成功的小鼠随机分配到模型组、二甲双胍组(阳性组)和凤丹皮多糖组和凤丹皮小分子组中,并设立正常对照组。凤丹皮两组份连续灌胃4周后,均以试剂盒的规定严格运用生化分析方法检测凤丹皮两组份小鼠的体重、肝脏重量、肾脏重量、血糖浓度(GLU)、糖耐量、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)等指标并结合分子生物学羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)、葡萄糖6-磷酸酶glucose-6-phosphatase (G6PC)、葡萄糖激酶glucokinase (GCK)三个基因进行降血糖的作用研究,为开发凤丹皮治疗性药品、保健品以及进一步的研究提供理论基础。糖尿病(DM, Diabetes Mellitus)是一种多病因引起的疾病,其主要特点是慢性高血糖以及伴随因胰岛素(Insulin)分泌缺陷或不足引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱,是由于遗传因素和环境因素长期共同作用的结果。由于胰岛素分泌绝对或相对不足和组织细胞对胰岛素敏感性下降,引发蛋白、脂肪、糖、水和电解质等一系列代谢紊乱。临床上以高血糖作为主要指标,久病会引起多个系统损伤。糖尿病的患病率与人群年龄成正比,现代医疗条件的完善使老年人糖尿病的诊断率大大提高,随着生活质量的提高和人们寿命的延长,糖尿病总人数和患病率进一步上升。因而寻找高疗效、作用稳定持久、毒副作用小的药物和治疗方法,成为近年来糖尿病的研究重点。丹皮又被叫做牡丹皮,是毛茛科芍药属多年生落叶小灌木植物牡丹之干燥根皮,其性微寒,味苦、辛,归心、肝、肾经,具有活血化瘀、清热凉血的功效,是较为常用的中药材,始载于《神农本草经》,列为中品。牡丹皮资源分布广泛,以安徽、四川产量最大,安徽铜陵凤凰山所产者,习称凤丹,是传统的道地药材。传统医学认为是清热凉血、活血化瘀之要药,用于治疗温毒发斑、吐血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、痈肿疮毒、跌扑伤痛等。现代化学和药理学研究表明,丹皮含有丹皮酚、芍药苷等多种活性成分,牡丹皮临床应用广泛,是许多经典中药复方的重要组成部分,在治疗类风湿性关节炎、心血管疾病、糖尿病、皮肤病及女性生殖系统等疾病中发挥独特的疗效。本实验采用凤丹作为对象来研究和探讨其不同组分的降血糖作用。实验结果如下结果：1凤丹皮能将实验性2型糖尿病小鼠精神好转,运动量增大,体重上升并能改善“多饮、多食、多尿的临床症状”。2凤丹皮能明显地降低实验性糖尿病小鼠的血糖值,改善糖耐量,调节血清中总胆固醇以及三酰甘油的含量。其中,凤丹多糖组份的作用最强。3凤丹皮能明显地提高实验性高血糖小鼠的超氧化物歧化酶含量并能显著地降低丙二醛的含量,增强了小鼠的抗氧化能力。4凤丹皮能显著地降低葡糖6-磷酸水解酶(G6PC)和羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)的相对表达并能显著地升高葡糖糖激酶(GCK)的相对表达,促进了实验型糖尿病小鼠的糖代谢。5凤丹皮降血糖的最强活性成分为凤丹多糖组份,其降血糖的机制可能是促进胰岛β细胞产生以及促进葡萄糖代谢使葡萄糖负荷后的血糖值有所改善。结论：凤丹皮能显著地调节实验性2型糖尿病小鼠糖代谢和脂代谢紊乱,降低糖毒性和脂毒性,预防糖尿病及其并发症的发生和发展,明确了凤丹皮降血糖的最强活性成分,为传统中草药在临床上预防及治疗糖尿病开辟了新的思路,丰富了传统地中医理论依据,而其确切的有效成分及作用机制还待进一步研究。

关键词：凤丹皮糖尿病血糖血脂

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安徽凤丹皮的质量研究

中药材 1989年第7期12卷 25-27页

作者：陈奇安徽省铜陵市卫生局

本文测定了凤丹皮不同等级、贮藏期、生长年限牡丹酚的含量及不同生长发育阶段牡丹酚含量与产量的关系。同时测定了氨基酸、微量元素、水份和灰分的含量。

关键词：凤丹皮特丹酚氨基酸微量元素

同株凤丹皮的不同部位中丹皮酚和芍药苷的含量比较

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中国实验方剂学杂志 2014年第18期20卷 54-56页

作者：纪开明方成武管玉云管大平吴计划铜陵市食品药品检验中心安徽铜陵244000 安徽中医药大学合肥230031 亳州职业技术学院安徽亳州236800 北京同仁堂安徽中药材有限公司安徽铜陵244000

目的：采用高效液相色谱法,比较同地同株凤丹皮中不同部位的丹皮酚和芍药苷含量差异.方法：采用WatersVP-ODS-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;丹皮酚含量测定流动相甲醇-水（55∶45）,检测波长274 nm,柱温35℃,流速1.0mL·min-1;芍... 详细信息

目的：采用高效液相色谱法,比较同地同株凤丹皮中不同部位的丹皮酚和芍药苷含量差异.方法：采用WatersVP-ODS-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;丹皮酚含量测定流动相甲醇-水（55∶45）,检测波长274 nm,柱温35℃,流速1.0mL·min-1;芍药苷含量测定流动相乙腈-0.1％H3PO4（20∶ 80）,检测波长230 nm,柱温35℃,流速1.0 mL· min-1.结果：丹皮酚在1.073 ～5.365 μg,芍药苷在0.593 ～2.965μg均呈良好线性关系,相关系数分别为0.999 9,0.999 1,平均回收率丹皮酚为99.96％（RSD 0.72％）,芍药苷为99.03％（RSD 0.49％）.结论：在选定的同株凤丹皮最细部位的丹皮酚和芍药苷含量均高于最粗部位及中等部位.

关键词：凤丹皮丹皮酚芍药苷不同部位

正交试验-多指标归一化法优化凤丹皮水提工艺

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中国药房 2018年第3期29卷 361-364页

作者：王培赵宏苏吴德玲许凤清张伟龙全江方成武安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽中医药高等专科学校药学系安徽芜湖241000 安徽省中医药科学院亳州中医药研究所安徽亳州236800

目的:优化凤丹皮水提工艺。方法:采用L_9(3~4)正交试验设计,以凤丹皮中8个成分没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的峰面积百分比和浸膏率经归一化法后的综合评分为考察指标,对凤... 详细信息

目的:优化凤丹皮水提工艺。方法:采用L_9(3~4)正交试验设计,以凤丹皮中8个成分没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的峰面积百分比和浸膏率经归一化法后的综合评分为考察指标,对凤丹皮水提工艺的药材浸泡时间、料液比、提取时间、提取次数进行优化,并进行验证试验。结果:最优水提工艺为加20倍水,浸泡药材1 h,提取2次、每次2 h。验证试验结果中,3次试验的综合评分分别为65.98、68.85、69.25,各指标的RSD均小于5%(n=3)。结论:建立的综合评分方法能较全面地反映凤丹皮的相对有效成分含量,以此优化得到的提取工艺合理、可行。

关键词：凤丹皮多指标归一化法正交试验提取工艺优化

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凤丹丹皮酚抗菌作用的研究

生物学杂志 2000年第3期17卷 23-24页

作者：刘春云武廷章周大喜汪翠萍安徽大学实验与物资设备处安徽大学生命科学学院合肥230039

用钢管法、滤纸法、挖孔法对凤丹丹皮酚的抗菌作用进行了研究 ,结果表明 :凤丹丹皮酚对黄色八叠球菌、福氏痢疾杆菌、枯草芽孢菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等五种供试细菌均有较强的抑制作用 ,尤其是黄色八叠球菌最为敏感 ;三种方法中... 详细信息

用钢管法、滤纸法、挖孔法对凤丹丹皮酚的抗菌作用进行了研究 ,结果表明 :凤丹丹皮酚对黄色八叠球菌、福氏痢疾杆菌、枯草芽孢菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等五种供试细菌均有较强的抑制作用 ,尤其是黄色八叠球菌最为敏感 ;三种方法中挖孔法效果最佳。

关键词：丹皮酚抗菌作用凤丹皮挖孔法中药药理

不同采收期凤丹皮中3种药效成分动态变化研究

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中国中医药信息杂志 2011年第1期18卷 63-64页

作者：孔昭琰巢建国谷巍胡煜雯孔令婕南京中医药大学药学院江苏南京210046

目的通过研究不同采收期安徽南陵凤丹皮3种药效成分的动态变化,确立凤丹皮的最佳采收期,为牡丹皮GAP生产提供依据。方法采用高效液相色谱法,以甲醇-乙腈(1:1)-0.5‰甲酸为流动相进行梯度洗脱,在265nm波长处,同时测定不同生长发育期凤丹... 详细信息

目的通过研究不同采收期安徽南陵凤丹皮3种药效成分的动态变化,确立凤丹皮的最佳采收期,为牡丹皮GAP生产提供依据。方法采用高效液相色谱法,以甲醇-乙腈(1:1)-0.5‰甲酸为流动相进行梯度洗脱,在265nm波长处,同时测定不同生长发育期凤丹皮中没食子酸、丹皮酚、芍药苷3种化学成分的含量。结果凤丹皮中3种药效成分的含量不同时期存在差异,但均以9月份为最高。结论9月份为安徽凤丹皮的最佳采收时期;该法简便、精密度高、重复性好,为有效地控制牡丹皮的内在质量提供了科学依据。

关键词：凤丹皮高效液相色谱法采收期没食子酸丹皮酚芍药苷质量标准