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凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

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时珍国医国药 2012年第6期23卷 1520-1522页

作者：贺丰杰李小宁张文婷陕西中医学院陕西咸阳712046

目的探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵性功血(ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法。方法卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PC... 详细信息

目的探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵性功血(ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法。方法卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体(estro-gen receptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化。结果模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1mRNA表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制。

关键词：凋膜止崩液 ADUB MMP-1 TIMP-1 雌激素受体

凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

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时珍国医国药 2012年第8期23卷 1861-1863页

作者：贺丰杰李小宁张文婷陕西中医学院陕西咸阳712046

目的探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵功血(ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法。方法卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR... 详细信息

目的探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵功血(ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法。方法卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化。结果①模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1mRNA表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。②模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制。

关键词：凋膜止崩液 ADUB MMP-1 TIMP-1 雌激素受体雌激素受体亚型

凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症腺细胞中PTEN和Rb2/p130表达的影响

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凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症腺细胞中PTEN和Rb2/p130表达的...

作者：严谨陕西中医药大学

学位级别：硕士

功能失调性子宫出血(dysfunctional uterine bleeding,DUB)是由下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调引起的不正常子宫出血症,其中85%为无排卵型功血,其主要病理形态为子宫内膜增生,子宫内膜增生症(endometrial hyperplasia,EH)在分子水平上的发... 详细信息

功能失调性子宫出血(dysfunctional uterine bleeding,DUB)是由下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调引起的不正常子宫出血症,其中85%为无排卵型功血,其主要病理形态为子宫内膜增生,子宫内膜增生症(endometrial hyperplasia,EH)在分子水平上的发病机理目前尚不完全清楚,多种致病因素在不同阶段作用于不同基因,导致基因结构及表达水平的改变,从而造成子宫内膜增生症,其中,PTEN、Rb2/p130基因突变失活,致PTEN、Rb2/p130蛋白表达降低或不表达是重要因素之一。目的:通过凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130基因表达影响,探讨其对EH的治疗机理。方法:分离、培养30例原代人子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞并采用CK-19鉴定,将纯化后的腺上皮细胞随机分为四组:空白对照组、凋膜止崩液大剂量组(50μg/ml)、凋膜止崩液中剂量组(25μg/ml)、凋膜止崩液小剂量组(12.5μg/ml),分别于用药24h、48h、72h观察下列指标的变化:四甲基偶氮噻唑兰(MTT)法检测3个时间点各组细胞的增殖率、实时定量聚合酶连反应(RT-PCR)以及Western blot分别检测各组的细胞PTEN、Rb2/p130 mRNA及蛋白表达的差异。结果:1.与空白对照组比较凋膜止崩液各组腺上皮细胞的增殖率明显降低,且呈时间和剂量依赖性(P凋膜止崩液组EH腺上皮细胞中PTEN、Rb2/p130 mRNA及蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比差异显著(P膜增生症(EH)腺上皮细胞及基质细胞培养成功。结论:1.凋膜止崩液能明显抑制EH腺上皮细胞的增殖,其抑制作用与上调细胞抑癌基因PTEN、Rb2/p130的表达有关。2.凋膜止崩液通过提高人体外EH腺上皮细胞中PTEN、Rb2/p130的mRNA和蛋白表达,从而使腺上皮细胞增值率降低,达到治疗EH的目的。3.凋膜止崩液能够作用于子宫内膜增生症(EH)的靶细胞—腺上皮细胞,对抑制靶细胞(腺上皮细胞)增殖作用显著,有望成为治疗功能失调性子宫出血的新药。

关键词：凋膜止崩液子宫内膜增生症(EH) PTEN Rb2/p130

凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130表达影响

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辽宁中医药大学学报 2018年第2期20卷 30-34页

作者：严谨王芙蓉贺丰杰张红陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西中医药大学第一附属医院陕西戚阳712000

目的：通过凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症（EH）腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130基因表达的影响,探讨其对EH的治疗机理。方法：分离、培养30例原代人子宫内膜增生症（EH）腺上皮细胞并采用CK-19鉴定,将纯化后的腺上皮细胞随机分为4组：空... 详细信息

目的：通过凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症（EH）腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130基因表达的影响,探讨其对EH的治疗机理。方法：分离、培养30例原代人子宫内膜增生症（EH）腺上皮细胞并采用CK-19鉴定,将纯化后的腺上皮细胞随机分为4组：空白对照组、凋膜止崩液大剂量组（50μg/mL）、凋膜止崩液中剂量组（25μg/mL）、凋膜止崩液小剂量组（12.5μg/mL）,分别于用药24、48、72 h观察下列指标的变化：四甲基偶氮噻唑兰（MTT）法检测3个时间点各组细胞的增殖率、实时定量聚合酶连反应（RT-PCR）以及Western blot分别检测各组细胞PTEN、Rb2/p130 m RNA及蛋白表达的差异。结果：与空白对照组比较,凋膜止崩液各组腺上皮细胞的增殖率明显降低,且呈时间和剂量依赖性（P〈0.05）;凋膜止崩液组EH腺上皮细胞中PTEN、Rb2/p130 m RNA及蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比差异显著（P〈0.05）。结论：凋膜止崩液能明显抑制EH腺上皮细胞的增殖,其抑制作用与上调细胞抑癌基因PTEN、Rb2/p130的表达有关。

关键词：凋膜止崩液子宫内膜增生症 PTEN Rb2/p130

凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠P PR的影响

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辽宁中医药大学学报 2010年第9期12卷 30-32页

作者：王艳贺丰杰朱丽红陕西中医学院陕西省中医学院临床医学院陕西咸阳712046

目的:研究不同剂量凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠孕激素(P)及其受体(PR)的影响,揭示药物在有效部位靶向干预条件下,HPOA(下丘脑-垂体-卵巢轴)调节通道靶端药物效应机制,探讨靶向药物治疗功能失调性子宫出血(DUB)的分子生物学机制。方... 详细信息

目的:研究不同剂量凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠孕激素(P)及其受体(PR)的影响,揭示药物在有效部位靶向干预条件下,HPOA(下丘脑-垂体-卵巢轴)调节通道靶端药物效应机制,探讨靶向药物治疗功能失调性子宫出血(DUB)的分子生物学机制。方法:将大鼠随机分为4组:空白组(A)、模型组(B)、凋膜止崩液小剂量组(C)、凋膜止崩液大剂量组(D),采用雌激素负荷去势法建立大鼠增生过长子宫内膜动物模型,放射免疫法测定各组大鼠血清孕激素(P)水平,免疫组织化学染色观察大鼠子宫内膜细胞孕激素受体(PR)的表达。结果:血清中P的水平:B组与C组相比有显著性差异(P0.05);子宫内膜PR的表达:C组、D组子宫内膜PR表达明显降低,与B组相比有显著统计学差异(P0.05)。结论:凋膜止崩液可能通过直接或间接的作用调节P、PR消除增生过长子宫内膜。

关键词：凋膜止崩液子宫内膜增生过长模型孕激素孕激素受体

凋膜止崩液对体外培养人子宫内膜腺上皮细胞Bcl-2/Bax蛋白及基因表达的影响

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国际中医中药杂志 2018年第11期40卷 1065-1069页

作者：李楠徐翠贺丰杰谈勇王灿灿南京中医药大学附属医院生殖医学科 210046 北京中医药大学东方医院妇科 100078 陕西中医药大学附属医院妇科咸阳712000

目的观察凋膜止崩液对体外培养人子宫内膜增生症患者内膜腺上皮细胞Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达的影响。方法收集病理诊断为子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织，经分离、培养、鉴定后，按照随机数字表法将腺上皮细胞分为分为空白对照组... 详细信息

目的观察凋膜止崩液对体外培养人子宫内膜增生症患者内膜腺上皮细胞Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达的影响。方法收集病理诊断为子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织，经分离、培养、鉴定后，按照随机数字表法将腺上皮细胞分为分为空白对照组，凋膜止崩液低、中、高剂量组。空白对照组加入含10%FBS培养液，凋膜止崩液低、中、高剂量组在含10%FBS的细胞培养液中分别加入12.5、25、50 μg/ml的凋膜止崩液。干预后48 h，采用蛋白免疫印迹法及RT-PCR法检测腺上皮细胞Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达。结果与空白对照组比较，凋膜止崩液低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA[（1.51±0.07）、（1.09±0.06）、（0.93±0.07）比（1.92±0.08）]及蛋白[（0.91±0.02）、（0.72±0.03）、（0.62±0.03）比（1.28±0.02）]表达降低（P＜0.05），Bax mRNA[（5.73±0.37）、（8.00±0.23）、（10.72±0.40）比（3.27±0.34）]及蛋白[（0.45±0.02）、（0.63±0.02）、（0.78±0.03）比（0.32±0.02）]表达升高（P＜0.05）。与低剂量组比较，中、高剂量组Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低（P＜0.05），Bax mRNA及蛋白表达明显升高（P＜0.05）。结论凋膜止崩液可增加腺上皮细胞对凋亡的易感性，促进细胞凋亡。

关键词：子宫内膜增生细胞凋亡基因 bcl-2 bcl-2-相关x蛋白凋膜止崩液

凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞中Rb2/p130表达的影响

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陕西中医学院学报 2014年第6期37卷 73-76页

作者：严谨贺丰杰陕西中医学院陕西中医学院附属医院陕西咸阳712046

目的通过体外培养人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞,比较凋膜止崩方靶向干预用药前后细胞中Rb2/p130的表达影响,揭示凋膜止崩方靶向祛除增生子宫内膜的机制。方法对30例子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织进行分离、提取腺上皮细胞,... 详细信息

目的通过体外培养人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞,比较凋膜止崩方靶向干预用药前后细胞中Rb2/p130的表达影响,揭示凋膜止崩方靶向祛除增生子宫内膜的机制。方法对30例子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织进行分离、提取腺上皮细胞,应用细胞免疫荧光法对腺上皮细胞进行鉴定;采用实时定量聚合酶链反应(Realtime PCR)分别检测用药组与空白组细胞中Rb2/p130的表达变化。结果 Rb2/p130基因在用药组(大、中、小剂量)中表达量依次递减,差异有显著性(P膜癌前病变的病理过程,用药剂量与Rb2/p130的表达之间的关系对指导临床治疗有一定意义。

关键词：凋膜止崩液子宫内膜增生症 Rb2/p130 腺上皮细胞

宫腔灌注中药复方凋膜止崩液治疗子宫内膜增生症大鼠的效果及对子宫内膜相关因子表达的影响

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广西医学 2018年第9期40卷 1057-1060页

作者：李楠徐翠贺丰杰谈勇白俊南京中医药大学附属医院生殖科江苏省南京市210046 陕西中医药大学附属医院妇科陕西省咸阳市712000 北京中医药大学东方医院妇科北京市100078

目的探讨宫腔灌注中药复方凋膜止崩液治疗子宫内膜增生症大鼠的效果及对子宫内膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、大剂量组和小剂量组,每组各12只。除空白组外... 详细信息

目的探讨宫腔灌注中药复方凋膜止崩液治疗子宫内膜增生症大鼠的效果及对子宫内膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、大剂量组和小剂量组,每组各12只。除空白组外,其余3组均采用卵巢去势联合雌激素负荷法建立大鼠子宫内膜增生症模型,造模成功后空白组和模型组宫腔灌注生理盐水,大剂量组与小剂量组分别宫腔灌注含生药0.005 g/ml、0.0025 g/ml的凋膜止崩液,3 d后处死动物留取子宫标本,观察大鼠子宫内膜组织学变化,并检测大鼠子宫内膜HIF-1α和VEGF的表达情况。结果镜下观察到各剂量组子宫内膜出现上皮脱失、腺体坏死、血管扩张出血等现象,并有炎细胞的浸润。与空白组比较,模型组与各剂量组大鼠子宫内膜组织中HIF-1α和VEGF表达增高(P膜中HIF-1α和VEGF表达下降(P0.05)。结论宫腔灌注中药复方凋膜止崩液可能通过下调子宫内膜组织HIF-1α和VEGF的表达,从而抑制子宫内膜的持续增生。

关键词：子宫内膜增生症凋膜止崩液宫腔灌注缺氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子鸦胆子莪术大鼠

凋膜止崩方有效部位靶向干预对模型大鼠子宫内膜增生症的形态学影响

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凋膜止崩方有效部位靶向干预对模型大鼠子宫内膜增生症的形态学影...

作者：朱虹丽陕西中医学院

学位级别：硕士

研究目的:观察凋膜止崩方对子宫内膜增生症模型大鼠体重、子宫湿重、子宫指数、子宫内膜厚度、子宫光镜下组织学及电镜下超微结构的影响,从形态学角度探讨凋膜止崩方对子宫内膜增生症的靶向干预效应,明确其量效关系,为临床用药提供理论... 详细信息

研究目的:观察凋膜止崩方对子宫内膜增生症模型大鼠体重、子宫湿重、子宫指数、子宫内膜厚度、子宫光镜下组织学及电镜下超微结构的影响,从形态学角度探讨凋膜止崩方对子宫内膜增生症的靶向干预效应,明确其量效关系,为临床用药提供理论依据。研究方法:将健康成年SD雌性大鼠40只随机分为4组:A组:假手术组、B组:模型组、C组:模型+小剂量组、D组:模型+大剂量组。A组大鼠仅行开关腹手术,B组、C组、D组行开腹手术摘除双侧卵巢。A组术后第三天起肌注高压灭菌花生油0.15ml/100g,隔日一次,共14次后,观察大鼠阴道涂片示动情前期时处死。B组、C组、D组术后第三天起肌肉注射用高压灭菌花生油稀释的苯甲酸雌二醇注射液15ug/100g,隔日一次,共14次,建立大鼠子宫内膜增生症模型。造模成功后B组大鼠每侧宫腔注射生理盐水0.3ml,C组大鼠每侧子宫腔注射小剂量凋膜止崩液0.3ml,D组大鼠每侧子宫注射大剂量凋膜止崩液0.3ml。术后3天处死,取出子宫,称子宫湿重,测子宫指数及子宫内膜厚度,进行组织切片,在光镜下及透射电镜下观察子宫内膜形态。研究结果:1.A组与B、C、D组终末体重、子宫湿重、子宫指数有显著性差异(P﹤0.01)。B、C、D组之间无显著性差异(P﹥0.05)、A组与B组内膜厚度有显著性差异(P﹤0.01),B组明显厚于A组。A组、B组与C组、D组之间内膜厚度有显著性差异(P﹤0.01)。C、D组间内膜厚度无显著性差异(P﹥0.05)。2.子宫内膜组织光镜观察结果:A组:镜下见腺体稀少、散在,腺腔小,直而狭窄,腺上皮细胞单层柱状;B组:腺体增多,腺上皮细胞增生,呈锯齿状,出现假复层现象,腺体弯曲度增加;C组:粘膜上皮大部分坏死脱落,腺体散在,肌层及浆膜层有炎细胞浸润;D组:膜上皮全部坏死脱落,腺体消失,肌层出血水肿、炎细胞浸润明显。3.子宫内膜组织透射电镜下超微结构结果:A组:分泌细胞表面微绒毛清晰,胞浆内可见线粒体、粗面内质网、游离核糖体、高尔基复合体、溶酶体、细胞核。B组:分泌细胞数量明显增多,呈高柱状,胞浆内游离核糖体明显增多、粗面内质网、线粒体、高尔基复合体丰富、溶酶体少、细胞核增大,可见多个核仁、核浆比例升高。C组:未见分泌细胞,平滑肌细胞边界清晰,胞浆内可见线粒体、粗面内质网、偶见脂滴,细胞核形态正常,核仁明显。D组:未见分泌细胞,平滑肌细胞边界清晰,胞浆内可见线粒体、内质网扩张、溶酶体增多,可见多个空泡,细胞核形态正常,核仁明显。研究结论:1.大、小剂量的凋膜止崩液对大鼠子宫内膜均有明显的祛除作用,小剂量祛膜作用满意且对间质及平滑肌细胞无明显影响而应为理想剂量。2.凋膜止崩方是通过腐蚀、杀伤增生细胞的机理使大鼠子宫内膜坏死脱落而发挥祛膜作用。3.凋膜止崩方对大鼠子宫内膜的靶向作用显著,有望成为治疗功能性子宫出血的新药。

关键词：凋膜止崩液子宫内膜增生症形态学大鼠