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乳腺肿瘤冷冻消融治疗的研究进展

介入放射学杂志 2011年第8期20卷 660-664页

作者：叶萍常兆华韩宝三上海理工大学制冷与低温研究所、教育部微创医疗器械工程中心 200093 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科乳腺疾病诊治中心、上海消化外科研究所

随着现代医学科学技术的发展,冷冻消融作为一种新的肿瘤微创技术在国内外发展迅速,日益引起了人们的关注,并有望成为21世纪临床肿瘤治疗的重要手段。本文对乳腺肿瘤冷冻消融技术研究进展进行了综述。

关键词：乳腺肿瘤冷冻消融微创

冷冻消融对前列腺癌细胞转化生长因子-β及smad通路影响的实验研究

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冷冻消融对前列腺癌细胞转化生长因子-β及smad通路影响的实验研究

作者：唐乃玲天津医科大学

学位级别：硕士

研究目的冷冻消融治疗在美国已成为局限期前列腺癌的一线治疗方法之一,转移性前列腺癌的局部治疗目前是一研究热点,备受关注。在冷冻消融治疗过程中,在最大限度消灭肿瘤的同时又要保护正常组织,很难保证所有癌组织都能达到致死温度,而... 详细信息

研究目的冷冻消融治疗在美国已成为局限期前列腺癌的一线治疗方法之一,转移性前列腺癌的局部治疗目前是一研究热点,备受关注。在冷冻消融治疗过程中,在最大限度消灭肿瘤的同时又要保护正常组织,很难保证所有癌组织都能达到致死温度,而是形成亚致死区（sublethal district）。冷冻消融后残存肿瘤细胞及肿瘤微环境与肿瘤的复发、转移密切相关。TGF-β与肿瘤的侵袭、转移、上皮间质转化以及肿瘤免疫等关系密切,我们前期研究发现,冷冻消融后血浆TGF-β发生变化,提示其在前列腺癌微环境中可能发挥一定作用。为此,本研究体外实验模拟冷冻后不同微环境中细胞状态,在细胞水平探讨冷冻对CWR-22RV1前列腺癌细胞系中TGF-β1的释放变化、细胞内TGF-β1及smads蛋白表达水平的影响,并在此基础上进一步探讨TGF-β阻断对冷冻后前列腺癌细胞侵袭、迁移力影响。研究内容TGF-β与肿瘤的侵袭、转移、上皮间质转化以及肿瘤免疫等关系密切,本实验模拟前列腺癌冷冻消融治疗后亚致死细胞对不同微环境的反应,探讨冷冻后亚致死细胞TGF-β的释放变化以及冷冻后瘤体内细胞TGF-β1及下游信号因子如smad2、smad3、smad4蛋白表达水平变化,同时探讨冷冻与TGF-β中和抗体对冷冻后前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响。研究方法在本实验中,将细胞分为A,B,C,D四组。A组为未处理细胞,为对照组细胞。B组为实验组,经-80℃冻融（-80℃环境中冷冻7分钟）处理,模拟亚致死细胞。C组为实验组,未处理前列腺癌细胞培养液中加入坏死液（将前列腺癌细胞悬液放入液氮罐中冷冻4分钟,37℃复温后离心取上清,得到坏死液）。D组为实验组,为亚致死细胞的培养液中加入坏死液。流式细胞术检测细胞凋亡变化,酶联免疫吸附试验测定对照组及实验组细胞培养5小时、10小时、20小时、36小时、48小时上清液中TGF-β1浓度,研究各组TGF-β1的释放变化;采用蛋白质免疫印迹法测定细胞培养10小时四组细胞内TGF-β1、smad2、smad3、smad4蛋白的表达水平,探讨冷冻后TGF-β1、smad2、smad3、smad4蛋白表达水平变化;同时Transwell实验中增加E组（在D组基础上添加TGF-β中和抗体）检测冷冻与TGF-β阻断对前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响。研究结果1.实验组B组细胞凋亡率较对照组A组增加（21.83±1.03 vs 11.2±1.57,P＜0.05）,实验组D组细胞凋亡率较实验组B组增加（29.50±0.52 vs 21.83±1.03,P＜0.05）。2.实验组与对照组细胞上清液中TGF-β1浓度的时间变化趋势大致一致:上清液中TGF-β1浓度从5小时到36小时处于持续上升趋势,36小时达高峰之后下降。细胞释放的TGF-β1浓度实验组D组高于对照组A组,实验组B组低于对照组A组（P＜0.05）。3.细胞培养10小时细胞内TGF-β1、smad2、smad3、smad4蛋白表达水平:实验组D组TGF-β1、smad2、smad3、smad4表达水平高于对照组A组,实验组B组TGF-β1、smad2、smad3、smad4表达水平低于对照组A组。4.Transwell侵袭实验的结果显示A组、B组、C组、D组、E组的穿膜细胞数为:89±1.2 vs 65±2.8 vs 115±4.6 vs 132±3.1 vs 48±4.7,P＜0.05。Transwell迁移实验结果显示A组、B组、C组、D组、E组的穿孔细胞数为100±3.2 vs 60±4.2 vs 126±3.8 vs 158±3.3vs 30±5.1,P＜0.05。侵袭及迁移力实验组D组高于对照组A组。实验组B组侵袭及迁移力低于对照组A组,而实验组E组的侵袭、迁移力最低。结论本实验模拟了前列腺癌冷冻消融治疗后亚致死细胞对不同微环境的反应,细胞培养结果显示:亚致死细胞凋亡率增加,加入坏死液后亚致死细胞凋亡更加明显。加入坏死液后亚致死细胞分泌TGF-β1较对照前列腺癌细胞增多,细胞内TGF-β1、smad2、smad3、smad4蛋白表达水平增高,细胞侵袭迁移能力增强。TGF-β中和抗体可抑制亚致死细胞侵袭、迁移力。

关键词：前列腺癌冷冻消融 TGF-β 侵袭转移

冷冻消融联合TGF-β阻断治疗对前列腺癌小鼠Treg细胞影响的实验研究

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冷冻消融联合TGF-β阻断治疗对前列腺癌小鼠Treg细胞影响的实验研...

作者：杨红彩天津医科大学

学位级别：硕士

目的前列腺癌目前在国内外发病率都不断升高,而且中晚期患者居多,失去外科手术治疗机会,冷冻消融是其重要治疗手段之一。冷冻消融治疗前列腺癌后肿瘤细胞在释放肿瘤抗原刺激机体免疫反应的同时,也会释放TGF-β1,TGF-β信号不但能促进肿... 详细信息

目的前列腺癌目前在国内外发病率都不断升高,而且中晚期患者居多,失去外科手术治疗机会,冷冻消融是其重要治疗手段之一。冷冻消融治疗前列腺癌后肿瘤细胞在释放肿瘤抗原刺激机体免疫反应的同时,也会释放TGF-β1,TGF-β信号不但能促进肿瘤细胞的迁移,还能招募Treg等抑制性免疫细胞,导致免疫耐受的形成,削弱机体抗肿瘤免疫反应。在冷冻消融治疗前列腺癌的同时,如果采用TGF-β中和性抗体阻断其信号通路,机体TGF-β1会如何变化?Treg细胞会如何变化?两者之间是否具有相关性?针对这些问题,本研究构建小鼠前列腺癌模型,冷冻消融联合TGF-β阻断治疗后检测TGF-β1水平和Treg细胞,分析两者的相关性,探讨TGF-β1对Treg细胞的影响及相关机制。对象与方法1.分别采用划痕试验和Transwell试验检测经TGF-β中和性抗体处理的前列腺癌RM-1细胞迁移和侵袭能力的变化。2.构建前列腺癌小鼠模型,把小鼠随机分为四组,分别设A组为对照组、B组为冷冻组、C组为抗体组、D组为联合组。3.分别于治疗前、治疗后7天和14天采集标本,采用酶联免疫吸附试验检测外周血细胞因子TGF-β1和IL-2水平;采用流式细胞术检测Treg、CD4+T和CD8+T细胞的比例;采用非放射性细胞毒性试验(LDH法)检测脾脏中CTL细胞对前列腺癌RM-1细胞的杀伤活性;采用免疫组织化学染色方法检测小鼠肿瘤组织中Treg、CD4+T、CD8+T细胞的浸润情况及肺转移情况;测量各组小鼠肿瘤直径大小变化。4.分析Treg细胞与TGF-β1水平的相关性,探讨TGF-β1对Treg细胞的影响及相关机制。结果1.划痕试验和Transwell试验结果表明TGF-β中和性抗体降低小鼠前列腺癌RM-1细胞的迁移和侵袭能力,说明TGF-β1参与前列腺癌肿瘤细胞的迁移和侵袭过程。2.A组小鼠外周血TGF-β1水平随着肿瘤生长呈升高趋势,治疗后7天、14天与治疗前比较显著升高,具有统计学差异(P<0.05);与A组比较,B组、C组和D组在治疗后7天、14天TGF-β1水平显著降低,具有统计学差异(P<0.05)。A组小鼠外周血IL-2水平随着肿瘤生长呈降低趋势,治疗后14天与治疗前比较显著降低,具有统计学差异(P<0.05);与A组、B组、C组比较,D组在治疗后7天、14天IL-2水平显著升高,具有统计学差异(P<0.05)。3.A组外周血Treg细胞比例随着肿瘤生长呈升高趋势,治疗后14天与治疗前比较显著升高,具有统计学差异(P<0.05);与A组比较,B组和D组在治疗后14天Treg细胞比例显著降低,具有统计学差异(P<0.05),且外周血Treg细胞与TGF-β1水平呈正相关(P<0.001,R=0.931)。A组脾脏Treg细胞比例随着肿瘤生长呈升高趋势,治疗后14天与治疗前比较显著升高,具有统计学差异(P<0.05);与A组比较,B组和D组在治疗后7天和14天Treg细胞比例显著降低,具有统计学差异(P<0.05),且脾脏Treg细胞与TGF-β1水平呈正相关(P<0.001,R=0.889)。A组肿瘤局部浸润Treg细胞随着肿瘤生长呈增加趋势,治疗后14天与治疗前比较显著增加,具有统计学差异(P<0.05);与A对相比,B组和D组在治疗后14天Treg细胞比例显著减少,具有统计学差异(P<0.05),且肿瘤局部浸润Treg细胞与TGF-β1水平呈正相关(P<0.001,R=0.912)。4.A组脾脏CD4+T和CD8+T细胞比例随着肿瘤生长呈下降趋势,治疗后14天与治疗前比较显著降低,具有统计学差异(P<0.05);与A组、B组及C组比较,D组在治疗后7天、14天CD4+T和CD8+T细胞比例显著增加,具有统计学差异(P<0.05),且脾脏CD4+T和CD8+T细胞与TGF-β1水平呈负相关(P<0.001,R=-0.813;P<0.001,R=-0.839)。A组肿瘤局部浸润CD4+T和CD8+T细胞随肿瘤生长呈减少趋势,治疗后14天与治疗前比较显著减少,具有统计学差异(P<0.05);与A组、B组、C组比较,D组在治疗后14天CD4+T和CD8+T细胞比例显著增加,具有统计学差异(P<0.05),且肿瘤局部浸润CD4+T和CD8+T细胞与TGF-β1水平呈负相关(P<0.001,R=-0.852;P<0.001,R=-0.914)5.A组脾脏CTL细胞对RM-1细胞的杀伤活性随着肿瘤生长而呈下降趋势,治疗后14天与治疗前比较显著降低,具有统计学差异(P<0.001);与A组、B组及C组比较,D组在治疗后7天、14天CTL细胞杀伤活性显著增加(P<0.001),且脾脏CTL细胞的杀伤活性与TGF-β1水平呈负相关(效靶比为10:1时P<0.001,R=-0.866;效靶比为20:1时P<0.001,R=-0.875)。6.A组小鼠肺转移率随疾病进展呈逐渐升高趋势,与A组

关键词：前列腺癌冷冻消融 TGF-β Treg 免疫反应

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冷冻消融对心房颤动的疗效与应用价值

中华心血管病杂志 2005年第11期33卷 1054-1055页

作者：孙宝贵上海交通大学附属第一人民医院心内科 200080

射频消融由于创伤小和可根治等优点,已迅速成为治疗心房颤动(房颤)的较成熟技术.但是,由于相关并发症影响了临床效果,亟须寻找其他既有效又安全的替代能源.近来,经导管冷冻消融房颤,既可以有效根治房颤,又可避免射频消融带来的并发症.然... 详细信息

射频消融由于创伤小和可根治等优点,已迅速成为治疗心房颤动(房颤)的较成熟技术.但是,由于相关并发症影响了临床效果,亟须寻找其他既有效又安全的替代能源.近来,经导管冷冻消融房颤,既可以有效根治房颤,又可避免射频消融带来的并发症.然而,就像最初射频消融治疗房颤一样,冷冻消融治疗房颤有很多问题还没解决,争论的焦点之一就是冷冻消融的效果和临床应用价值。

关键词：临床应用价值心房颤动冷冻消融射频消融治疗相关并发症疗效临床效果经导管根治

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冷冻消融希氏束旁旁路的临床观察

中华心血管病杂志 2008年第1期36卷 49-50页

作者：俞坚武屈百鸣车贤达胡雪烈王长华王慧李忠杰洪银维钱琳艳丁亚辉张庆刚浙江省人民医院心内科杭州310014

希氏束旁旁路由于邻近希氏束，解剖位置特殊，消融时容易出现房室传导阻滞。本院自2005年2月至2006年9月采用冷冻消融法治疗5例希氏束旁旁路所致的房室折返性心动过速，报道如下。

关键词：希氏束旁旁路冷冻消融临床观察房室折返性心动过速房室传导阻滞解剖位置消融法

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肿瘤冷冻消融免疫效应研究的进展

介入放射学杂志 2013年第12期22卷 1055-1058页

作者：韩宗宏曹建民史东宏南京军区南京总医院医学影像科 210002

冷冻消融由于其创伤小、疗效佳、并发症少等优点,使其在临床实体肿瘤的治疗中得到广泛的应用。冷冻消融的另一个可能的优势是诱导机体产生抗肿瘤免疫,进而导致远处转移灶及局部残存肿瘤的消退。然而大量的临床及实验研究表明肿瘤冷冻后... 详细信息

冷冻消融由于其创伤小、疗效佳、并发症少等优点,使其在临床实体肿瘤的治疗中得到广泛的应用。冷冻消融的另一个可能的优势是诱导机体产生抗肿瘤免疫,进而导致远处转移灶及局部残存肿瘤的消退。然而大量的临床及实验研究表明肿瘤冷冻后所致的抗肿瘤免疫效应变化很大,且对机体抗肿瘤免疫效应既可以是免疫刺激亦可以是免疫抑制。本文就冷冻免疫存在的形式及可能影响因素作一综述。

关键词：冷冻消融免疫恶性肿瘤

超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融离体猪心的可行性研究

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中华超声影像学杂志 2021年第5期30卷 436-440页

作者：鲁孝楠何金赵家李静左蕾周梦垚胡芮朱晓丽刘丽文空军军医大学第一附属医院(西京医院)超声医学科、空军军医大学第一附属医院(西京医院)肥厚型心肌病国际合作中心、陕西省肥厚型心肌病多学科会诊中心、西京医院肥厚型心肌病多学科诊治与遗传咨询中心西安710032

目的探讨超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融离体猪心的可行性,观察经皮心肌内室间隔射频消融与冷冻消融的效果。方法实验一:将6只离体猪心按照冷冻消融时间分为1 min组、3 min组和5 min组(各2只),均以100%功率进行超声引导下经皮心肌... 详细信息

目的探讨超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融离体猪心的可行性,观察经皮心肌内室间隔射频消融与冷冻消融的效果。方法实验一:将6只离体猪心按照冷冻消融时间分为1 min组、3 min组和5 min组(各2只),均以100%功率进行超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融,冷冻消融结束后测量超声图像、实体解剖的冰球大小及冷冻冰球融化后坏死区大小。实验二:将离体猪心分为冷冻消融组和射频消融组(各3只),分别行超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融和射频消融,冷冻功率100%,射频功率40 W,均消融1 min后,观察比较两种消融方式完全坏死区及不完全坏死区的范围。结果实验一:冷冻消融时间1 min组超声测量冰球短径为(8.00±0.84)mm,实体测量冰球短径为(8.38±1.19)mm,实体测量坏死区短径为(8.35±0.83)mm;3 min组超声测量冰球短径为(19.4±0.28)mm,实体测量冰球短径为(19.03±0.33)mm,实体测量坏死区短径为(19.16±0.25)mm;5 min组超声下测量冰球短径为(26.4±2.54)mm,实体测量冰球短径为(26.01±0.24)mm,实体测量坏死区短径为(24.82±0.25)mm。对上述数据进行随机区组设计的方差分析,区组因素b(冷冻时间1 min、3 min、5 min)差异有统计学意义(F=505.884,P冷冻冰球融化后坏死区测量)组间比较差异无统计学意义(F=0.470,P=0.635)。实验二:射频消融组不完全坏死带占射频消融区半径比例为0.64±0.01,冷冻消融组不完全坏死带占消融区域半径比例为0.26±0.02,两组比较差异有统计学意义(P=0.002),可以认为冷冻消融的不完全坏死区小于射频消融。结论超声引导下经皮心肌内室间隔冷冻消融范围可控,消融区域超声图像评估较为准确,不完全坏死区小,在心脏消融方面可能有潜在应用价值。

关键词： Liwen术式冷冻消融离体猪心氩氦刀

重组人血管内皮抑制素注射液联合冷冻消融治疗肺腺癌A549移植瘤的实验研究

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介入放射学杂志 2014年第3期23卷 241-244页

作者：马春华郭志天津市环湖医院肿瘤介入科天津市脑血管与神经变性重点实验室 300060 天津医科大学附属天津肿瘤医院肿瘤介入治疗科天津市肿瘤防治重点实验室

目的探讨重组人血管内皮抑素注射液(商品名:恩度)联合冷冻消融对肺腺癌A549移植瘤的抑制作用及机制。方法建立肺腺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型24只,待肿瘤最大直径达1 cm时,随机分为对照组、血管内皮抑素组、冷冻消融组和血管内皮抑素联... 详细信息

目的探讨重组人血管内皮抑素注射液(商品名:恩度)联合冷冻消融对肺腺癌A549移植瘤的抑制作用及机制。方法建立肺腺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型24只,待肿瘤最大直径达1 cm时,随机分为对照组、血管内皮抑素组、冷冻消融组和血管内皮抑素联合冷冻消融组(联合治疗组)。治疗后第21天处死裸鼠,取肿瘤组织,测量肿瘤体积,采用末端标记法(TUNEL)原位检测周边冷冻损伤区带细胞凋亡,免疫组化SP法检测肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果治疗后第21天,对照组、血管内皮抑素组、冷冻消融组和联合治疗组的肿瘤生长速率分别为236.68%±51.23%、220.02%±30.61%、159.46%±29.33%和103.34%±25.50%,组间差异有统计学意义(P冷冻消融对肺腺癌A549移植瘤的抑制效果,其机制可能与血管内皮抑素通过下调VEGF表达水平,从而抑制肿瘤新生血管形成,协同冷冻消融促进肿瘤细胞凋亡有关。

关键词：肺腺癌细胞系A549 移植瘤重组人血管内皮抑制素冷冻消融

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肝脏肿瘤冷冻消融治疗的进展

中国介入影像与治疗学 2007年第4期4卷 321-324页

作者：史东宏许健曹建民南京军区南京总医院医学影像科江苏南京210002

自从1850年冷冻外科诞生以来,冷冻治疗设备已取得里程碑式进展。第三代氩氦冷冻系统的研制成功,有效地满足了组织冷冻消融术的监控、快速降到致死温度、缓慢复温、重复的冻-融循环四个方面。在肝脏肿瘤领域单独或联合外科、化疗、介入... 详细信息

自从1850年冷冻外科诞生以来,冷冻治疗设备已取得里程碑式进展。第三代氩氦冷冻系统的研制成功,有效地满足了组织冷冻消融术的监控、快速降到致死温度、缓慢复温、重复的冻-融循环四个方面。在肝脏肿瘤领域单独或联合外科、化疗、介入等综合应用显示了良好的应用前景,但如何合理应用仍需进一步研究。

关键词：冷冻消融氩氦刀肝脏肿瘤冻-融循环