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中华糖尿病杂志 2024年第11期16卷 1231-1239页

作者：陈升黄楠黄䮎束之奕吴晓冬吕颖奇孙金芳苏向辉李玲东南大学附属中大医院内分泌科南京210009 东南大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系南京210009 新疆医科大学第一附属医院昌吉分院内分泌科昌吉831199

目的探讨血清再生蛋白ⅰα(REGⅠα)与糖尿病肾脏病(DKD)患者肾功能进展的相关性。方法为前瞻性队列研究。纳入2022年1月至2023年9月于东南大学附属中大医院内分泌科就诊,估算的肾小球滤过率(eGFR)>15 ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))-1且... 详细信息

目的探讨血清再生蛋白ⅰα(REGⅠα)与糖尿病肾脏病(DKD)患者肾功能进展的相关性。方法为前瞻性队列研究。纳入2022年1月至2023年9月于东南大学附属中大医院内分泌科就诊,估算的肾小球滤过率(eGFR)>15 ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))-1且未接受肾脏替代治疗的DKD患者为研究对象,收集研究对象年龄、性别、糖尿病病程、红细胞计数及血肌酐、血红蛋白、尿白蛋白/肌酐比值(UACR)、血清REGⅠα浓度,并进行规律随访。终点事件为肾功能进展,定义为eGFR斜率≥3 ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))-1/年、新进入终末期肾病(ESRD)、因肾脏或心血管事件死亡。绘制限制性立方样条图分析曲线拐点,根据拐点将患者分为低水平REGⅠα组(血清REGⅠα≤87.39 ng/ml)和高水平REGⅠα组(血清REGⅠα>87.39 ng/ml)。Kaplan-Meier法比较两组患者肾脏累积生存率的差异,Cox回归模型探讨DKD患者肾功能进展相关的影响因素。结果共401例患者纳入最终分析,其中低水平REGⅠα组203例,高水平REGⅠα组198例。与低水平REGⅠα组相比,高水平REGⅠα组DKD患者的血肌酐、UACR均更高,血红蛋白、eGFR均更低(均P<0.050)。中位随访时间为12(7,17)个月,共20.45%(82/401)的DKD患者发生结局事件,其中高水平REGⅠα组占13.22%(53/401),低水平REGⅠα组占7.23%(29/401)。高水平REGⅠα组患者肾脏累积生存率较低(log-rankχ^(2)=8.917,P=0.003)。校正年龄、性别、糖尿病病程、收缩压、红细胞计数、血肌酐及UACR后,高水平REGⅠα仍是DKD患者发生肾功能进展的危险因素(HR=1.372,95%CI 1.005~2.193,P=0.037)。结论血清REGⅠα与DKD肾功能进展相关,是DKD患者肾功能进展的潜在危险因素。

关键词：糖尿病肾病再生蛋白ⅰα 肾功能进展

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REGⅠα时间分辨荧光免疫分析方法的建立及其在胃癌中的临床应用

REGⅠα时间分辨荧光免疫分析方法的建立及其在胃癌中的临床应用

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作者：项忠谊浙江理工大学

学位级别：硕士

研究背景:再生蛋白Iα(Regenerating protein I alpha,REGⅠα)是由人胃粘膜的肠嗜铬样(Enterochromaffin-like,ECL)细胞和主细胞分泌产生的一种胃黏膜细胞生长因子,在胃粘膜细胞的增殖,分化和凋亡中发挥重要作用。越来越多的证据表明RE... 详细信息

研究背景:再生蛋白Iα(Regenerating protein I alpha,REGⅠα)是由人胃粘膜的肠嗜铬样(Enterochromaffin-like,ECL)细胞和主细胞分泌产生的一种胃黏膜细胞生长因子,在胃粘膜细胞的增殖,分化和凋亡中发挥重要作用。越来越多的证据表明REGⅠαm RNA和蛋白在胃癌(Gastric cancer,GC)中高度表达,并与GC患者的浸润特征、血道侵犯、肿瘤分期、分化类型、淋巴结转移和不良预后相关。然而,关于GC患者血清中REGⅠα的研究较少,血清REGⅠα水平与GC患者临床病理特征的相关性尚不清楚。因此,本研究旨在建立一种高灵敏度的时间分辨荧光免疫分析方法(Time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)对人血清REGⅠα水平进行定量分析,从血清学角度研究REGⅠα在GC患者中的临床应用价值。研究方法:本研究使用两株针对抗原分子不同表位的REGⅠα单克隆特异性抗体分别作为捕获抗体和检测抗体,通过将捕获抗体固相化,利用镧系稀土元素铕(Europium,Eu)作为示踪物标记检测抗体,采用双抗体夹心法的反应模式,建立REGⅠα时间分辨荧光免疫分析方法(REGⅠα-TRFIA)用于人血清中REGⅠα水平的定量检测,并对其分析性能进行评价。利用建立的REGⅠα-TRFIA法对148例健康对照组(Healthy controls,HCs)、69例胃部良性疾病(Benign gastric disease,BGD)患者和125例GC患者血清中REGⅠα水平进行定量分析,并结合患者的临床病理特征,分析血清REGⅠα在GC的辅助诊断和预测病情进展中的临床价值。研究结果:***Ⅰα-TRFIA法在最优的反应体系下,定量限为0.94 ng/m L,检测范围为0.94 ng/m L-1000 ng/m L。当样本中的REGⅠα浓度小于10000 ng/m L时,REGⅠα-TRFIA方法不会发生钩状效应。分析内变异系数在2.01%-2.94%之间,分析间变异系数在4.23%-4.77%之间。回收率实验中,实测浓度和理论浓度的比值在90.33%-100.85%之间,在90-110%的可接受范围内。10 mmol/L的甘油三酯、350μmol/L的胆红素和10 g/L的血红蛋白对其性能没有干扰。REGⅠα-TRFIA法与市售酶联免疫分析方法对临床样本的检测结果具有良好的相关性和一致性(ρ=0.985)。***组血清REGⅠα水平为110.64(89.14-141.58)ng/m L,BGD患者的血清REGⅠα水平为133.99(104.26-187.85)ng/m L,GC患者的血清REGⅠα水平为262.28(183.77-387.98)ng/m L。BGD患者的血清REGⅠα水平高于HCs,差异具有统计学意义(P=0.0005)。GC患者的血清REGⅠα水平显著高于HCs和BGD患者,差异具有统计学意义(P0.05)。在病理分化类型呈低分化的GC患者中血清REGⅠα水平高于病理分化类型呈中高分化的GC患者(P=0.0257)。4.通过受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析,REGⅠα、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)和糖类抗原199(Carbohydrate antigen199,CA199)联合检测(曲线下面积[Area under the curve,AUC]值:0.9561,灵敏度:88.00%,特异性:93.24%)对GC的诊断效率明显优于REGⅠα(AUC值:0.9274,灵敏度:84.00%,特异性:88.51%)、CEA(AUC值:0.7282,灵敏度:66.40%,特异性:68.24%)和CA199(AUC值:0.6963,灵敏度:38.40%,特异性:93.24%)单独检测的诊断效率。研究结论:1.本研究成功建立了REGⅠα-TRFIA法,该方法各项性能指标均满足临床检测试剂的要求。2.血清REGⅠα水平在BGD患者中轻微升高,在GC患者中显著升高,这表明血清REGⅠα水平的升高与BGD的发生和GC的进一步发

关键词：再生蛋白ⅰα 时间分辨荧光免疫分析方法胃癌临床病理特征

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