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红景天苷联合亚低温对大鼠脑缺血／再灌注损伤后神经细胞形态与功能的影响

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中国中西医结合急救杂志 2016年第1期23卷 66-70页

作者：杨文博董河刘陕岭蒋丽丽贾彦芳黄辉周赞宫青岛大学附属医院麻醉科山东青岛266003

目的探讨红景天苷联合亚低温对大鼠全脑缺血／再灌注（I／R）损伤后神经细胞形态和功能的影响及其作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠150只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合... 详细信息

目的探讨红景天苷联合亚低温对大鼠全脑缺血／再灌注（I／R）损伤后神经细胞形态和功能的影响及其作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠150只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合亚低温治疗组，每组30只。单纯红景天苷治疗组和红景天苷联合亚低温治疗组制模前7d于同一时间腹腔注射红景天苷10mg·kg-1·d-1，最后一次给药30rain后建立全脑缺血模型；假手术组、模型组、单纯亚低温治疗组制模前7d同一时间腹腔注射等量生理盐水。采用改良Pusinelli四动脉阻断法建立全脑缺血模型，缺血10min后实现再灌注；假手术组仅暴露双侧翼孔及游离颈总动脉，不凝闭椎动脉和夹闭颈总动脉。假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组保持肛温36．5℃；单纯亚低温治疗组和红景天苷联合亚低温治疗组大鼠迅速放入4℃环境使肛温降至32℃并维持2h。再灌注24h后观察各组大鼠神经功能缺损程度评分（NDS）、脑组织含水量及海马区脑组织细胞形态、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量。结果与假手术组比较，模型组NDS、SOD均明显降低[NDS（分）：50．70±1．64比76．70±1．34，SOD（U／mg）：55．14±9．07比122．10±10．16]，脑组织含水量、MDA均明显升高[脑含水量：（87．41±0．83）％比（78．30±0．75）％，MDA（nmol／mg）：5．96±0．28比3．59±0．20，均P〈0．05]。显微镜下观察到模型大鼠海马区细胞排列散乱，大量锥体细胞体积缩小，核固缩、深染及胞质嗜伊红，细胞间隙明显增大，胞质呈空泡样变，正常神经元数量显著减少；3个治疗组海马区细胞变性程度明显减轻。与模型组比较，单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合亚低温治疗组NDS、SOD均明显升高（NDS分别为59．00±1．72、60．40±1．51、66．40±1．51，SOD分别为84．22±8．88、83．58±8．39、104．16±8．81），脑组织含水量、MDA均明显降低[脑组织含水量分别为（84．56±0．42）％、（83．94±0．36）％、（80．78±0．31）％，MDA分别为5．03±0．22、4．99±0．28、4．58±0．25，均P〈0．05]，且以红景天苷联合亚低温治疗组变化程度较单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组更显著[NDS（分）：66．40±1．51比59．00±1．72、60．40±1．51，脑组织含水量：（80．78±0．31）％比（84．56±0．42）％、（83．94±0.36）％，SOD（U／mg）：104．16±8．81比84．22±8．88、83．58±8．39，MDA（nmol／mg）：4．58±0．25比5．03±0．22、4．99±0．28，均P〈0．05]。结论红景天苷和亚低温对大鼠全脑I／R损伤均有保护作用，且二者联合保护作用更佳，其机制可能与抗自由基损伤有关。

关键词：缺血再灌注损伤,脑红景天苷亚低温氧化损伤氧自由基大鼠

浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注后海马内质网应激的影响

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中华医学杂志 2018年第44期98卷 3592-3597页

作者：操良斌桂勤芳陈泳伊李娟周洁洁王强段满林徐建国南京大学医学院附属金陵医院麻醉科 210002 南京梅山医院麻醉科

目的观察浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注（I／R）损伤后海马内质网应激（ERS）的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠60只，8～10周龄，体质量280～320g，采用随机数字表法分为5组（n=12）：假手术组（Sham组）、全脑缺血再灌注组（I／R... 详细信息

目的观察浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注（I／R）损伤后海马内质网应激（ERS）的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠60只，8～10周龄，体质量280～320g，采用随机数字表法分为5组（n=12）：假手术组（Sham组）、全脑缺血再灌注组（I／R组）、硫化氢组（H2S组）、浅低温组（MH组）、硫化氢＋浅低温组（H2S＋MH组）。采用经食管心脏起搏法诱发心跳骤停并行心肺复苏制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。硫氢化钠（NaHS）的给药方案：于自主循环恢复即刻腹腔注射硫氢化钠2．5Mg／kg；浅低温的实施：于自主循环恢复即刻用乙醇擦拭大鼠体表，配合冰袋15min内将直肠温度降至32～34℃，维持6h。于再灌注72h时行神经功能缺陷评分（NDS），处死大鼠后取海马组织，采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、转录因子C／EBP同源蛋白（CHOP）和Caspase-12的表达；于再灌注72h时取海马组织，行HE染色，光镜下观察海马CAl区病理学结果；采用原位DNA末端转移酶法（TUNEL）染色检测海马CA1区细胞凋亡情况，计算细胞凋亡指数（AI）。结果全脑缺血再灌注损伤可诱导内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著增高，提示严重的内质网应激被激活。Sham组、I／R组、H5S组、MH组、H2S＋MH组的GRP78含量分别为0．11±0．03、1．11±0．10、0．67±0．09、0．66±0．08、0．48±0．04，CHOP的含量分别为0．16±0．03、1．60±0．11、1．39±0．09、1．34±0．08、1．13±0．09，Caspase-12的含量分别为0．09±0．02、0．87±0．08、0．65±0．08、0．59±0．06、0．45±0．06，差异均具有统计学意义（F=147．569、264．983、119．356，均P〈0．01）。Sham组、I／R组、H2S组、MH组、H2S＋MH组的细胞凋亡指数分别为（1．83±0．75）％、（53．17±4．62）％、（35．17±2．14）％、（32．67±2．25）％、（17．83±2．79）％，差异有统计学意义（F=284．962，P〈0．01）。Sham组、I／R组、H2S组、MH组、H2S＋MH组的神经功能缺陷评分分别为0％、（76±9）％、（54±5）％、（47±6）％、（35±6）％，差异有统计学意义（F=135．218，P〈0．01）。结论浅低温联合硫化氢减轻全脑缺血再灌注后海马内质网应激，联合效果优于单独应用。

关键词：浅低温硫化氢再灌注损伤,脑内质网应激

大鼠脑缺血/再灌注后血清S100β蛋白对脑损伤的诊断价值

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实用医技杂志 2016年第3期23卷 238-240页

作者：宋健楠孙义张析哲马淑敏张明莉胡古月内蒙古自治区赤峰市医院 024000

目的观察脑缺血/再灌注后大鼠血清S100β蛋白的水平,确立脑缺血再灌注后具有早期诊断价值的生化指标。方法 16只SD雄性大鼠随机分为2组:假手术组(S组)和缺血/再灌注组(I/R组),每组8只。采用双侧颈总动脉夹闭+基底动脉丝线提拉法制备全... 详细信息

目的观察脑缺血/再灌注后大鼠血清S100β蛋白的水平,确立脑缺血再灌注后具有早期诊断价值的生化指标。方法 16只SD雄性大鼠随机分为2组:假手术组(S组)和缺血/再灌注组(I/R组),每组8只。采用双侧颈总动脉夹闭+基底动脉丝线提拉法制备全脑缺血/再灌注损伤模型,全脑缺血10 min,再灌注6 h。实验中监测大鼠脑血流图并测定动脉血气。实验结束后测定大鼠血清S100β蛋白浓度;用干(110℃,24 h烘干)、湿质量法计算左侧大脑半球脑水含量;电镜下观察皮质神经元线粒体的超微结构。结果与S组比较,I/R组S100β蛋白浓度、脑含水量升高(P损伤明显。结论脑缺血/再灌注损伤后S100β蛋白的表达明显升高,血清S100β蛋白可作为评价脑缺血/再灌注后脑损伤具有早期诊断价值的指标。

关键词：再灌注损伤,脑 S100蛋白质类

局部亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的影响

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河北医药 2010年第17期32卷 2330-2332页

作者：马淑敏薄立军吴文浩董振明王娟张析哲孙义周琪内蒙古自治区赤峰市医院麻醉科 024000 河北医科大学第二医院麻醉科首都钢铁医院麻醉科

目的探讨局部亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、亚低温组(H组),每组8只。采用双侧颈总动脉夹闭+基底动脉丝线提拉法制备全脑缺血再灌注损伤模型,... 详细信息

目的探讨局部亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为3组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、亚低温组(H组),每组8只。采用双侧颈总动脉夹闭+基底动脉丝线提拉法制备全脑缺血再灌注损伤模型,全脑缺血10min再灌注6h。实验过程中监测大鼠脑血流图并测定动脉血气。H组再灌注前即刻经股静脉缓慢注射10℃0.9%氯化钠溶液3.5ml,冰块包绕头部,60W白炽灯照射身体。控制鼓膜温度在32～34℃,直肠温度同时降低,20min左右升至并维持在37.5～38.3℃。低温维持3h,3h后60W白炽灯照射身体缓慢复温。实验结束后测定大鼠血清S100B蛋白浓度;用干(110℃24h烘干)、湿重法计算左侧大脑半球脑水含量。结果与S组比较,IR组S100B蛋白浓度、脑含水量升高(P脑含水量降低(P脑缺血再灌注后血清S100B蛋白的表达量,对全脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。

关键词：再灌注损伤,脑低温 S100B蛋白