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去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化

中国组织工程研究与临床康复 2007年第23期11卷 4580-4582页

作者：崔彬刘迎龙于存涛谢宁宋来凤中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院心血管外科北京市100037 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院病理科北京市100037

目的:初步构建受体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,减轻移植后免疫排斥反应,并探讨内皮细胞适宜的种植方法,增强内皮细胞与细胞外基质的黏附性。方法:实验于2004-06在阜外医院心血管外科先心病研究室完成。①实验材料:取冠状动脉搭... 详细信息

目的:初步构建受体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,减轻移植后免疫排斥反应,并探讨内皮细胞适宜的种植方法,增强内皮细胞与细胞外基质的黏附性。方法:实验于2004-06在阜外医院心血管外科先心病研究室完成。①实验材料:取冠状动脉搭桥患者术中剩余的大隐静脉(该材料是术中多余弃掉部分,患者知情同意),研究方案获伦理委员会批准。②实验方法:采用低渗液-去污剂(10g/L去氧胆酸)-核酸酶法去除同种心脏瓣膜组织中的全部细胞成分,构建去细胞的同种心脏瓣膜;取培养3～4代的成人大隐静脉内皮细胞,依照内皮细胞密度分为生理密度种植组:以1.5×108L-1密度种植;超生理密度种植组:以(4～5)×108L-1密度种植;生理密度反复种植组:以1.5×108L-1密度,反复种植3d。③实验评估:种植于脱去全部细胞的同种心脏瓣膜上,静态培养5d,扫描电镜观察内皮细胞的覆盖情况。结果:去细胞同种心脏瓣膜的细胞外基质有着良好的细胞黏附性;3种不同的内皮细胞种植密度,其中以内皮细胞超密度(4～5)×108L-1种植,静态培养5d,同种组织瓣膜表面基本覆盖单层内皮细胞,细胞间相互延伸汇合,形态结构良好。以生理密度种植内皮细胞覆盖率较低,细胞大多孤立存在,细胞间较少相互延伸汇合。生理密度反复种植3d,内皮细胞覆盖率低于超生理密度种植组,细胞间可见相互延伸汇合,细胞形态结构良好。结论:去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化保留了同种心脏瓣膜的正常结构、功能及良好的组织相容性,有望延长瓣膜的使用寿命,取得更好的临床疗效。

关键词：组织工程同种心脏瓣膜内皮细胞化组织构建

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左心辅助泵内皮细胞化的实验研究

暨南大学学报（自然科学与医学版） 1997年第5期18卷 99-104页

作者：周序珑邓漪平暨南大学医学院病理解剖学教研室中山医科大学组织胚胎学教研室

培养了猪主动脉血管内皮细胞，用预衬细胞外基质结合使用ｂＦＧＦ的方法实现静置条件下ＰＵ材料的内皮细胞化，并观察内皮化材料在ＬＶＡＰ泵腔内模拟流体条件下内皮细胞的贴壁率和丢失率以及细胞形态变化．结果显示：用预衬基质结合使... 详细信息

培养了猪主动脉血管内皮细胞，用预衬细胞外基质结合使用ｂＦＧＦ的方法实现静置条件下ＰＵ材料的内皮细胞化，并观察内皮化材料在ＬＶＡＰ泵腔内模拟流体条件下内皮细胞的贴壁率和丢失率以及细胞形态变化．结果显示：用预衬基质结合使用ｂＦＧＦ的方法，静置条件下可以实现ＰＵ材料内皮化，镜下观察细胞形态良好．在ＬＶＡＰ泵腔内模拟流体条件下冲击１和２ｈ后，细胞贴壁率分别为７４．４２％和５９．７０％，丢失率分别为２５．５８％和４０．３０％，扫描电镜观察，可见细胞总的形态变化不明显，轻度收缩。

关键词：左心辅助泵内皮细胞化细胞外基质

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灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化

中国组织工程研究 2020年第28期24卷 4562-4566页

作者：刘飞张冠鑫刘晓红王立成徐志云新乡医学院河南省新乡市453000 长海医院上海市200000 郑州市第七人民医院河南省郑州市450000

背景:组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。目的:观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法:将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素... 详细信息

背景:组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。目的:观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法:将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素(青霉素/链霉素/两性霉素B溶液)的PBS、氯己定及体积分数75%乙醇进行灭菌处理。采用LB固体培养基评价4种方法的杀菌效果;采用VB染色评估4组处理对牛心包组织结构的影响;通过CCK-8实验测定4种处理抽提液的细胞毒性。将体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包制作为脱细胞支架,与人脐静脉内皮细胞共培养,观察细胞的黏附与内皮化效果。结果与结论:①体积分数75%乙醇和氯己定处理24 h的牛心包满足完全灭菌的要求,1%抗生素处理组和对照组可见明显菌落形成;②VB染色显示,体积分数75%乙醇、氯己定和1%抗生素处理的牛心包胶原纤维呈波浪状排列整齐,结构紧凑,弹性纤维含量较少但结构清晰;③体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包不影响L929细胞的增殖活性,培养1-3 d内的细胞存活率均在100%以上;氯己定灭菌处理的牛心包有很强的细胞毒性,导致细胞死亡;④人脐静脉内皮细胞可在脱细胞支架表面正常生长与黏附;在20 d的种植期内,第8-12天脱细胞支架表面黏附的细胞最多;⑤结果说明,体积分数75%乙醇能够有效消灭附着在牛心包上的所有微生物,不会影响牛心包的组织学完整性与生物相容性。

关键词：牛心包灭菌 75%乙醇脱细胞支架组织工程内皮细胞化生物相容性细胞黏附

bFGF促进内皮细胞在聚氨酯材料上黏附的机理探讨

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生物医学工程学杂志 2002年第3期19卷 386-388页

作者：周序珑邓漪平谢隆初暨南大学医学院病理教研室广州510632 中山医科大学组胚教研室广州510089 暨南大学水生生物研究所广州510632

b FGF能够促进内皮细胞在人工聚氨酯材料上的黏附 ,但其分子机制尚不清楚。本文采用 Western Blot结合图像处理分析方法 ,观察了 b FGF对血管内皮细胞 β1整合素表达的影响 ,结果显示 b FGF处理组和对照组平均灰度值分别为 16 6 .11± 9... 详细信息

b FGF能够促进内皮细胞在人工聚氨酯材料上的黏附 ,但其分子机制尚不清楚。本文采用 Western Blot结合图像处理分析方法 ,观察了 b FGF对血管内皮细胞 β1整合素表达的影响 ,结果显示 b FGF处理组和对照组平均灰度值分别为 16 6 .11± 9.86和 175 .32± 5 .12 ,两组免疫酶显色有明显差异 ,表明 b FGF能够诱导内皮细胞膜表面 β1整合素合成增加。我们推测 b FGF通过上调内皮细胞 β1整合素表达 ,增强了内皮细胞在聚氨酯材料上的黏附。本文提示 b FGF是实现人工心。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子聚氨酯整合素内皮细胞化细胞粘附人工心人工血管

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激光心脏瓣膜成形+内皮细胞种植的离体研究

激光心脏瓣膜成形+内皮细胞种植的离体研究

作者：王韧福建医科大学

学位级别：硕士

目的：风湿性心脏瓣膜病是常见的心脏疾病之一，目前对风湿性心脏瓣膜病的治疗手段主要是瓣膜置换，包括机械瓣膜置换和生物瓣膜置换。但它们同时有一些难以避免的缺点，如生物瓣的衰退、机械瓣的术后终生抗凝、抗凝不当导致的出血及... 详细信息

目的：风湿性心脏瓣膜病是常见的心脏疾病之一，目前对风湿性心脏瓣膜病的治疗手段主要是瓣膜置换，包括机械瓣膜置换和生物瓣膜置换。但它们同时有一些难以避免的缺点，如生物瓣的衰退、机械瓣的术后终生抗凝、抗凝不当导致的出血及血栓形成等并发症。因此目前主张对于通过成形手术能恢复功能的瓣膜应尽力保留。我们此研究就是探索一种新的瓣膜成形方法：用激光对病变心脏瓣膜进行成形，然后在成形后的心脏瓣膜表面种植内皮细胞，以促进心脏瓣膜的正常修复。材料及方法： (一)、材料： 1、细胞培养设备 2、Nd：YAP激光 3、扫描电镜及透射电镜 4、体外循环装置 5、心脏瓣膜(术中取自风湿心脏瓣膜病患者) (二)、方法：内皮细胞取自新生儿脐静脉，用0.25％胰酶灌入脐静脉内，室温下消化10min，用胎牛血清中和胰酶，然后将消化液离心，分离出内皮细胞，放入80％M199培养液+20％胎牛血激光瓣膜成形＋内皮细胞种植的离体研究2清的培养液中，置入 37“C、5肌。恒温培养箱中培养。每日在倒置光显微镜下观察细胞的生长情况，待内皮细胞在培养板上铺满单层后，即进行传代。用第二代细胞进行种植。在严格无菌条件下用Nd：叩P 激光对瓣膜进行成形，去除瓣膜表面的钙化灶及增厚部分，用扫描电镜对成形后的瓣膜进行观察。将瓣膜剪成适当大小放入24 孔培养板中，将内皮细胞种在瓣膜表面。共分4 组，每组两孔瓣膜孔，一孔对照孔，分别于培养的2、4、6、8 天取出，用扫描电镜观察瓣膜表面内皮细胞的生长情况。将培养6、8 天的瓣膜放在体外循环装置中，用循环血流冲击4 小时，然后取出瓣膜，用扫描电镜观察瓣膜表面内皮细胞的粘附情况。结果：扫描电镜下观察：内皮细胞种植瓣膜2天后，瓣膜表面约 2 0刁 0％的部分被内皮细胞覆盖;4 天后达 5 0刁 0见 6、8天可见内皮细胞基本在瓣膜表面形成单层。经血流冲击后，仍可见 3 0叫 0％的内皮细胞粘附在瓣膜表面。综上所述，激光瓣膜成形后，瓣膜表面种植内皮细胞以促进瓣膜修复，是一种可行的瓣膜成形方法。

关键词：激光心脏瓣膜成形内皮细胞化

小口径微孔聚氨酯人工血管的动物体内植入研究

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中国生物医学工程学报 2008年第3期27卷 451-456页

作者：潘仕荣李松奇唐兴奎郑欢玲易武陶军中山大学附属第一医院广州510080

将内径4mm的聚氨酯微孔人工血管植入Beagle狗体内,置换一段腹主动脉,研究血管内腔的内皮细胞化过程。该小口径血管具有以下特点:内腔偶联水蛭素以增加抗血栓性;顺应性接近天然血管;血管内表面孔径为40μm,并且管壁的孔径由内到外呈梯度... 详细信息

将内径4mm的聚氨酯微孔人工血管植入Beagle狗体内,置换一段腹主动脉,研究血管内腔的内皮细胞化过程。该小口径血管具有以下特点:内腔偶联水蛭素以增加抗血栓性;顺应性接近天然血管;血管内表面孔径为40μm,并且管壁的孔径由内到外呈梯度增大。植入初始,人工血管内腔先吸附血浆纤维蛋白。14d见有少量梭形内皮样细胞生成。41d后形成完整内膜,由表面的内皮细胞单层和其下的平滑肌细胞组成。90d后生成稳定的内膜,平均厚度223μm。偶联水蛭素组和无偶联水蛭素组的通畅率分别为88.9%和75.0%。结果表明,改善抗血栓性、顺应性和微观结构可提高小口径人工血管的性能,有效促进内腔自然内皮细胞化,显著提高长期通畅率。

关键词：小口径人工血管水蛭素顺应性超微结构内皮细胞化

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医用聚氨酯生物相容性研究新进展

生物医学工程学杂志 2002年第2期19卷 315-319页

作者：李洁华谢兴益何成生樊翠蓉钟银屏四川大学高分子材料科学与工程系成都610065

聚氨酯因有良好的生物相容性和机械性能 ,而被广泛用于生物医学领域。但聚氨酯长期植入人体内 ,也会引起机体的炎症反应 ,使材料发生老化降解现象。因而要进一步提高医用聚氨酯的生物相容性 ,使其与机体生理环境更加相容 ,不诱发或少诱... 详细信息

聚氨酯因有良好的生物相容性和机械性能 ,而被广泛用于生物医学领域。但聚氨酯长期植入人体内 ,也会引起机体的炎症反应 ,使材料发生老化降解现象。因而要进一步提高医用聚氨酯的生物相容性 ,使其与机体生理环境更加相容 ,不诱发或少诱发炎症反应 ,就要使材料表面更加生物化 ,可以维持蛋白的正常构象。本文综述了以仿生化为基础提高医用聚氨酯材料生物相容性的两种主要途径——表面内皮细胞化及仿生物膜结构 (表面磷脂化 ) 。

关键词：医用聚氨酯生物相容性内皮细胞化表面磷脂化

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细胞外基质对内皮细胞粘附功能的影响及意义

蚌埠医学院学报 1998年第1期23卷 1-3页

作者：周序珑邓漪平暨南大学医学院病理学教研室中山医科大学组织胚胎学教研室

目的：促进内皮细胞在聚氨酯材料上粘附，为实现人工心血管内皮细胞化摸索条件和方法。方法：用荧光法观察细胞外基质成分对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响。结果：用胶原Ⅰ、胶原Ⅳ、纤维粘连蛋白（ＦＮ）、玻璃粘连蛋白（ＶＮ）等... 详细信息

目的：促进内皮细胞在聚氨酯材料上粘附，为实现人工心血管内皮细胞化摸索条件和方法。方法：用荧光法观察细胞外基质成分对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响。结果：用胶原Ⅰ、胶原Ⅳ、纤维粘连蛋白（ＦＮ）、玻璃粘连蛋白（ＶＮ）等细胞外基质成分及对照组牛血清白蛋白（ＢＳＡ）分别预衬聚氨酯材料，在５０ｍｇ／Ｌ浓度组，内皮细胞与材料接触１５ｍｉｎ后，粘附率分别为３２．３１％、５４．４３％、４２．３４％、６３．７７％和２７．７３％。与对照组相比，几种细胞外基质成分对内皮细胞都有明显的促粘附作用（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。其中，ＶＮ的促粘附作用最好，胶原Ⅳ和ＦＮ的促粘附作用也较好；而胶原Ⅰ的促粘附作用较弱。结论：使用ＶＮ或联合使用ＶＮ和其他细胞外基质成分预衬聚氨酯材料。

关键词：细胞外基质聚氨酯内皮细胞化粘附功能

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其他

中国医学文摘（外科学） 2007年第5期26卷 446-449页

难治性颞叶癫痫患者海马与致病大鼠海马病理学的比较研究；自体硬脑膜、耳脑胶重建上矢状窦的实验病理学特征；伽玛刀照射培养大鼠海马神经元的放射生物学作用；犬内皮细胞化动脉支架的建立及体外测试；

关键词：病理学特征大鼠海马生物学作用海马神经元伽玛刀照射内皮细胞化癫痫患者上矢状窦