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苏州大学学报（医学版） 2011年第3期31卷 367-370页

作者：赵爱琴朱云霞孙茂民贾俊霞夏春林苏州大学医学部解剖学系暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的研究星形胶质细胞划痕损伤后内皮性脂酶(EL)的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养、纯化星形胶质细胞,对其进行划痕损伤,取损伤后不同时间点0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及正常对照,用Western blot和免疫组化标... 详细信息

目的研究星形胶质细胞划痕损伤后内皮性脂酶(EL)的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养、纯化星形胶质细胞,对其进行划痕损伤,取损伤后不同时间点0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及正常对照,用Western blot和免疫组化标记检测EL的表达变化及其与凋亡促进因子caspase-3的关系。结果与正常对照组比较,胶质细胞在损伤后6 h EL的表达增高十分明显(P性损伤后1 h出现caspase-3表达增高,随后出现EL表达增高,提示星形胶质细胞于损伤后早期即出现凋亡现象,EL在中枢神经系统损伤后修复与再生过程中起重要作用。

关键词：星形胶质细胞内皮性脂酶损伤修复 caspase-3

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炎症缺血缺氧损伤对体外培养的大脑皮层星形胶质细胞中内皮性脂酶表达的影响

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神经解剖学杂志 2014年第3期30卷 363-366页

作者：谢元辉黄益素喻依川段绍坤重庆医科大学附属永川医院急诊科永川402160

目的:研究星形胶质细胞在炎症状态下缺血损伤对内皮性脂酶(endothelial lipase,EL)表达及活性的影响。方法:实验分为正常对照组、单纯损伤组和炎症损伤组。取新生大鼠脑皮质,体外分离培养纯化星形胶质细胞;单纯损伤组为对星形胶质细胞... 详细信息

目的:研究星形胶质细胞在炎症状态下缺血损伤对内皮性脂酶(endothelial lipase,EL)表达及活性的影响。方法:实验分为正常对照组、单纯损伤组和炎症损伤组。取新生大鼠脑皮质,体外分离培养纯化星形胶质细胞;单纯损伤组为对星形胶质细胞进行缺血缺氧损伤,炎症损伤组为白细胞共培养下的星形胶质细胞进行缺血缺氧损伤;两组损伤后分别在0,1,3,6,12,24,48 h不同时间点用逆转录PCR、实时荧光定量PCR和Western Blot检测EL的表达变化。结果:缺血损伤的星形胶质细胞中EL的表达比正常对照组偏高,并随着损伤时间的延长逐渐增高,在损伤后6 h和12 h达到峰值、随后下降。当加入炎症细胞后,炎症反应进一步促进EL在缺血缺氧损伤星形胶质细胞中的表达增加。结论:缺血缺氧损伤所介导的星形胶质细胞内EL的表达变化以及对该过程的促进作用可能直接影响到星形胶质细胞脂质的再利用,对损伤神经元的修复有极其重要的参考价值和临床意义。

关键词：星形胶质细胞内皮性脂酶缺血缺氧损伤白细胞细胞培养大鼠

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中枢神经系统损伤对内皮性脂酶表达影响的体内外研究

中枢神经系统损伤对内皮性脂酶表达影响的体内外研究

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作者：赵爱琴苏州大学

学位级别：硕士

中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤后轴突再生困难,一直是临床神经疾病治疗的难点,长期以来,人们通过各种途径寻找其原因并试图攻克这一难关。近年来的研究表明,CNS受损后轴突不能再生可能有以下几个方面的原因:成年神经元... 详细信息

中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤后轴突再生困难,一直是临床神经疾病治疗的难点,长期以来,人们通过各种途径寻找其原因并试图攻克这一难关。近年来的研究表明,CNS受损后轴突不能再生可能有以下几个方面的原因:成年神经元损伤后本身的再生能力下降;胶质瘢痕的形成;神经营养因子的缺乏及轴突再生抑制蛋白的作用等。对于CNS损伤后功能的修复,目前尚无有效方法,主要是依靠其自身的修复能力,临床治疗只是一些辅助措施,但效果均不尽如人意。内皮性脂酶是近年来发现的甘油三酯脂酶基因家族的新成员。1999年,Hirata从人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)中分离出一种新的cDNA片段,这种片段似乎是编码一种类似脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)的新基因。同年,Jaye等从氧化型低密度脂蛋白(oxidation oflow density lipoprotein,ox-LDL)刺激下的THP-1(从一位女性急性单核细胞白血病患者获得的人单核细胞系)细胞中提取mRNA,然后以其为模板合成cDNA并对其进行分析,发现一种新的基因。这种基因核苷酸序列与LPL有44%相同,与肝脂酶(hepatic lipase,HL)有41%的相同,与胰脂酶(pancreas lipase,PE)有31%的基因序列相同。这些发现均强烈提示这种新的cDNA编码的产物与LPL、HL和PL来源于一个共同的脂酶祖先基因,因此被确定为甘油三酯脂酶基因家族的新成员,并命名为内皮性脂酶(endothelial lipase,EL),相应的基因依照这个基因家族的基因命名法被命名为LIPG。目前,国外有关的研究正在进行,尚有许多需要解决的问题,国内未见相关研究报道。那么,与LPL、PL同源的内皮性脂酶具有什么作用?目的建立CNS体内、外损伤模型,检测CNS损伤后内皮性脂酶表达水平的变化情况,以探究内皮性脂酶在CNS损伤后轴突再生与修复中的作用。方法取新生SD大鼠(P0-P3)脑皮质,进行混合胶质细胞的原代培养,根据各种胶质细胞黏附性及生长时间的差异,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的星形胶质细胞,对其进行机械性损伤,收集损伤后不同时间点(0H、1H、3H、6H、12H、24H、48H)及正常星形胶质细胞;雄性成年SD大鼠,参照Tuszynski的方法行制各脊髓半横断损伤模型,取损伤后不同时间点(12H、1天、3天、5天、1周、2周、4周)、假手术组(Cont)及正常(N)的脊髓组织;免疫组织化学标记和western blot检测CNS损伤后内皮性脂酶和凋亡促进因子caspase-3的表达水平。结果星形胶质细胞在机械性损伤后内皮性脂酶的表达增高,于6H处达到峰值,与正常组相比差异具有显着性(P＜0.01),随后表达渐趋下降;caspase-3在损伤后1H出现表达增高并达峰值,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.01),其后表达水平虽然有所下降,但至损伤后48H仍处于高表达水平。脊髓半横断损伤后内皮性脂酶于3天开始增高,第5天达高峰,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.01),随后表达渐趋下降;caspase-3于损伤后12H表达增加,1天达到高峰,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.01),随后表达下降渐趋正常水平。结论脊髓损伤及星形胶质细胞机械性损伤后均较早地出现凋亡现象;内皮性脂酶在中枢神经系统损伤后轴突再生与修复过程中可能起重要作用。

关键词：星形胶质细胞内皮性脂酶中枢神经系统损伤再生修复 caspase-3 细胞凋亡

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