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甘蔗内生酵母菌的分离鉴定及发酵性能

食品研究与开发 2023年第1期44卷 159-166页

作者：徐易洁张红玉解修超邓大红魏嘉毅舒颗陕西理工大学生物科学与工程学院陕西汉中723000 陕西省食药用菌工程技术研究中心陕西汉中723000

为研究甘蔗内生酵母菌的种类并筛选出发酵性能良好的酵母菌株,该文采用组织分离法对甘蔗中的内生酵母菌进行分离,通过形态学、生理生化以及26S rDNA D1/D2区序列分析法进行鉴定。利用杜氏管发酵法初筛产气性能较好的菌株,确定筛选菌株... 详细信息

为研究甘蔗内生酵母菌的种类并筛选出发酵性能良好的酵母菌株,该文采用组织分离法对甘蔗中的内生酵母菌进行分离,通过形态学、生理生化以及26S rDNA D1/D2区序列分析法进行鉴定。利用杜氏管发酵法初筛产气性能较好的菌株,确定筛选菌株的最适生长条件,然后采用摇瓶发酵法对其进行耐糖、耐盐以及耐酒精等耐受性试验,复筛出发酵性能优良的菌株。结果表明,从甘蔗中共分离得到内生酵母菌63株,鉴定为8种:葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guiliermondii)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、嗜油假丝酵母(Candida oleophila)、类筒假丝酵母(Candida zeylanoides)、异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)、Cystobasidium minutum以及Papiliotrema terrestris。从63株酵母菌中,筛选一株生长性能和发酵性能优良的菌株J-6,在温度26℃、pH5.0的条件下,24 h时生长速率达到最大值,其最大值为1.993,J-6菌株可耐受体积分数20%乙醇、140 g/L氯化钠和300 g/L葡萄糖。在乙醇体积分数为16%、氯化钠60 g/L和葡萄糖150 g/L条件下,其OD600 nm值最大,分别为1.935、1.608和1.901,经鉴定为异常威克汉姆酵母。

关键词：甘蔗内生酵母菌分离鉴定产气性能生长性能发酵性能

ARTP诱变筛选增香、高产酒精的富硒酵母菌

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食品工业科技 2024年

作者：王国琴任怡卓张捷马献郑蕊苏建宇余君伟岳思君宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏中宁枸杞产业创新研究院有限公司

为了得到产酒精和产香能力较强的枸杞内生富硒酵母菌，进而促进富硒发酵产品的开发和风味的提升，本研究以实验室保藏的枸杞内生酵母菌为实验材料，通过耐硒法和红硒法初筛得到富硒能力较强的酵母菌，采用常压室温等离子体（Atmospheric... 详细信息

为了得到产酒精和产香能力较强的枸杞内生富硒酵母菌，进而促进富硒发酵产品的开发和风味的提升，本研究以实验室保藏的枸杞内生酵母菌为实验材料，通过耐硒法和红硒法初筛得到富硒能力较强的酵母菌，采用常压室温等离子体（Atmospheric room temperature plasma，ARTP）诱变技术，经TTC培养基、杜氏小管发酵法、产酒精、产酯产酸、耐受性等实验筛选出增香和高产酒精的目标菌株，并用氢化物发生原子荧光光谱法测定酵母胞内和发酵液中硒含量。结果表明，富硒初筛得到了M1酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和M16葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae），经ARTP诱变分别筛选出产酒精能力较高的S. cerevisiae诱变菌株M1-5和产香能力较高的C. lusitaniae诱变菌株M16-28，M1-5的产酒精能力比M1提高了38.07%，M16-28的产酯能力比M16提升了107.62%，遗传稳定性均良好。经测定M1-5菌株胞内和发酵液中的硒含量分别为204.8和1158 μg/L，M16-28胞内和发酵液中的硒含量分别为666.45和1830 μg/L，因此，菌株M16-28比M1-5的富硒能力强，且发酵液硒含量极显著高于酵母细胞硒含量（P＜0.001）。本研究筛选出诱变菌株M1-5产酒精和M16-28产香能力强的富硒酵母，具有优良的发酵特性，在发酵食品和富硒功能性产品的挖掘和开发方面具有潜在的应用前景。

关键词：枸杞内生酵母菌富硒常压室温等离子体诱变高产酒精产香发酵特性

不同品种糯红高粱花期内生酵母菌群多样性分析

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中国酿造 2024年第4期43卷 158-165页

作者：刘雯雯陈露胡连清冯瑞章魏琴周万海向秋瑾黄思琪宜宾学院四川省油樟工程技术研究中心四川宜宾644007 宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644007

采用Illumina MiSeq高通量测序技术对花期糯红高粱不同品种及不同器官的内生酵母菌群多样性进行分析,并采用线性判别分析效应值(LEfSe)及FUNGuild分析样品间的差异菌和功能菌。结果表明,共注释到8门182属。地方种青壳洋内生酵母菌的群... 详细信息

采用Illumina MiSeq高通量测序技术对花期糯红高粱不同品种及不同器官的内生酵母菌群多样性进行分析,并采用线性判别分析效应值(LEfSe)及FUNGuild分析样品间的差异菌和功能菌。结果表明,共注释到8门182属。地方种青壳洋内生酵母菌的群落多样性和丰富度均高于杂交种金糯粱1号,叶部丰富度最高。不同品种及茎叶的优势菌门均为子囊菌门(Ascomycota),花和根部的优势菌门分别为担子菌门(Basidiomycota)、未知真菌门(unclassified fungi);在属水平上,金糯粱1号和青壳洋优势菌属分别为刺盾炱目未分类菌属(unclassified Chaetothyriales)和未知真菌属,根、茎、叶和花部的优势菌属分别为未知真菌属、枝氯霉属(Ramichloridium)、刺盾炱目未分类菌属和Didymium。LEfSe分析显示,青壳洋中最重要的差异指示属为Papiliotrema;根、茎、叶和花部最重要的差异指示属分别为镰刀菌属(Fusarium)、枝氯霉属、Alatosessilispora和Pseudozyma。FUNGuild功能预测显示,糯红高粱内生酵母菌群功能丰富,可分为7种营养模式和24个生态功能群,且青壳洋和叶部独有功能菌数最多。

关键词：糯红高粱花期品种器官高通量测序内生酵母菌多样性

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一株分离自胡杨树杆液的内生酵母菌初步鉴定

新疆农业科学 2012年第8期49卷 1483-1488页

作者：祖母拉提.阿布都热依木程刚布阿依夏姆.阿木提努力曼姑.司马义热孜亚.艾肯木合塔尔.阿布都克里木艾尔肯.热合曼新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046

【目的】依据形态学、生理生化和26S rDNA D1/D2区序列特征,确定一株胡杨内生酵母菌的分类学地位。【方法】通过平板划线分离法分离纯化胡杨树干部内存液样品中的内生酵母菌;检测分离菌株形态学特征和生理生化特征,进一步对酵母菌株的26... 详细信息

【目的】依据形态学、生理生化和26S rDNA D1/D2区序列特征,确定一株胡杨内生酵母菌的分类学地位。【方法】通过平板划线分离法分离纯化胡杨树干部内存液样品中的内生酵母菌;检测分离菌株形态学特征和生理生化特征,进一步对酵母菌株的26S rDNA D1/D2区序列进行扩增以及系统进化分析。【结果】传统的形态学特征和生理生化特征鉴定及26S rDNA D1/D2区序列分析结果表明菌株ZA-7与Rhodotorulaminuta(FR870029)相近,相似率为99.4%,存在4个碱基的差异。【结论】从胡杨树干液中分离得到了一株尚未从植物中分离到的内生酵母菌,并将该菌株鉴定为Rhodotorula minuta的近似种。

关键词：胡杨内生酵母菌 Rhodotorula minuta 26S rDNA D1/D2区序列

高通量测序结合可培养技术分析新疆刺腿食蚜蝇内生酵母菌的种群结构

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环境昆虫学报 2019年第4期41卷 829-836页

作者：米桃桃冯丽王翀孙燕飞熊杰雷勇辉石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学农学院新疆石河子832003 新疆出入境检验检疫局乌鲁木齐830063

对新疆石河子刺腿食蚜蝇 Ischiodon scutellaris Fabricius内生可培养酵母菌和不可培养酵母菌的种类进行鉴定及多样性分析,明确刺腿食蚜蝇主要酵母种类及分布规律,为酵母菌资源的开发利用提供科学依据。通过Illumina (MiSeq)平台高通量... 详细信息

对新疆石河子刺腿食蚜蝇 Ischiodon scutellaris Fabricius内生可培养酵母菌和不可培养酵母菌的种类进行鉴定及多样性分析,明确刺腿食蚜蝇主要酵母种类及分布规律,为酵母菌资源的开发利用提供科学依据。通过Illumina (MiSeq)平台高通量测序和生物信息学分析,以及对刺腿食蚜蝇过滤液富集培养,选取其代表菌株进行糖发酵、碳源利用等生理生化检测及26S rDNA D1/D2区进行测序,对刺腿食蚜蝇中可培养酵母菌分离鉴定系统进化分析,得到刺腿食蚜蝇中酵母菌物种分布多样性信息及微生物群落结构组成。从刺腿食蚜蝇体内共分离获得14株可培养酵母菌株,属于 Kodamaea , Saccharomyces , Wickerhamomyces 3个属;不可培养酵母菌含量≥1.49%,主要有16属,为 Filobasidium (黑粉菌属), Udeniomyces , Candida(假丝酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia (毕赤酵母属), Prototheca , Papiliotrema , Dipodascus , Kwoniella , Schizosaccharomyces (裂殖酵母), Acaromyces (阿卡酵母属), Cryptococcus (隐球酵母属), Cystofilobasidium , Tetrapisispora , Aureobasidium (金担子菌属), Zygosaccharomyces (接合酵母属)等。研究结果显示刺腿食蚜蝇内生酵母菌组成具有多样性,体内有着丰富的酵母菌种群,需要进一步开展昆虫体内的酵母菌种群的系统研究。

关键词：刺腿食蚜蝇内生酵母菌高通量测序多样性分析 26SrDNA

塔河废弃古河道胡杨内生酵母菌的多样性分析及两个新种的分类学鉴定

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塔河废弃古河道胡杨内生酵母菌的多样性分析及两个新种的分类学鉴...

作者：祖母拉提·阿布都热依木新疆大学

学位级别：硕士

1、本研究对新疆尉犁县卡尔曲尕乡南部以及西南部(Kiyik河和Ugan河废弃古河道)天然胡杨林胡杨可培养内生酵母菌的多样性进行研究，采用富集培养法结合划线分离技术得到可培养内生酵母菌30株。结合酵母传统形态学观察及生理生化，核糖体r... 详细信息

1、本研究对新疆尉犁县卡尔曲尕乡南部以及西南部(Kiyik河和Ugan河废弃古河道)天然胡杨林胡杨可培养内生酵母菌的多样性进行研究，采用富集培养法结合划线分离技术得到可培养内生酵母菌30株。结合酵母传统形态学观察及生理生化，核糖体rDNA D1/D2区序列分析和系统发育分析结果显示，30株菌分别属于2个门：担子菌门(Basidomycota)、子囊菌门(Ascomycota);其中24株分离菌株属于担子菌门，占80%，包括隐球酵母属(Cryptococcus)、线黑粉酵母属(Filobasidium)、红酵母属(Rhodotorula)、掷孢酵母属(Sporobolomyces)、毛孢子菌属(Trichosporon);6株属于子囊菌门，占20%，包括出芽短梗霉属(Aureobasidium)、假丝酵母属(Candida)。胡杨内生酵母菌中优势类群为隐球酵母属(15株)占50%，其次为出芽短梗霉属(5株)和掷孢酵母属(4株)分别占总分离菌株的16.7%和13.3%。其中，菌株P-10与ZA-3是隐球酵母属的两个潜在新种，它们与其系统进化地位最接近的模式菌株Cryptococcus aff.laurenti(iAY953961)和Cryptococcus laurentii(GQ352524)之间的26S rDNA D1/D2区序列相似性分别为95%，98%;ZA-8是掷孢酵母属的潜在的新种，与其系统进化地位最接近的已知菌种Sporobolomyces nylandii (AB279629)之间的26SrDNA D1/D2区序列相似性为98%。本研究获得的胡杨可培养内生酵母菌显示出一定的多样性，蕴藏着开发利用价值的潜在新菌种资源。 2、对分离到的潜在新种ZA-8进行表型特征，生理生化特征及遗传型特征检测。结果：菌株ZA-8菌落颜色为淡红色，细胞为卵圆形，无性生殖方式为出芽生殖，无子囊孢子。能生长在含0.01%的放线菌同培养基中。可利用的碳氮源有： L-苹果酸，磺琥珀酸， L-谷氨酸，α-酮戊二酸， D-葡萄酸，糊精，D-阿拉伯糖，D-纤维二塘，，龙胆二糖，α-D-葡萄糖，麦芽糖，D-甘露醇，D-木糖，β-甲基-D-葡萄糖苷，蔗糖，D-海藻糖，松二糖，熊果苷， D-核糖，水杨苷等。26S rDNA D1/D2区序列分析、系统发育分析结果表明，菌株ZA-8归类于Sporobolomyces属，与其系统进化地位最接近的已知菌种Sporobolomycesnylandii (AB279629)之间的26S rDNA D1/D2区序列相似性为98%。基于表型特征、生理生化和遗传学上存在的差异，将菌株ZA-8鉴定为是Sporobolomyces属的新种，命名为Sporobolomyces tograknsis。在基因库中ZA-8核糖体大亚基26S rDNA D1/D2区序列注册号为HQ234294。 3、对分离到的潜在新种KTH-63进行多相分类学的鉴定。结果：菌株KTH-63菌落颜色为米黄色，细胞为卵形，无芽孢，革兰氏阳性,无鞭毛，无运动性菌。菌株生长温度是10-40℃(最适30-37℃)，pH范围是5.5-9.0(最适pH6.5-7.5)，NaCl浓度范围是0-20%(w/v)(最适是0-3%)。具有氧化酶和过氧化氢酶活性，能利用碳源D-葡萄糖、D-棉子糖、D-蔗糖、D-麦芽糖和D-果糖。16SrRNA序列分析显示，菌株KTH-63归类于葡萄球菌科(Staphylococcaceae)，与其亲缘关系最近的模式菌株为Macrococcus brunensis CCM4811，其序列同源性仅92.49%，基因组DNA的(G+C)mol%含量是34.1%。菌株KTH-63主要包含的脂肪酸类型是anteiso-C，iso-C和iso-C，分别占全细胞脂肪酸成分的41.06%，14.59%和8.07%，主要的醌型是MK-6。基于表型特征和系统发育分析，将菌株KTH-63鉴定为是Staphylococcaceae科的新属新种，命名为Tarimoccocus tograknsis。菌株保藏编号是CCTCCAB2011010和NRRLB-59557。

关键词：胡杨内生酵母菌 D1/D2区DNA序列多样性分析新种的鉴定

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东亚飞蝗和刺腿食蚜蝇内生酵母菌多样性分析

广东农业科学 2018年第9期45卷 90-95页

作者：刘开平韦玉梅熊杰孙燕飞雷勇辉石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学农学院新疆石河子832003

为探究东亚飞蝗和刺腿食蚜蝇内生酵母菌的菌群多样性和探索这两种在农业生态系统中具有不同功能的昆虫内生酵母菌的多样性差异,通过Illumina MiSeq高通量测序技术对2个样本内生酵母菌26SrDNA进行测序,利用Mothur软件计算东亚飞蝗和食蚜... 详细信息

为探究东亚飞蝗和刺腿食蚜蝇内生酵母菌的菌群多样性和探索这两种在农业生态系统中具有不同功能的昆虫内生酵母菌的多样性差异,通过Illumina MiSeq高通量测序技术对2个样本内生酵母菌26SrDNA进行测序,利用Mothur软件计算东亚飞蝗和食蚜蝇体内酵母菌的操作分类单元(operational taxonomic unit, OTU)并进行丰富度Alpha多样性分析,利用SPSS软件进行多样性差异显著性分析,共产生906个OTU,东亚飞蝗中含647个OTU,而食蚜蝇为677个OUT,共有OUT 418个;酵母菌共鉴定出2门19属。结果表明刺腿食蚜蝇内生酵母菌多样性略高于东亚飞蝗。东亚飞蝗体内发现了特有的掷孢酵母属(Sporobolomyces)和拟威尔嗜杀酵母(Cyberlindnera)生防酵母资源。新疆东亚飞蝗和刺腿食蚜蝇的内生酵母菌丰富多样,其生存的微环境具有特殊性。通过对其进一步研究可能为害虫防治和特殊环境下的酵母菌资源利用提供新思路。

关键词：东亚飞蝗刺腿食蚜蝇内生酵母菌高通量测序物种多样性

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酿酒葡萄中内生酵母菌的分离与初步鉴定

中国酿造 2012年第9期31卷 82-84页

作者：崔艳莉蒋雪祁付云刘娅新疆农业职业技术学院新疆昌吉831100 石河子大学食品学院新疆石河子832000

采用组织块培养法,从优质酿酒葡萄品种"赤霞珠"中分离出12株内生酵母菌,其中春季4株,夏季3株,秋季5株;从酿酒葡萄的不同组织部位均分离到了内生酵母菌,其中根部6株、茎部2株、叶部1株、果实3株。经形态、培养特征、子囊孢子和假菌丝的... 详细信息

采用组织块培养法,从优质酿酒葡萄品种"赤霞珠"中分离出12株内生酵母菌,其中春季4株,夏季3株,秋季5株;从酿酒葡萄的不同组织部位均分离到了内生酵母菌,其中根部6株、茎部2株、叶部1株、果实3株。经形态、培养特征、子囊孢子和假菌丝的观察及生理生化实验,初步鉴定出这些菌株分别为瓶形酵母和克勒克酵母,其中瓶形酵母6株,克勒克酵母6株。

关键词：酿酒葡萄内生酵母菌分离初步鉴定

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花期糯红高粱内生酵母分离鉴定及功能菌筛选

中国酿造 2023年第12期42卷 93-98页

作者：胡连清刘雯雯陈露周万海冯瑞章魏琴赵鑫唐馨宇张玉婷宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644000 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室四川宜宾644000

为揭示花期糯红高粱内生酵母群落结构及功能特点。利用纯培养法对宜宾地区酿酒专用糯红高粱花期内生酵母多样性及群落结构进行探究与分析,并通过选择培养基筛选其中的功能菌。结果表明,从花期糯红高粱中分离得到54株内生酵母菌菌株,鉴定... 详细信息

为揭示花期糯红高粱内生酵母群落结构及功能特点。利用纯培养法对宜宾地区酿酒专用糯红高粱花期内生酵母多样性及群落结构进行探究与分析,并通过选择培养基筛选其中的功能菌。结果表明,从花期糯红高粱中分离得到54株内生酵母菌菌株,鉴定为12个属17个种,优势属为隐球菌属(Cryptococcus),优势种为黄色隐球酵母(Cryptococcus luteolus)。糯红高粱花期根、茎、叶、花各组织中的内生酵母各项多样性指数均有明显差异,其丰富度指数表现为茎>根>花>叶;均匀度指数表现为根>花>叶>茎;优势度指数表现为花>根>茎>叶。花期糯红高粱内生酵母功能丰富,菌株FBJ15产淀粉酶能力最强,菌株FAF8产蛋白酶能力最强,菌株FAJ43产脂肪酶能力最强;HBF22菌株产酯酶能力最强。由此可知,糯红高粱花期内生酵母种类丰富且功能多样,该研究结果为深入探究内生酵母与宿主糯红高粱的互作机制提供参考。

关键词：糯红高粱内生酵母菌群落结构多样性