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奶牛源绿脓杆菌内毒素蛋白的提取及免疫原性和保护性研究

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黑龙江畜牧兽医 2019年第7期 25-28页

作者：曲晓军王金英孙建华于冲夏海华潘钰黑龙江省科学院微生物研究所哈尔滨150010 黑龙江省科学院高技术研究院哈尔滨150020

为了评估绿脓杆菌内毒素蛋白的免疫原性和保护性,试验采用最小致死量(MLD)测定法从奶牛源绿脓杆菌菌株中筛选高毒力菌株,用可使蛋白质与脂多糖分离的合成培养基进行发酵、提取、纯化制备内毒素蛋白,采用考马斯亮蓝法测定内毒素蛋白含量... 详细信息

为了评估绿脓杆菌内毒素蛋白的免疫原性和保护性,试验采用最小致死量(MLD)测定法从奶牛源绿脓杆菌菌株中筛选高毒力菌株,用可使蛋白质与脂多糖分离的合成培养基进行发酵、提取、纯化制备内毒素蛋白,采用考马斯亮蓝法测定内毒素蛋白含量,间接ELISA法和免疫攻毒保护试验对制备的内毒素蛋白进行免疫原性和保护性研究。结果表明:筛选得到1株高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株,其MLD为2.0×10~7 cfu/mL;用CPA-009菌株发酵制备出5批次内毒素蛋白,平均含量为44.62%,各批次间差异不显著(P>0.05);免疫组小鼠体内抗体效价随着免疫进程持续升高,最高达到1∶12 500;内毒素蛋白对CPA-009菌株的保护率为100%,对其他3种血清型绿脓杆菌菌株的保护率均在80.0%以上。说明由高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株制备的内毒素蛋白具有良好的免疫原性和高保护性。

关键词：绿脓杆菌内毒素蛋白提取免疫间接ELISA 攻毒

健康人和感染患者抗绿脓杆菌内毒素蛋白(EP)抗体水平的测定分析

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生物技术 1992年第1期2卷 37-39页

作者：敬德仲尤旭曲杰卢东升常淑琴王玉琪苏华黑龙江省科学院应用微生物研究所黑龙江省卫生防疫站免疫科

用微量间接血凝法检测了健康人和绿脓杆菌感染患者血清抗EP抗体.健康人共检测154人.基础抗体水平绝大部分在1:8以下(占85.05%)EP—HA GMT为1:7.3.无性别差异(x^2=3.04、P>0.05).绿脓杆菌感染患者检测38例,免疫前GMT高于健康人1.43倍,免... 详细信息

用微量间接血凝法检测了健康人和绿脓杆菌感染患者血清抗EP抗体.健康人共检测154人.基础抗体水平绝大部分在1:8以下(占85.05%)EP—HA GMT为1:7.3.无性别差异(x^2=3.04、P>0.05).绿脓杆菌感染患者检测38例,免疫前GMT高于健康人1.43倍,免疫后较免疫前GMT提高4倍.绿脓杆菌EP是绿脓杆菌共同抗原,检查人抗EP抗体水平对诊断、防治绿脓杆菌感染具有重要临床意义.

关键词：绿脓杆菌内毒素蛋白 EP抗体

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绿脓杆菌内毒素蛋白微胶囊的制备及免疫效果

畜牧兽医科技信息 2022年第5期38卷 44-47页

作者：曲晓军胡基华潘钰黑龙江省科学院微生物研究所黑龙江哈尔滨150010 中国医学细菌保藏管理中心铜绿假单胞菌专业实验室黑龙江哈尔滨150010

为预防绿脓杆菌感染引起的雏鸡急性败血症,试验研究了绿脓杆菌内毒素蛋白微胶囊制备工艺;口服免疫雏鸡,检测抗体水平,采用3个血清型绿脓杆菌进行攻毒实验。结果表明:搅拌速度800 r/min、p H 4.2、7.5 m L甲醛固化55 min时,微胶囊颗粒均... 详细信息

为预防绿脓杆菌感染引起的雏鸡急性败血症,试验研究了绿脓杆菌内毒素蛋白微胶囊制备工艺;口服免疫雏鸡,检测抗体水平,采用3个血清型绿脓杆菌进行攻毒实验。结果表明:搅拌速度800 r/min、p H 4.2、7.5 m L甲醛固化55 min时,微胶囊颗粒均匀;雏鸡血清中抗体第5周达到高峰,第8周时维持较高水平,微胶囊对绿脓杆菌攻击保护率在83.3%以上。证明内毒素蛋白微胶囊能有效抵抗绿脓杆菌的攻击,为雏鸡急性败血症的防控提供有效手段。

关键词：绿脓杆菌内毒素蛋白微胶囊雏鸡血清抗体

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铜绿假单胞菌内毒素蛋白的提取及其临床应用

临床检验杂志 1993年第2期11卷 87-87页

作者：张桂勤李洪春苏海梅童明庆江苏省人民医院微生物免疫科 210029

内毒素蛋白(简称EP)主要见于革兰氏阴性杆菌体内,并常与LPS 构成复合物的形式存在,是菌体抗原的主要成份之一.我们采用甲苯溶解铜绿假单胞菌菌体,获得了粗制印,然后用Sephadex—A50层析柱进行阶段洗脱得到了纯化EP,并用纯化EP 作为抗原... 详细信息

内毒素蛋白(简称EP)主要见于革兰氏阴性杆菌体内,并常与LPS 构成复合物的形式存在,是菌体抗原的主要成份之一.我们采用甲苯溶解铜绿假单胞菌菌体,获得了粗制印,然后用Sephadex—A50层析柱进行阶段洗脱得到了纯化EP,并用纯化EP 作为抗原来致敏醛化羊红细胞,建立了被动血凝试验(简称OHT)。

关键词：内毒素蛋白铜绿假单胞菌

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铜绿假单胞菌混合蛋白疫苗制备研究

黑龙江畜牧兽医 2019年第19期 138-142页

作者：曲晓军王金英夏海华于冲潘钰黑龙江省科学院微生物研究所哈尔滨150010 黑龙江省科学院高技术研究院哈尔滨150020

为了制备免疫力高、不良反应少的铜绿假单胞菌混合蛋白疫苗,试验采用间接ELISA方法测定内毒素蛋白、类毒素和外膜蛋白免疫后小鼠的血清抗体效价,鲎试剂凝胶半定量方法测定上述3种蛋白的内毒素含量,采用'高免疫力+低内毒素'作为配伍指标... 详细信息

为了制备免疫力高、不良反应少的铜绿假单胞菌混合蛋白疫苗,试验采用间接ELISA方法测定内毒素蛋白、类毒素和外膜蛋白免疫后小鼠的血清抗体效价,鲎试剂凝胶半定量方法测定上述3种蛋白的内毒素含量,采用'高免疫力+低内毒素'作为配伍指标制备5组混合蛋白疫苗,分别编为1~5号,间接ELISA法测定混合蛋白疫苗的免疫力水平,鲎试剂凝胶半定量方法测定混合蛋白疫苗的内毒素含量,小鼠腹腔注射法测定混合蛋白疫苗的异常毒性。结果表明:三种蛋白免疫后,小鼠血清抗体效价均随免疫进程持续升高,内毒素蛋白抗体效价最高,达到1∶12 500;内毒素蛋白中内毒素含量(E内)为8.00 EU/mL,类毒素中内毒素含量(E类)为1.73 EU/mL,外膜蛋白中内毒素含量(E外)为2.24 EU/mL;3号混合蛋白疫苗(内毒素蛋白∶类毒素∶外膜蛋白=60∶20∶20)血清抗体效价达到了1∶12 800,其内毒素含量(E3)为5.66 EU/mL;3号混合蛋白疫苗异常毒性试验合格。说明3号混合蛋白疫苗免疫效果好,与内毒素蛋白持平,且内毒素含量低于内毒素蛋白。

关键词：铜绿假单胞菌内毒素蛋白类毒素外膜蛋白混合蛋白疫苗间接ELISA 内毒素异常毒性