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一种从链霉菌和大肠杆菌提取大分子量总DNA的新方法

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四川生理科学杂志 1991年第Z1期13卷 69-70页

作者：陈廷清马云鹏四川省肿瘤研究所

近年来,我们在进行基因工程试验中,探索建立了一种避免使用苯酚、简化操作程序的DNA提取方法。利用该法所得DNA不仅分子量大(约300kb),且纯度完全能满足内切酶消化,接连和转化。在提取链霉菌和大肠杆菌染色体DNA时,称1g湿菌体,加9ml溶... 详细信息

近年来,我们在进行基因工程试验中,探索建立了一种避免使用苯酚、简化操作程序的DNA提取方法。利用该法所得DNA不仅分子量大(约300kb),且纯度完全能满足内切酶消化,接连和转化。在提取链霉菌和大肠杆菌染色体DNA时,称1g湿菌体,加9ml溶菌缓冲液(50mMol/L *** PH8.0;25mmolL EDTA;0.3mol/l sucrose)。混匀菌体后加入1ml溶菌酶溶液(20mg/ml和200ul

关键词： DNA 链霉菌内切酶消化溶菌酶溶液工程试验 RNase sucrose 操作程序缓冲液法舫

医学遗传学述要第九讲遗传工程在医学上的应用

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新医学 1985年第6期 322-323页

作者：刘良斌许延康中山医学院医学遗传学教研室中山医学院医学遗传学教研室

遗传工程在医学上的应用是近十几年来发展极快的一个领域。它涉及到遗传病的诊断、预防和治疗的各个方面。[概念] 遗传工程是指用人工的方法,将一种生物的遗传物质转移到另一种生物的细胞内,以改变后者的遗传特性、通过表达产生新的品... 详细信息

遗传工程在医学上的应用是近十几年来发展极快的一个领域。它涉及到遗传病的诊断、预防和治疗的各个方面。[概念] 遗传工程是指用人工的方法,将一种生物的遗传物质转移到另一种生物的细胞内,以改变后者的遗传特性、通过表达产生新的品种或性状。遗传工程广义上说包括4种不同水平的工程。即

关键词：医学遗传学内切酶消化遗传特性密码子半乳糖操纵子精氨酸酶人工合成亚细胞水平碱基取代产前诊断

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甲状腺癌组织低甲基化片断的筛选与克隆

美国中华临床医学杂志 2005年第1期7卷 17-19页

作者：谢翠松曹仁贤文格波南华大学附属第一医院，湖南衡阳421001

目的筛选甲状腺癌与甲状腺癌癌旁组织的低甲基化片段。方法采用MS—RDA方法，用甲基化敏感性内切酶消化甲状腺癌及癌旁组织基因组DNA，连上接头制备扩增子后，进行两轮消减杂交，筛选甲状腺癌低甲基化片段。结果经过两轮消减杂交后，筛... 详细信息

目的筛选甲状腺癌与甲状腺癌癌旁组织的低甲基化片段。方法采用MS—RDA方法，用甲基化敏感性内切酶消化甲状腺癌及癌旁组织基因组DNA，连上接头制备扩增子后，进行两轮消减杂交，筛选甲状腺癌低甲基化片段。结果经过两轮消减杂交后，筛选出3个低甲基化片段。筛选出的低甲基化片段C913位于。BC029276基因上，该基因编码一种rRNA结合蛋白，可能与肿瘤有关。另外两个低甲基化片段C915与C917尚未见相关结构和功能的报道。结论在甲状腺癌组织中存在低甲基化。

关键词：低甲基化腺癌组织筛选 RNA结合蛋白甲状腺癌克隆片断基因组DNA 甲基化敏感性癌旁组织消减杂交内切酶消化结构和功能基因编码片段 RDA 扩增子 6基因

2型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性的相关性的初步探讨

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广州医药 2005年第3期36卷 59-61页

作者：许惠根张惠文刘学军广东省中山市火炬开发区医院 528400 广东省中医院 510120 广州市脑科医院 510370

目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性在2型糖尿病发病中的意义。方法PCR扩增52例2型糖尿病患者及100例对照者的脂蛋白脂酶基因PvuⅡ基因突变点,经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。结果脂蛋白脂酶基因PvuⅡ各种基因型频率在患... 详细信息

目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性在2型糖尿病发病中的意义。方法PCR扩增52例2型糖尿病患者及100例对照者的脂蛋白脂酶基因PvuⅡ基因突变点,经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。结果脂蛋白脂酶基因PvuⅡ各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性。结论脂蛋白脂酶基因PvuⅡ突变可能不足以构成2型糖尿病的独立遗传性危险因子。

关键词：脂蛋白脂酶基因多态性初步探讨相关性 2型糖尿病发病 2型糖尿病患者遗传性危险因子 PvuⅡ 基因突变点 PCR扩增内切酶消化正常对照组基因型频率凝胶电泳限制性显著性

同型半胱氨酸代谢相关酶基因多态性与习惯性流产关系的研究

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中华围产医学杂志 2005年第3期8卷 160-164页

作者：宋绿茵戚潜辉佘达贤张宏英陈盛强李锦玉广州医学院第二附属医院妇产科 510260

目的　探讨胱硫醚β合成酶(cystathionineβsynthase, CBS)基因844ins68、甲硫氨酸合成酶(methione synthase, MS)基因A2756G、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate re ductase, MTHFR)基因C677T三种同型半胱氨酸代谢相关酶基因突变与习惯性流产的关系。　方法　用PCR扩增50 例习惯性流产患者(习惯性流产组)及56 例正常孕妇(对照组)的CBS、MS、MTHFR基因突变点,直接或经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。　结果　习惯性流产组MTHFR C677T突变纯合子(12/50,24.0%)较对照组(4/56,7.1%)明显升高(P<0.05),且等位基因突变频率习惯性流产组(26/100, 26. 0%)较对照组(20/112, 17. 9%)升高(P< 0.05)。CBS844ins68、MS A2756G各种基因型频率在流产组与正常对照组之间的差异无统计学意义。　结论　MTHFR C677T纯合子突变与习惯性流产有明确的相关关系;CBS 844ins68、MS A2756G突变可能不足以构成习惯性流产的独立遗传性危险因子。

关键词：同型半胱氨酸代谢习惯性流产酶基因多态性 844ins68 亚甲基四氢叶酸还原酶 MTHFR 胱硫醚β合成酶甲硫氨酸合成酶基因C677T C677T突变遗传性危险因子基因突变频率酶基因突变 PCR扩增基因突变点内切酶消化正常对照组

生殖器都柏林念珠菌分离与PCR-RFLP鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第11期25卷 879-879页

作者：江勇王惠平骆仲智天津医科大学总医院皮肤科

都柏林念珠菌是1995年采用现代分子生物学方法鉴定的念珠菌属的一个新种.近年来,都柏林念珠菌等非白念珠菌引起的深部感染比例逐渐增长,对氟康唑很容易产生不可逆的耐药性.因此都柏林念珠菌的分离与鉴定引起了国内外学者的高度重视.目前... 详细信息

都柏林念珠菌是1995年采用现代分子生物学方法鉴定的念珠菌属的一个新种.近年来,都柏林念珠菌等非白念珠菌引起的深部感染比例逐渐增长,对氟康唑很容易产生不可逆的耐药性.因此都柏林念珠菌的分离与鉴定引起了国内外学者的高度重视.目前,45℃温度试验筛查都柏林念珠菌操作简便,已得到国内外学术界的广泛认可和采用.都柏林念珠菌DNA经限制性内切酶消化后,可产生独特的RFLP图谱,但单纯RFLP图谱结果模糊.为此,用PCR方法对核糖体DNA内部转录间隔区的编码基因进行核酸扩增,然后分析限制性酶酶切图谱,鉴定都柏林念珠菌,并对都柏林念珠菌在天津的流行情况作了分析。

关键词：都柏林念珠菌 PCR-RFLP 鉴定分离生殖器分子生物学方法念珠菌DNA 内切酶消化念珠菌属深部感染