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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王文丽张国鑫刘莹林娜朱春燕林雅福建中医药大学药学院中国中医科学院中药研究所

目的：评价如意珍宝丸（RYZBW）对出血性脑卒中小鼠继发性脑损伤及中枢痛的干预效果，并从神经炎症角度探索其修复神经-血管单元的药理机制。方法：以Ⅳ型胶原酶丘脑腹后外侧核区显微注射的方式构建小鼠卒中后中枢痛（CPSP）模型，构建... 详细信息

目的：评价如意珍宝丸（RYZBW）对出血性脑卒中小鼠继发性脑损伤及中枢痛的干预效果，并从神经炎症角度探索其修复神经-血管单元的药理机制。方法：以Ⅳ型胶原酶丘脑腹后外侧核区显微注射的方式构建小鼠卒中后中枢痛（CPSP）模型，构建当天记为D1并分为假手术组（Sham）、模型组（CPSP）、如意珍宝丸低（RYZBW-L）、中（RYZBW-M）、高（RYZBW-H）剂量组和阳性药普瑞巴林组（PGB）。模型构建后D4，进行一天2次的灌胃给药。Sham及CPSP给予等体积生理盐水，RYZBW-L、RYZBW-M、RYZBW-H组单次给予0.6067、0.9101、1.2134 g·kg-1如意珍宝丸，PGB组单次给予0.02275 g·kg-1普瑞巴林；分别于建立模型前1 d（记为D0）、建立模型后第三天（记为D3）及建立模型第四天（记为D4）第一次灌胃给药后检测机械痛敏，D1及D4第2次灌胃给药后评价神经损伤。D4取外周血进行血常规检测，取丘脑进行免疫炎症芯片分析。在独立样品中，以免疫荧光双标染色及酶联免疫吸附测（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blotting）对相关免疫炎症因子-受体-细胞定位进行定量分析。结果：与Sham组相比，CPSP小鼠具有显著的继发性神经损伤（P＜0.01），卒中后中枢痛（P＜0.05），外周血红细胞分布宽度（RDW）显著增高（P＜0.01），血红蛋白浓度（HGB）显著下降（P＜0.01）; CPSP组丘脑炎症芯片结果表明CCL2显著增加（P＜0.01）、CX3CL1显著降低（P＜0.05）；CPSP组ELISA结果表明丘脑CCL2显著升高（P＜0.01），这与免疫炎症芯片结果一致；CPSP组免疫荧光结果表明CX3CL1表达显著降低（P＜0.05）；小胶质细胞标志物TMEM119及CX3CL1受体CX3CR1的免疫荧光染色结果显示，CPSP组CX3CR1总体表达量无显著变化，但CX3CR1+TMEM119+的小胶质细胞数量（P＜0.01）及胞体面积（P＜0.01）显著增加，小胶质细胞上CX3CR1受体表达显著增加（P＜0.01）；CPSP组Western blot实验结果显示CX3CR1的蛋白表达量显著降低（P＜0.01）；单核细胞标志物Ly6C及CX3CR1的免疫荧光染色结果显示，CPSP组CX3CR1总体表达量显著降低（P＜0.01），Ly6C+CX3CR1+的非典型单核细胞数量无显著变化，而CX3CR1-Ly6C+的典型单核细胞的数量显著增加（P＜0.01）。与CPSP组相比，RYZBW剂量依赖性地改善神经损伤(R2=0.3679)及中枢痛症状(R2=0.5019)；RYZBW-H显著改善外周血RDW（P＜0.05）及HGB（P＜0.05）；免疫炎症芯片结果显示，RYZBW-H显著抑制CCL2表达（P＜0.01）并提高CX3CL1表达（P＜0.05）；ELISA结果显示，RYZBW-H显著下调CCL2（P＜0.05）；对CX3CL1的免疫荧光染色结果显示，RYZBW剂量依赖性地升高CX3CR1总体表达量(R2=0.6196)，各个剂量有效下调小胶质细胞上CX3CR1受体表达，并剂量依赖性地降低小胶质细胞数量(R2=0.4945)及胞体面积(R2=0.5717)；Western blotting实验结果显示RYZBW-L/H组的CX3CR1的蛋白表达显著升高（P＜0.05）；与CPSP组相比，RYZBW剂量依赖性地增加CX3CR1+Ly6C+(R2=0.6353)的非典型核细胞浸润，并有效抑制Ly6C+CX3CR1-(R2=0.4836)的典型单核细胞浸润。结论：RYZBW可有效缓解CPSP小鼠继发性损伤及中枢痛，其机制与调控CX3CL1-CX3CR1配体-受体、抑制小胶质细胞浸润及激活、促进血管修复性的非典型单核细胞浸润并抑制炎症吞噬性的典型单核细胞浸润有关。

关键词：如意珍宝丸卒中后中枢痛小胶质细胞非典型单核细胞典型单核细胞

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外周血单核细胞及其亚群数量在吉兰-巴雷综合征病程中的变化及临床意义

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神经损伤与功能重建 2022年第4期17卷 195-198页

作者：任凯夕赵代弟白苗卢佳睿李宏增郭俊空军军医大学第二附属医院神经内科西安710038

目的:分析吉兰-巴雷综合征(GBS)患者的外周血单核细胞及其亚群数量在病程不同阶段的变化规律及其临床意义。方法:收集118例GBS首次发病患者,给予正规GBS治疗并随访18个月,根据随访期GBS的复发及再次入院治疗情况,最终分组为急性期组118... 详细信息

目的:分析吉兰-巴雷综合征(GBS)患者的外周血单核细胞及其亚群数量在病程不同阶段的变化规律及其临床意义。方法:收集118例GBS首次发病患者,给予正规GBS治疗并随访18个月,根据随访期GBS的复发及再次入院治疗情况,最终分组为急性期组118例,缓解期组36例,复发期组6例次;健康志愿者96例纳入对照组。每次入院时,均进行休斯功能分级量表评分(HFGS)及医学研究理事会量表(MRC)评分;采集外周血进行血常规检验及流式细胞术分析;分析各组外周血单核细胞亚群变化及其与MRC总和评分相关性。结果:急性期组及复发期组单核细胞计数高于对照组(均P典型单核细胞(c-Mo)较其他2组明显增加(均P典型单核细胞(n-Mo)较其他2组明显增加(均P单核细胞及其亚群在GBS病程不同阶段具有特征性的变化,其中c-Mo升高与疾病严重程度呈正相关性。

关键词：吉兰-巴雷综合征典型单核细胞非典型单核细胞 MRC总和评分

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