检索结果-南通市图书馆

酵母菌与糖化酶共固定化木薯酒精连续发酵工艺研究

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中国粮油学报 2005年第1期20卷 36-40页

作者：李魁郑州工程学院郑州450052

采用聚乙烯醇(PVA)为载体共固定化酵母菌细胞和糖化酶制剂,并以木薯为原料进行酒精连续发酵工艺研究。实验结果表明,木薯酒精连续发酵的最佳工艺条件为:硫酸铵添加量为原料量的0.5%,α-淀粉酶用量为5u/g,糖化酶的用量为150u/g,适宜pH... 详细信息

采用聚乙烯醇(PVA)为载体共固定化酵母菌细胞和糖化酶制剂,并以木薯为原料进行酒精连续发酵工艺研究。实验结果表明,木薯酒精连续发酵的最佳工艺条件为:硫酸铵添加量为原料量的0.5%,α-淀粉酶用量为5u/g,糖化酶的用量为150u/g,适宜pH值4.5,酵母菌细胞与糖化酶制剂共固定化凝胶颗粒填装量为50%。在稀释速率为0.155h$C1、糖化醪总糖为119.8g·L-1、还原糖为80.33g·L-1、醪液在反应器中停留时间为3.1h时,发酵醪酒精浓度为12.3%,成熟发酵醪残余总糖为2.72g·L-1,残余还原糖为0.6g· L-1,总糖利用率达96.91%。

关键词：糖化酶连续发酵共固定化酵母菌总糖酶用量还原糖木薯酶制剂稀释

响应面分析法优化糖化酶与酵母菌共固定化条件

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中国酿造 2010年第3期29卷 116-118页

作者：侯红萍闫跃文马玲山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

以聚乙烯醇-海藻酸钠复合凝胶为载体,采用包埋法共固定化糖化酶和酵母菌。以糖化酶包埋量、酵母菌包埋量和复合凝胶浓度为3个主要因素,以共固定化颗粒的酒精发酵度为评价指标,利用响应面分析法得出共固定化糖化酶和酵母菌的最佳条件是:... 详细信息

以聚乙烯醇-海藻酸钠复合凝胶为载体,采用包埋法共固定化糖化酶和酵母菌。以糖化酶包埋量、酵母菌包埋量和复合凝胶浓度为3个主要因素,以共固定化颗粒的酒精发酵度为评价指标,利用响应面分析法得出共固定化糖化酶和酵母菌的最佳条件是:载体溶液20mL,糖化酶包埋量72.4mg、酵母菌包埋量34.2mg、复合凝胶浓度8.1%,此条件下理论酒精度为10.4%vol。对最佳共固定化条件经过验证性试验,重复3次得到平均酒精度为10.2%vol,与模型预测值基本相符。

关键词：响应面分析法聚乙烯醇糖化酶酵母菌共固定化

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血红素加氧酶系的共固定化及部分性质研究

中国生物化学与分子生物学报 1998年第6期14卷 726-731页

作者：龚兴国曾冬云浙江大学生物科学与技术系

为了检测血红素加氧酶系分子间的相互作用和共固定化酶系的反应动力学，利用２′，５′－ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱对血红素加氧酶、ＮＡＤＰＨ－细胞色素ｃ还原酶和胆绿素还原酶进行非膜重组，再以纤维素为载体，用重氮化法固... 详细信息

为了检测血红素加氧酶系分子间的相互作用和共固定化酶系的反应动力学，利用２′，５′－ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱对血红素加氧酶、ＮＡＤＰＨ－细胞色素ｃ还原酶和胆绿素还原酶进行非膜重组，再以纤维素为载体，用重氮化法固定此重组的酶复合物和共固定非重组的３种酶，发现固定化的重组酶系比非重组酶系能更好地发挥协同作用，在室温条件下可催化血红素一步合成胆红素．共固定化酶的最适ｐＨ为７．２，最适温度为３８℃，Ｋｍ值为０．９３μｍｏｌ／Ｌ．巯基试剂和金属卟淋对固定化酶有抑制作用，共固定化酶比游离酶系稳定性提高，３８℃下的操作半寿期可延长至４２０ｈ，在０～４℃保存两个月其酶活力无明显变化．

关键词：血红素加氧酶性质非膜重组共固定化

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三元全酶系统的共固定化和辅酶再生

华东化工学院学报 1989年第4期15卷 430-435页

作者：徐俊楼一心朱正华赵成华东化工学院生化工程研究所

本文研究了用对-氨基苯砜乙基(ABSE)-交联琼脂糖做载体,通过戊二醛共价交联,对醇脱氨酶、乳酸脱氢酶、辅酶Ⅰ进行了位置对位置的共固定化。按本实验方法得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的5倍。本文还对该三元... 详细信息

本文研究了用对-氨基苯砜乙基(ABSE)-交联琼脂糖做载体,通过戊二醛共价交联,对醇脱氨酶、乳酸脱氢酶、辅酶Ⅰ进行了位置对位置的共固定化。按本实验方法得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的5倍。本文还对该三元全酶系统的固定化机理和辅酶再生性能做了一定的讨论。

关键词：三元全酶系统共固定化辅酶再生

乳糖酶和酿酒酵母的共固定化及其在乳清发酵中的应用

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中国酿造 2008年第2期27卷 54-57页

作者：李雪雁弋凌云兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050

利用凹凸棒土的强吸附作用,首先将乳糖酶吸附于凹凸棒土上,再采用壳聚糖溶液包埋的方法制成乳糖酶与酿酒酵母细胞的共固定化凝胶颗粒。实验结果表明,凹凸棒土与壳聚糖的适宜比例为5:1,加酶量为300u/g凹凸棒土,室温下吸附时间为4h:所制... 详细信息

利用凹凸棒土的强吸附作用,首先将乳糖酶吸附于凹凸棒土上,再采用壳聚糖溶液包埋的方法制成乳糖酶与酿酒酵母细胞的共固定化凝胶颗粒。实验结果表明,凹凸棒土与壳聚糖的适宜比例为5:1,加酶量为300u/g凹凸棒土,室温下吸附时间为4h:所制得的共固定化酶-酵母细胞发酵乳糖的适宜pH值和温度分别为6.0和32℃,乳糖浓度13%～15%:在适宜的发酵条件下,以20%的乳清(乳糖含量为13.42%)为底物发酵30h,酒精浓度达8.3%(v/v),乳糖转化率达93.2%。

关键词：共固定化乳清乳糖酶酿酒酵母凹凸棒土壳聚糖

木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的共固定化及其水解芝麻蛋白的研究

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粮油加工 2009年第10期 83-87页

作者：苗敬芝曹泽虹董玉玮高明侠吕兆启徐州工程学院生物工程学院

以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,考察共固定化酶工艺的选择,水解芝麻蛋白的优化条件和共固定化酶的稳定性,芝麻蛋白水解物的复合氨基酸组成。结果表明,共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的最佳条件为:海... 详细信息

以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,考察共固定化酶工艺的选择,水解芝麻蛋白的优化条件和共固定化酶的稳定性,芝麻蛋白水解物的复合氨基酸组成。结果表明,共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的最佳条件为:海藻酸钠浓度3%,戊二醛浓度2.5%,氯化钙浓度0.2%,酶活力回收率为51.28%。水解芝麻蛋白的最佳条件为:固液比1∶25,pH值6.0,温度60℃,时间7h,加酶量5%,氨基氮含量最高为20.65mg/g,共固定化酶重复使用6次,酶活力仍保持50%以上。芝麻蛋白水解物中15种氨基酸齐全。

关键词：共固定化木瓜蛋白酶中性蛋白酶水解芝麻蛋白

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糖化酶与酵母共固定化酒精连续发酵研究初报

郑州工程学院学报 2001年第3期22卷 6-8页

作者：李廷生李魁刘玉其郑州工程学院学报编辑部河南郑州450052 郑州工程学院生物工程系河南郑州450052 通信信息报社编辑部福建福州350001

用海藻酸盐凝胶固定化葡萄糖淀粉酶制剂和活性干酵母进行淀粉质原料糖化醪的酒精连续发酵研究 .结果表明在稀释速率为 0 1 5 5h- 1 、糖化醪总糖为 1 1 9 8g·L- 1 、还原糖为 80 33g·L- 1 、醪液在反应器中停留时间为 3 1h时 ,成熟... 详细信息

用海藻酸盐凝胶固定化葡萄糖淀粉酶制剂和活性干酵母进行淀粉质原料糖化醪的酒精连续发酵研究 .结果表明在稀释速率为 0 1 5 5h- 1 、糖化醪总糖为 1 1 9 8g·L- 1 、还原糖为 80 33g·L- 1 、醪液在反应器中停留时间为 3 1h时 ,成熟发酵酵残余总糖为 3 7g·L- 1 、残余还原糖为0 6g·L- 1 、总糖利用率为 96 91 % .

关键词：葡萄糖淀粉酶制剂活性干酵母共固定化酒精连续发酵

利用交联酶聚集体技术共固定化NADH氧化酶构建NAD+再生系统

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利用交联酶聚集体技术共固定化NADH氧化酶构建NAD+再生系统

作者：徐梦秋江苏大学

学位级别：硕士

复合交联酶聚集体(Combined cross-linked enzyme aggregates,combi-CLEAs)是一种多用途的无载体固定化生物催化剂,用于两个或多个串联或者并联酶的共固定化。这些酶能够同体系催化多级级联或非级联的生物转化。与传统的固定化方法相比... 详细信息

复合交联酶聚集体(Combined cross-linked enzyme aggregates,combi-CLEAs)是一种多用途的无载体固定化生物催化剂,用于两个或多个串联或者并联酶的共固定化。这些酶能够同体系催化多级级联或非级联的生物转化。与传统的固定化方法相比,这种固定方法有很多优势,例如更高的酶活性和可控性,更低的生产成本和不需要纯化的酶。氧化还原酶催化的氧化还原反应具有条件温和、专一性高、立体选择性高等优点,在实际应用中具有举足轻重的意义。而80%以上的氧化还原酶催化的反应需要辅酶NAD(P)/NAD(P)H的参与。但辅酶价格昂贵,大量使用必然会增加催化反应的成本,因此需要对辅因子进行有效的再生。其中还原型辅因子NAD(P)H的再生方法已被广泛报道,但氧化型辅因子NAD(P)的再生是目前工业催化领域的瓶颈。偶联两种相互平行但催化方向相反的酶用于再生辅因子具有再生效率高、体系简单等优点,但同时游离酶在使用过程中存在回收困难、稳定性差等缺点。通过共固定化酶实现生物催化剂的回收和再利用可以弥补游离酶使用过程中的缺陷。本研究拟用combi-CLEAs来实现NAD的原位再生,拟通过辅因子的再利用来降低成本。论文的第二章对NADH氧化酶(Nox)和甘油脱氢酶(GDH)进行共固定化制备复合交联酶聚集体。其制备过程包括两步,首先是用沉淀剂将游离酶从溶液中沉淀,再通过交联剂戊二醛交联固定化。为了比较共固定化酶对于NAD原位再生的效率,分别制备了Nox-交联酶聚集体和GDH-交联酶聚集体。论文考察了固定化过程中沉淀剂的种类和浓度、Nox/GDH的比例、戊二醛的浓度、固定化温度等的影响。选择饱和硫酸铵作为沉淀剂、Nox:GDH为1:5、戊二醛:蛋白为1:20、固定化时间2 h,得到酶活性回收最高的combi-CLEAs和CLEAs混合物,分别为2.14和1.08 U/mg。当NAD浓度为0.05μM时,combi-CLEAs,CLEAs mixture和混合游离酶的TTN分别为2137,1849和1970,表明共固定化的交联酶聚集体再生NAD的效率高于交联酶聚集体体混合物和游离酶混合物。经过优化后,combi-CLEAs在55 C条件下,其t比混合游离酶提高了11%,表现出更高的热稳定性。并且经10次重复利用后,combi-CLEAs和混合CLEAs分别保持了65%和56%的初始活性。最后,在催化甘油生成1,3-二羟基丙酮(DHA)实验中,在反应30 h后,combi-CLEAs能催化生成9.1 mM DHA,分别是混合CLEAs和混合游离酶的2.5倍和2倍。论文第三章对Nox和半乳糖醇脱氢酶(GatDH)共固定化制备了复合交联酶聚集体。同时制备了Nox-交联酶聚集体和GatDH-交联酶聚集体。本章也考察了Nox/GatDH的、戊二醛的浓度、固定化时间等因素对固定化影响。在Nox:GatDH为1:5、戊二醛:蛋白为1:20、固定化时间8 h的条件下,combi-CLEAs和混合CLEAs获得最高酶活力分别为0.19 U/mg和0.17 U/mg。当加入0.05μM NAD,combi-CLEAs的TTN为134,是混合CLEAs和混合游离酶的1.6倍和1.6倍,表明利用combi-CLEAs再生NAD的效率高于CLEAs混合物和游离酶混合物。10次循环利用后,combi-CLEAs和CLEAs混合物分别保持了40%和32%的初始活性。本论文制备了两种combi-CLEAs,利用戊二醛与蛋白表面氨基酸残基反应实现酶的共价固定。通过这两种combi-CLEAs实现了辅因子的原位再生。研究结果表明,combi-CLEAs拥有更好的稳定性和重复利用性,在生物催化反应中,combi-CLEAs具有更好的催化效率。本论文的研究工作为进一步研究固定化技术在辅因子再生领域的应用提供了新的思路。

关键词：复合交联酶聚集体共固定化 NAD+ NADH氧化酶辅因子原位再生

木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的共固定化及在手性合成中的应用

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木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的共固定化及在手性合成中的应用

作者：洪伟杰浙江工业大学

学位级别：硕士

本文首先对限氮培养基在富氧环境下培养黄孢原毛平革菌同时合成木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的条件进行了研究，在此基础上研究了双酶的初步分离纯化、共固定化以及在手性合成中的应用。本文采用限氮培养基在富氧环境下培养黄孢... 详细信息

本文首先对限氮培养基在富氧环境下培养黄孢原毛平革菌同时合成木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的条件进行了研究，在此基础上研究了双酶的初步分离纯化、共固定化以及在手性合成中的应用。本文采用限氮培养基在富氧环境下培养黄孢原毛平革菌合成木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶，实验表明：葡萄糖和酒石酸铵分别为最佳碳、氮源;最佳碳源浓度为15g／L和10g／L时;最佳氮源浓度为0.2g／L和0.3g／L(分别对应于木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的合成);最佳维生素B、Tween-80和苯甲醇浓度分别为3mg／L、0.05％和5.0mmol／L。最佳装液量为50ml／250ml三角瓶;两天后培养基的最佳倾液量为50％，最佳通氧频率为1次／天，最佳摇床转速为80rpm，最佳接种量为3×10／瓶，最佳温度为37℃。在最优培养条件下，木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶的酶活分别达到448.3U／L和27.34U／L。采用先除多糖，再超滤浓缩，最后盐析的方法对木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶进行了初步的分离纯化。结果表明：1／3体积的冷丙酮和一次冻溶为最佳除多糖方法;超滤浓缩后的酶液在60％饱和硫酸铵浓度下的盐析效果最佳，木素过氧化物酶和乙二醛氧化酶均获得最高的比酶活，分别达6042.6U／g和513.63U／g。

关键词：木素过氧化物酶乙二醛氧化酶共固定化手性合成 1’1-联-2-萘酚苯甲亚砜