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NMN转移酶和乙醇脱氢酶共固定化及其动力学特性

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精细化工 2019年第7期36卷 1346-1351页

作者：余带兵李红梅杨娟高露姣孙十凡上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 东海水产研究所上海200093

采用磁性纳米颗粒对烟酰胺单核苷酸(NMN)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了考察。结果显示:双酶最佳共固定化反应条件为:NMN转移酶和乙醇... 详细信息

采用磁性纳米颗粒对烟酰胺单核苷酸(NMN)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了考察。结果显示:双酶最佳共固定化反应条件为:NMN转移酶和乙醇脱氢酶添加量分别为6.5U/mg和10.3U/mg,体系pH控制在5.0~7.0,25℃固定化2 h,NADH产率可达到87%,与游离酶的催化产率73%相比提高了14%。所得共固定化双酶在连续使用11次后,剩余酶活仍保留在61.1%左右,表明共固定化酶具有较好的操作稳定性。双酶动力学方程推导与验证结果表明:共固定化双酶反应体系符合米氏方程,其动力学反应速率取决于固定化乙醇脱氢酶的反应速率。

关键词： NADH 磁性纳米颗粒 NMN转移酶乙醇脱氢酶共固定化生物工程

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共固定化酵母和黑曲霉的淀粉酒精发酵

工业微生物 1990年第6期20卷 8-13页

作者：陈佩华蒋承浚

共固定化纳米酶的制备及其在级联催化反应中的应用研究进展

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现代食品科技 2022年第11期38卷 358-366页

作者：刘英语程爱迪吴酉芝韩帅彭飞南昌大学食品学院江西南昌330047 上海中侨职业技术大学食品药品学院上海201514

级联酶复合体可通过构建底物通道的方式加快催化效率,已经成功应用在合成医药、化妆品、功能性食品等不同工业领域。生物酶可参与的催化反应种类丰富而且是现代合成化学中的绿色经济型可持续生产工具,但在工业化生产中,固定化级联酶复... 详细信息

级联酶复合体可通过构建底物通道的方式加快催化效率,已经成功应用在合成医药、化妆品、功能性食品等不同工业领域。生物酶可参与的催化反应种类丰富而且是现代合成化学中的绿色经济型可持续生产工具,但在工业化生产中,固定化级联酶复合体更适合大规模生产,因为固定化技术不仅能够提高酶催化反应效率,还有利于提高酶稳定性以及简化生物催化剂的回收使用。最值得注意的是,酶催化性能、固定化方法、相关反应动力学特性均是酶复合体的活性和稳定性的关键影响因素。综合生物学和材料学领域的研究进展,如兼具纳米特性和稳定性能的载体材料的研发,级联酶共固定化技术将充分平衡各催化组分,从而设计出理想的酶复合体催化机器。因此,该研究结合键联方式和载体材料就近年来多酶的共固定化技术研究发展和相关领域应用进行了综述。

关键词：多酶级联共固定化生物催化纳米酶

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共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶的研究

食品工业科技 2008年第7期29卷 82-84,87页

作者：刘芳杨瑞金张文斌卢蓉蓉张萃荟费颖食品科学与技术国家重点实验室(江南大学) 江苏无锡214122 江南大学食品学院江苏无锡214122

研究了明胶-戊二醛法在共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶中的应用,并与开孔明胶法、卡拉胶包埋法进行了比较。进一步研究pH、明胶质量浓度、前交联中戊二醛的体积分数和二次交联的时间对明胶-戊二醛法共固定乳糖酶和葡萄糖异构酶的影响。... 详细信息

研究了明胶-戊二醛法在共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶中的应用,并与开孔明胶法、卡拉胶包埋法进行了比较。进一步研究pH、明胶质量浓度、前交联中戊二醛的体积分数和二次交联的时间对明胶-戊二醛法共固定乳糖酶和葡萄糖异构酶的影响。结果表明,共固定化的最佳条件为:pH8.6,明胶浓度27%(w/w),前交联戊二醛体积分数0.15%和二次交联时间10min。在此条件下共固定化,乳糖酶的活力回收率为30.85%,葡萄糖异构酶的活力回收率为83.48%。共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶用于制备乳果糖,间歇操作6批次后酶活力仍然保持在初始活力的75%以上。

关键词：乳糖酶葡萄糖异构酶共固定化明胶乳果糖

共固定化单宁酶和β-葡萄糖苷酶对茶饮料增香和除混效果的研究

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食品与发酵工业 2005年第5期31卷 125-129页

作者：苏二正夏涛张正竹黄继轸胡颍蕙安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室

以海藻酸钠为载体,采用交联-包埋-交联的方法共固定化了单宁酶和β-葡萄糖苷酶,2种酶的活力回收率分别为67·3%和46·0%。将共固定化酶应用于茶饮料的除混和增香,结果表明,经共固定化酶处理后,绿茶、红茶、乌龙茶3类茶的香精油总量均有... 详细信息

以海藻酸钠为载体,采用交联-包埋-交联的方法共固定化了单宁酶和β-葡萄糖苷酶,2种酶的活力回收率分别为67·3%和46·0%。将共固定化酶应用于茶饮料的除混和增香,结果表明,经共固定化酶处理后,绿茶、红茶、乌龙茶3类茶的香精油总量均有所增加,其中以绿茶的香精油总量增加最多,增长率达20·69%,乌龙茶和红茶分别为10·30%,6·79%;3类茶的非酯型儿茶素含量增加,增幅依次为绿茶(52·17%)>红茶(12·94%)>乌龙茶(8·83%),而酯型儿茶素的含量下降,降幅依次为绿茶(20·0%)>乌龙茶(16·68%)>红茶(5·04%);实验中还研究了用共固定化酶处理绿茶饮料的抗沉淀效果,未经共固定化酶处理的绿茶饮料低温时的浊度比经共固定化酶处理的要高,贮藏3个月,经共固定化酶处理的绿茶的澄清度一直很高,而未经共固定化酶处理的绿茶在60d后有少许沉淀产生。

关键词： β-葡萄糖苷酶共固定化单宁酶增香酯型儿茶素绿茶饮料酶处理乌龙茶海藻酸钠沉淀效果香精油红茶回收率酶应用增长率澄清度交联含量混和

羧基改性多孔磁性壳聚糖微球共固定化葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶

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功能材料 2022年第2期53卷 2146-2155页

作者：柳有财蔡俊湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室工业发酵湖北省协同创新中心工业微生物湖北省重点实验室武汉430068

壳聚糖分子链上的活性基团数量有限,为了进一步增加壳聚糖的载酶量及固定化酶的生物催化稳定性,以3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二酸酐(GA)为表面修饰剂,制备得到新型羧基功能化多孔磁性壳聚糖微球(carboxyl modified porous magneti... 详细信息

壳聚糖分子链上的活性基团数量有限,为了进一步增加壳聚糖的载酶量及固定化酶的生物催化稳定性,以3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二酸酐(GA)为表面修饰剂,制备得到新型羧基功能化多孔磁性壳聚糖微球(carboxyl modified porous magnetic chitosan microspheres,PMCSM-COOH),成功共固定化了葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)与过氧化氢酶(catalase,CAT)。研究表明,在PMCSM-COOH/GOD/CAT质量比为100/9.34/10.78时,GOD相对酶活达到最高为131.91%±0.58%。与游离酶相比,共固定化酶的温度稳定性、酸碱稳定性与储藏稳定性均有所提升,与底物的亲和力也有所增强,重复使用10次后仍保留着较高的相对酶活,为79.16%±1.98%。游离酶与固定化酶二级结构表明,固定化酶的α-螺旋相对含量高于游离GOD,这使得固定化酶具有更好的刚性结构,其稳定性优于游离酶。

关键词：多孔微球改性共固定化葡萄糖氧化酶过氧化氢酶

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共固定化双菌种发酵海藻酒的研究

浙江大学学报（农业与生命科学版） 1997年第S1期23卷 82-86页

作者：王克明张冠生烟台大学生物化学系山东省莱州市酿造厂

采用酿酒酵母和产香酵母共固定化发酵海藻，酿造海藻酒．对游离细胞与固定化细胞的分批发酵和连续发酵的动力学进行了研究并建立了相应的发酵动力学方程．实验结果表明：酿酒酵母和产香酵母两种菌种的菌量最佳配比为４∶１，发酵温度２... 详细信息

采用酿酒酵母和产香酵母共固定化发酵海藻，酿造海藻酒．对游离细胞与固定化细胞的分批发酵和连续发酵的动力学进行了研究并建立了相应的发酵动力学方程．实验结果表明：酿酒酵母和产香酵母两种菌种的菌量最佳配比为４∶１，发酵温度２０℃，共固定化细胞分批发酵和连续发酵凝胶粒的充填系数分别为０．２５和０．５，游离混合细胞的发酵时间为７ｄ，共固定化细胞连续发酵稀释速率为０．１２／ｈ，其发酵时间约为０．５ｄ．

关键词：共固定化双菌种海藻酒发酵动力学

ZIF-8@纤维素酶-细胞共固定化体系的构建及强化丁酸合成的应用

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食品与生物技术学报 2022年第10期41卷 77-86页

作者：王雨薇尹成泰刘婷婷江凌南京工业大学食品与轻工学院江苏南京211816 南京工业大学海外教育学院江苏南京211816 南京工业大学材料化学工程国家重点实验室江苏南京211816

酶-细胞共固定化作为多酶固定化策略的拓展,因其能分层包埋固定化酶和细胞不同生物分子从而强化系统催化性能,成为现阶段酶工程研究的新热点。为了将这一新技术用来强化丁酸的合成,作者基于仿生矿化法构建沸石咪唑酯骨架(zinc zeolitic ... 详细信息

酶-细胞共固定化作为多酶固定化策略的拓展,因其能分层包埋固定化酶和细胞不同生物分子从而强化系统催化性能,成为现阶段酶工程研究的新热点。为了将这一新技术用来强化丁酸的合成,作者基于仿生矿化法构建沸石咪唑酯骨架(zinc zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)分隔包覆纤维素酶和酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum,Ct),制备ZIF-8@纤维素酶-Ct共固定化体系。通过SEM、FT-IR、XRD等技术表征以及进行酶解、发酵实验的分析验证,该体系具有更优的同步糖化发酵性能。结果表明:在最适条件(40℃、pH 4.5)下,底物玉米芯水解率达56.02%,葡萄糖转化率为85.61%;进一步置于不同的pH和氧气体积分数下,发现有ZIF-8@纤维素酶包覆的细胞具有更高、更稳定的比生长率和相对细胞活力以及较低的相对活性氧水平,丁酸在32 h内产量达到6.74 g/L,比未固定化细胞提高了12.52%。

关键词：纤维素酶酪丁酸梭菌沸石咪唑酯骨架共固定化

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共固定化酶制备奶香基料的研究

中国乳品工业 2018年第5期46卷 27-30页

作者：陈萧萧黄敏玲汪薇任文彬白卫东刘功良仲恺农业工程学院轻工食品学院广州510225

研究了共固定化酶对制备奶香基料的影响。结果表明:在该共固定化酶的催化作用下,制备奶香基料的最佳工艺条件为:共固定化酶的添加量为黄油的质量的100%,酶解时间为2 h,酶解温度是40℃。该条件下得到的酶解产物奶味浓厚、能耐高温、留香... 详细信息

研究了共固定化酶对制备奶香基料的影响。结果表明:在该共固定化酶的催化作用下,制备奶香基料的最佳工艺条件为:共固定化酶的添加量为黄油的质量的100%,酶解时间为2 h,酶解温度是40℃。该条件下得到的酶解产物奶味浓厚、能耐高温、留香时间长。

关键词：奶香基料黄油共固定化酶解