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六君子汤干预4NQO诱导食管癌模型小鼠的血清代谢组学研究

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 461-470页

作者：尚艺婉陈星武颖烁周哲旭刘洋刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学中医学院(仲景学院) 河南郑州450046 南阳医学高等专科学校河南南阳473000 河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室河南郑州450046

基于血清代谢组学探讨六君子汤治疗4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline-N-oxide,4NQO)诱导食管癌模型小鼠的作用机制。选取35~45日龄小鼠100只,随机分为空白组、模型组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组、六君子汤高浓度组。除... 详细信息

基于血清代谢组学探讨六君子汤治疗4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline-N-oxide,4NQO)诱导食管癌模型小鼠的作用机制。选取35~45日龄小鼠100只,随机分为空白组、模型组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组、六君子汤高浓度组。除空白组外,其余小鼠自由饮用100μg·mL^(-1)的4NQO溶液16周,构建食管癌小鼠模型。六君子汤低、中、高浓度组分别用药物质量分数为18.2、36.4、54.6 g·kg^(-1)的定制饲料喂养,称量各组小鼠体质量和脏器质量计算脏器指数;采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察各组小鼠食管组织病理改变;超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS/MS)进行小鼠血清样本的代谢物采集,筛选潜在生物标志物及分析相关代谢通路。结果显示,模型组小鼠脾脏、胃脏器指数明显降低,肺、食管、肾的脏器指数明显升高,与模型组相比,六君子汤各浓度脏器指数无明显变化;HE结果显示,六君子汤能改善小鼠食管癌细胞浸润性生长及癌变情况;血清代谢组学分析筛选出9种六君子汤干预食管癌小鼠的潜在生物标志物,分别为尿刊酸(urocanic acid,UCA)、1-油酰甘油磷酸丝氨酸(1-oleoylglycerophosphoserine)、11-脱氧前列腺素E1(11-deoxy prostaglandin E1)、多肽链Leu-Glu-Lys-Glu、(±)4-羟基-5E,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-二十二碳六烯酸[(±)4-HDHA]、脲基琥珀酸(ureidosuccinic acid)、泛酸[(2R)-2,4-dihydroxy-3,3-dimethylbutanoic acid]、犬尿酸(kynurenic acid)和双环前列腺素E2(bicyclo prostaglandin E2),涉及的通路包括组氨酸、嘧啶、丙氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、泛酸和色氨酸代谢及辅酶a生物合成等。六君子汤对4NQO诱导的食管癌模型小鼠发挥治疗作用,其作用机制可能与调节小鼠体内氨基酸代谢、炎症反应和免疫功能有关。

关键词：六君子汤食管癌血清代谢组学 4-硝基喹啉-N-氧化物

六君子汤改善肿瘤环境下C2C12成肌细胞分化的分子机制

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中华中医药学刊 2024年

作者：郝羚伦张艳彭梦薇桑亚洲陈玉龙刘燕吴耀松河南中医药大学河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室天津市天津中医药大学武汉市华中科技大学

目的：研究六君子汤改善肿瘤环境下C2C12成肌细胞分化的分子机制，为健脾和胃法治疗肿瘤恶病质肌肉萎缩提供实验基础。方法：诱导成肌细胞C2C12分化，倒置显微镜观察分化后肌管长度；成肌细胞C2C12与肺癌细胞Lewis共培养，分为空白组、... 详细信息

目的：研究六君子汤改善肿瘤环境下C2C12成肌细胞分化的分子机制，为健脾和胃法治疗肿瘤恶病质肌肉萎缩提供实验基础。方法：诱导成肌细胞C2C12分化，倒置显微镜观察分化后肌管长度；成肌细胞C2C12与肺癌细胞Lewis共培养，分为空白组、模型组、叉头框蛋白O1（Forkhead box protein O1，FoxO1）抑制剂组、六君子汤组、联合用药组，蛋白免疫印迹法（Western Blot，WB）检测C2C12细胞成肌分化抗原（myogenic differentiation antigen，MyoD)的表达及与过氧化物酶体增殖物受体γ辅助激活因子α（Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha，PGC-1α）/FoxO1通路相关的蛋白表达；电子显微镜观察C2C12细胞线粒体数量及超微结构的变化；流式细胞术(flow cytometry，FCM)观测C2C12细胞线粒体膜电位的变化；实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR，qPCR)法检测C2C12细胞PGC-1α/FoxO1通路相关分子mRNA。结果：C2C12细胞于分化48h肌管横径最长；与空白组比，模型组C2C12细胞MyOD蛋白表达明显减少（P＜0.05），线粒体数量减少（P六君子汤组C2C12细胞MyOD蛋白表达明显增高，FoxO1抑制剂组、六君子汤组、联合用药组中C2C12细胞线粒体数量显著增多（P六君子汤组及联合用药组中C2C12细胞FoxO1蛋白表达明显减少，PGC-1α、FTO、mTOR、tFAM蛋白表达明显增高（P＜0.05）；与六君子汤组比，联合用药组C2C12细胞PGC-1α蛋白表达升高（P＜0.05）。结论：六君子汤通过调控PGC-1α/FoxO1信号通路，能维持线粒体功能，改善肿瘤环境下成肌细胞分化。

关键词：六君子汤 PGC-1α/FoxO1 线粒体肿瘤恶病质肌肉萎缩

六君子汤治疗胃癌的临床疗效与作用机制研究进展

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中华中医药学刊 2023年第7期41卷 107-111页

作者：周恩慧许二平张楠康丽杰杨雪静丁娜娜李益东河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046 河南中医药大学中医学院河南郑州450046

胃癌(Gastric carcinoma, GC)是指原发于胃的上皮源性恶性肿瘤,是世界上发病率较高的恶性肿瘤之一。现代医学多采取手术切除、放化疗、靶向治疗等手段治疗胃癌,但在提高患者生存率的同时,易损耗元气,造成身体脏腑功能紊乱、免疫力下降... 详细信息

胃癌(Gastric carcinoma, GC)是指原发于胃的上皮源性恶性肿瘤,是世界上发病率较高的恶性肿瘤之一。现代医学多采取手术切除、放化疗、靶向治疗等手段治疗胃癌,但在提高患者生存率的同时,易损耗元气,造成身体脏腑功能紊乱、免疫力下降、消化道反应等并发症。近年来,中医药防治肿瘤已成为研究的热点,中药具有扶正抑癌、调理脏腑功能、平衡气血阴阳的作用,在手术前后及配合放化疗阶段应用较广。六君子汤具有益气健脾、燥湿化痰之功,尤宜于胃癌脾胃气虚证。从临床和实验研究两方面对六君子汤治疗胃癌的研究进展进行梳理。临床研究发现,六君子汤可以改善胃癌前病变(Precancerous lesion of gastric cancer, PLGC),防止胃癌发生;提高胃癌患者机体免疫和生存质量;治疗胃癌术后并发症,促进术后患者康复;减轻胃癌化疗后消化道不良反应,提升化疗效果。实验研究发现,六君子汤具有调节炎症因子、保护胃黏膜;调节胃肠激素水平、改善胃内微生态环境;抑制胃癌细胞增殖、促进胃癌细胞凋亡;减少胃黏膜损伤、缓解胃肠高敏状态的作用。通过归纳整理,以期为后续相关临床评价、机制研究提供有益参考与借鉴。

关键词：胃癌六君子汤临床研究实验研究

陈皮黄酮类成分对六君子汤干预脾虚大鼠胃肠激素及CD3+、TFF3 mRNA表达水平的贡献研究

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中国中药杂志 2022年第4期47卷 951-958页

作者：吕邵娃李影于新郭玉岩杨大宇孙爽尚尔雨黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省森林保护研究所黑龙江哈尔滨150040

该文旨在建立15批六君子汤中陈皮黄酮类成分的"谱-效"关系模型,并统计分析出化学峰与药效之间的相关性,寻找出发挥药效的主要化学成分。首先应用HPLC构建15批六君子汤中陈皮黄酮类成分的指纹图谱,采用Venusil XBP C_(18)(L)(4.6 mm×250... 详细信息

该文旨在建立15批六君子汤中陈皮黄酮类成分的"谱-效"关系模型,并统计分析出化学峰与药效之间的相关性,寻找出发挥药效的主要化学成分。首先应用HPLC构建15批六君子汤中陈皮黄酮类成分的指纹图谱,采用Venusil XBP C_(18)(L)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长300 nm,柱温30℃,获得化学指纹图谱。同时探讨了15批汤剂中陈皮黄酮类成分对脾虚模型大鼠的胃肠激素GAS、MTL、VIP含量、TFF3 mRNA表达量以及T淋巴免疫细胞CD3^(+)百分率的影响,采用灰度分析法分别建立谱效关系模型。结果显示对胃肠道调节作用贡献较大的主要特征峰为峰16(维采宁-2)、峰63(甜橙黄酮)、峰64(异甜橙黄酮)、峰65(川陈皮素)、峰67(3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮)、峰68(橘皮素)、峰69(5-去甲川陈皮素)。因此,六君子汤中陈皮的黄酮类成分与药效之间呈线性相关,且多成分共同发挥药效,该研究可为探索六君子汤中陈皮"要补气、先理气"作用的物质基础提供一种新思路。

关键词：六君子汤陈皮指纹图谱谱效关系灰度分析法

六君子汤联合西医疗法治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的有效性和安全性随机对照试验的系统评价和Meta分析

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中国中药杂志 2020年第22期45卷 5331-5343页

作者：范艺龄苗青廖星樊长征樊茂蓉曹庆王宁马秋晓郝娅妮中国中医科学院西苑医院北京100091 中国中医科学院中医临床基础医学研究所循证医学基础研究室北京100700 北京中医药大学北京100029

为评价六君子汤联合西医疗法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期有效性和安全性。该研究系统检索三大英文数据库和四大中文数据库,检索时间均从建库至2020年4月1日,根据预先确定的纳排标准筛选相关的随机对照试验(RCT),并提取资料。采用"... 详细信息

为评价六君子汤联合西医疗法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期有效性和安全性。该研究系统检索三大英文数据库和四大中文数据库,检索时间均从建库至2020年4月1日,根据预先确定的纳排标准筛选相关的随机对照试验(RCT),并提取资料。采用"Cochrane偏倚风险评估工具"对所纳入研究进行方法学质量评价。应用RevMan 5.3软件进行数据分析。结果共检索出401篇文献,最终纳入17个RCTs,总样本量1 447例,纳入研究总体质量不高。Meta分析结果显示,在降低中医症状积分方面,六君子汤联合西医常规治疗或沙美特罗替卡松粉吸入剂优于单独使用西医常规治疗或沙美特罗替卡松粉吸入剂;在降低改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)分级方面,六君子汤联合沙美特罗替卡松粉吸入剂优于单独使用沙美特罗替卡松粉吸入剂;在降低慢性阻塞性肺疾病患者自我评估测试问卷(CAT)评分方面,六君子汤联合西医常规治疗优于单独使用西医常规治疗;在延缓第1秒用力呼气容积(FEV1)或其占预计值%下降方面,六君子汤联合西医常规治疗或沙美特罗替卡松粉吸入剂优于单独使用西医常规治疗或沙美特罗替卡松粉吸入剂;在延缓FEV1与用力肺活量之比(FEV1/FVC)下降方面,六君子汤联合西医常规治疗优于单独使用西医常规治疗,而六君子汤联合沙美特罗替卡松粉吸入剂与单独使用沙美特罗替卡松粉吸入剂无统计学差异;在降低急性加重率方面,六君子汤联合沙美特罗替卡松粉吸入剂与单独使用沙美特罗替卡松粉吸入剂无统计学差异。其他结局指标或者六君子汤联合其他西医疗法,由于仅纳入1项研究,无法进行Meta分析,而无法得出结论。由于部分研究未提及不良反应,故不能对六君子汤联合西医疗法的安全性作出肯定性评价。受纳入文献质量、数量的限制,六君子汤联合西医疗法治疗COPD稳定期的有效性仍需更多高质量的研究去证实,且其安全性有待进一步验证。

关键词：六君子汤慢性阻塞性肺疾病稳定期系统评价 Meta分析有效性安全性

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和UPLC的六君子汤化学成分定性与定量分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 169-178页

作者：姜奇瑶刘臣臣陈惠玲黄志峰赵威梁颖潘华峰卓越广州中医药大学科技创新中心广州510405 广州中医药大学第一附属医院广州510405 广东工商职业技术大学广东肇庆526100

目的:建立六君子汤化学成分的定性与定量分析方法,明确六君子汤的物质基础。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对六君子汤中的化学成分进行定性分析,利用MassBank、PubChem、ChemSpider、中药系统... 详细信息

目的:建立六君子汤化学成分的定性与定量分析方法,明确六君子汤的物质基础。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对六君子汤中的化学成分进行定性分析,利用MassBank、PubChem、ChemSpider、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库并结合相关文献对所得化合物进行鉴定。采用UPLC建立六君子汤中甘草苷、橙皮苷、党参炔苷、甘草素、甘草酸、川陈皮素、桔皮素、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ的定量分析方法并进行分析。结果:结合相关文献、数据库检索和质谱信息,从六君子汤中共鉴定出79个化合物,包括黄酮类31个,萜类15个,含氮化合物14个,苯丙素类6个,有机酸类6个和其他类化合物7个。建立的定量分析方法中9种代表性成分在各自线性范围内线性关系良好,精密度、稳定性、重复性及加样回收率均符合要求,定量结果显示,甘草苷、橙皮苷、党参炔苷、甘草素、甘草酸、川陈皮素、桔皮素、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ在六君子汤中的质量分数分别为0.3765、2.6021、0.0826、0.1281、1.7786、0.0157、0.0067、0.0304、0.0032 mg·g^(-1)。结论:建立的方法可以快速、灵敏、准确地对六君子汤中的化学成分进行分析,明确了六君子汤的物质基础以黄酮类、萜类及含氮化合物为主,并可对其中的9种成分进行定量,可为该方的质量控制、作用机制及临床应用研究奠定基础。

关键词：六君子汤冻干粉超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS) 化学成分定量分析定性分析黄酮类

六君子汤合二陈汤加减对冠心病患者Hcy,NO,hs-CRP的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第18期26卷 24-29页

作者：胡芳沈金峰刘中勇江西中医药大学南昌330006 温岭市第一人民医院浙江温岭317500 江西中医药大学附属医院南昌330006

目的:通过观察血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy),一氧化氮(nitric oxide,NO),高敏-C反应蛋白(highsensitivity C-reactive protein,hs-CRP)与冠脉病变数量及程度的关系及其运用六君子汤联合二陈汤加减对冠心病(coronary heart disease,CHD)患者Hcy,NO,hs-CRP的影响,探讨六君子汤联合二陈汤加减对CHD患者的保护作用。方法:选取来自江西中医药大学附属医院2016年11月至2019年4月心血管科住院CHD(痰浊内阻型)患者76例,分析Hcy,NO,hs-CRP与冠脉病变数量及程度的关系。以抽签方式,将76例患者随机分为观察组和对照组,每组各38例患者。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在常规治疗基础上服用六君子汤合二陈汤加减,周期为3个月。评估两组服药前后中医症状评分;检测两组患者服药前后Hcy,NO,hs-CRP,甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL),高密度脂蛋白(HDL),总胆固醇(TC),载脂蛋白A1(Apo A1),载脂蛋白B(Apo B),N末端B型利钠肽原(NT-proBNP),左心室射血分数(LVEF)指标。结果:Hcy,hs-CRP水平与冠脉病变支数及程度呈正相关。NO水平与冠脉病变支数及程度负相关关系。与本组治疗前比较,两组患者治疗后中医症状评分均有不同程度下降(P六君子汤联合二陈汤加减可能是通过抑制CHD患者的Hcy,hs-CRP及提高CHD患者的NO水平,从而降低患者血脂,提高患者心功能,改善患者临床症状。

关键词：六君子汤二陈汤冠心病同型半胱氨酸(Hcy) 一氧化氮(NO) 高敏-C反应蛋白(hs-CRP)

六君子汤联合化疗治疗中晚期NSCLC疗效的Meta分析

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南京中医药大学学报 2021年第6期37卷 912-919页

作者：邱汉波覃凤飞郭东霖周尧红赵艺蔓张颖郑景辉侯恩存广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011

目的系统评价六君子汤联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应。方法检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库有关六君子汤联合化疗(试验组)与单纯化疗(对照组)治疗... 详细信息

目的系统评价六君子汤联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应。方法检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库有关六君子汤联合化疗(试验组)与单纯化疗(对照组)治疗中晚期NSCLC的随机对照试验(RCT)。采用RevMan5.3进行Meta分析。结果共纳入16项RCT。Meta分析结果显示,临床疗效:[RR=1.22,95%CI(1.08,1.38),P六君子汤联合化疗能减轻中晚期NSCLC患者不良反应,改善血清肿瘤标记物、血液学指标,提高患者临床疗效以及患者生存质量等,此数据仍需后期大量临床研究证实。

关键词：六君子汤非小细胞肺癌化疗 Meta分析

基于AKT/mTOR通路探讨六君子汤抑制EC9706生长的作用机制

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 180-185页

作者：尚艺婉武颖烁孟丹华陈星刘洋周哲旭刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学中医学院(仲景学院) 郑州450046 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室郑州450046

目的:探讨六君子汤对食管癌细胞EC9706的生长抑制作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测六君子汤对EC9706细胞的活性抑制作用,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期分布,Seahorse能量代谢分析系统检测细胞糖酵解速率和线粒体压力,实时荧光定量P... 详细信息

目的:探讨六君子汤对食管癌细胞EC9706的生长抑制作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测六君子汤对EC9706细胞的活性抑制作用,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期分布,Seahorse能量代谢分析系统检测细胞糖酵解速率和线粒体压力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和蛋白激酶B1(AKT1)mRNA相对表达,Western Blot检测各组细胞磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、mTOR和AKT1/2/3蛋白相对表达。结果:六君子汤浓度为200、300、400μg/mL时可显著抑制EC9706细胞活性(P六君子汤150、200μg/mL用于后续实验。流式细胞术结果表明,六君子汤可显著促进EC9706细胞凋亡(P六君子汤200μg/mL可显著延长细胞S期,缩短G2/M期(P六君子汤200μg/mL可显著抑制EC9706细胞的基础糖酵解、补偿糖酵解和糖酵解潜能(P六君子汤150μg/mL可显著抑制EC9706细胞ATP合成耗氧、基础呼吸值和非线粒体耗氧(P六君子汤200μg/mL可显著抑制EC9706细胞的ATP合成耗氧、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧和备用呼吸能力(P六君子汤150、200μg/mL可使EC9706细胞mTOR mRNA相对表达显著降低(P六君子汤200μg/mL使EC9706细胞AKT1mRNA相对表达显著降低(P六君子汤150、200μg/mL可显著抑制p-mTOR和AKT1/2/3蛋白相对表达(P六君子汤200μg/mL可显著抑制mTOR蛋白相对表达(P六君子汤可通过干预AKT/mTOR通路促进食管癌细胞EC9706凋亡,诱导细胞周期阻滞,抑制细胞的能量代谢和生长。

关键词：食管癌六君子汤 EC9706 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白