检索结果-南通市图书馆

作物学报 2011年第5期37卷 924-928页

作者：郭慧娟陈锋董中东崔党群河南农业大学农学院/河南省粮食作物生理生态与遗传改良国家重点实验室培育基地河南郑州450002

硬粒小麦籽粒中黄色素含量与硬粒小麦面制品的加工品质关系较为密切,研究控制小麦黄色素含量基因的等位变异、选育高黄色素含量品种是硬粒小麦品质育种的重要目标。以来自不同国家的177份硬粒小麦品种为材料,采用特异引物的PCR扩增技术... 详细信息

硬粒小麦籽粒中黄色素含量与硬粒小麦面制品的加工品质关系较为密切,研究控制小麦黄色素含量基因的等位变异、选育高黄色素含量品种是硬粒小麦品质育种的重要目标。以来自不同国家的177份硬粒小麦品种为材料,采用特异引物的PCR扩增技术,利用与黄色素含量有关的PSY基因功能性标记YP7A-2、YP7B-1、YP7B-2、YP7B-3和YP7B-4,分别对参试小麦品种中7A和7B染色体上Psy-A1和Psy-B1基因的等位变异类型进行了检测。结果表明,位于硬粒小麦7A染色体上的Psy-A1的变异类型较为单一,只有Psy-A1d和Psy-A1e两种类型,分布频率分别为76.8%和23.2%;而位于硬粒小麦7B染色体上的Psy-B1的变异类型有6种,分别为Psy-B1b、Psy-B1c、Psy-B1d、Psy-B1e、Psy-B1f和Psy-B1g,分布频率分别为9.0%、0.6%、0.6%、6.8%、25.4%和57.6%。其中,Psy-B1b、Psy-B1c和Psy-B1d首次在硬粒小麦品种中被发现,这在一定程度上丰富了硬粒小麦品种Psy1基因多态性。有34个品种含有Psy-A1d/Psy-B1f、12个品种含有Psy-A1d/Psy-B1g和1个品种含有Psy-A1d/Psy-B1c的基因型组合,为高黄色素含量品种;有28个品种含有Psy-A1e/Psy-B1g和1个品种含有Psy-A1e/Psy-B1b基因型组合,为低黄色素含量品种。本研究结果为硬粒小麦品质育种提供了重要的材料资源。

关键词：硬粒小麦八氢番茄红素合酶黄色素功能标记

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小麦品种黄色素含量和多酚氧化酶活性基因的分子标记检测

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麦类作物学报 2011年第1期31卷 47-53页

作者：胡凤灵何中虎葛建贵姜文武时萍夏先春安徽省六安市农业科学研究所安徽六安237000 中国农业科学院作物科学研究所国家小麦改良中心北京100081 CIMMYT中国办事处北京100081

为了改良小麦加工品质、提高小麦育种效率,利用位于7AL和7BL染色体上与黄色素含量相关的八氢番茄红素合酶(Phytoene synthase,PSY)基因Psy-A1的标记YP7A、YP7A2-,基因Psy-B1的标记YP7B1-、YP7B2-、YP7B3-、YP7B4-,以及位于2AL染色体上... 详细信息

为了改良小麦加工品质、提高小麦育种效率,利用位于7AL和7BL染色体上与黄色素含量相关的八氢番茄红素合酶(Phytoene synthase,PSY)基因Psy-A1的标记YP7A、YP7A2-,基因Psy-B1的标记YP7B1-、YP7B2-、YP7B3-、YP7B4-,以及位于2AL染色体上的多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)活性基因Ppo-A1的标记PPO18,对221份冬小麦品种(系)进行黄色素含量和多酚氧化酶活性基因的等位变异检测。结果表明:(1)在所检测的小麦品种(系)中,含低黄色素含量等位基因Psy-A1b的材料78份,频率为35.3%;含低黄色素含量等位基因Psy-B1b的材料117份,频率为52.9%;含高黄色素含量等位基因Psy-B1c的材料31份,频率为14.0%;含Psy-B1d等位基因的材料4份,频率为1.8%;未发现携带Psy-B1e的材料。(2)含低PPO活性等位基因Ppo-A1b的材料119份,频率为53.8%。(3)在221份材料中,黄色素含量和多酚氧化酶活性基因型皆符合中国面条和馒头加工品质要求的品种仅25份,聚合多个优良基因的小麦品质改良工作急需加强。本实验使用的标记均为基因特异性功能标记,重复性好,准确率高,可有效地应用于小麦品质改良的分子标记辅助选择。

关键词：小麦黄色素含量八氢番茄红素合酶多酚氧化酶活性分子标记

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β-胡萝卜素加强的转基因水稻培育

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华中农业大学学报 2014年第5期33卷 1-7页

作者：杜丽缺赵明超林拥军陈浩华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学国家植物基因研究中心(武汉) 武汉430070

为了使水稻种子积累维生素A的前体——β-胡萝卜素,将人工合成的来源于欧文氏菌的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtI)和来源于玉米的八氢番茄红素合酶基因(psy)导入水稻中,且在水稻胚乳中特异性表达。结合PCR和Southern blotting的检测结果,... 详细信息

为了使水稻种子积累维生素A的前体——β-胡萝卜素,将人工合成的来源于欧文氏菌的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtI)和来源于玉米的八氢番茄红素合酶基因(psy)导入水稻中,且在水稻胚乳中特异性表达。结合PCR和Southern blotting的检测结果,从psy/crtI转化植株中分离得到1个外源基因单拷贝插入且无选择标记(Marker-free)的纯合转基因家系ky1-4。通过热不对称交错PCR(Tail-PCR)分离得到ky1-4的T-DNA插入位点右边界的侧翼序列,结合Southern blotting检测结果推测该插入位点位于水稻第11号染色体上。超高效液相色谱(UPLC)分析结果表明,psy/crtI转化水稻植株种子中β-胡萝卜素含量为(1.99±0.11)^(4.41±0.30)μg/g,其中ky1-4家系β-胡萝卜素的含量为(3.11±0.08)μg/g。

关键词：水稻维生素A 八氢番茄红素合酶八氢番茄红素脱氢酶黄金米

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β-胡萝卜素和α-生育酚加强的转基因水稻培育

β-胡萝卜素和α-生育酚加强的转基因水稻培育

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作者：杜丽缺华中农业大学

学位级别：硕士

维生素A和维生素E都是人体必需的微量营养素。维生素A缺乏可引起多种症状,最常见的为夜盲症。在人类饮食中,类胡萝卜素作为维生素A的唯一前体,其中的β-胡萝卜素是最主要的维生素A源。而维生素E在防治心脑血管疾病、肿瘤、中枢神经系统... 详细信息

维生素A和维生素E都是人体必需的微量营养素。维生素A缺乏可引起多种症状,最常见的为夜盲症。在人类饮食中,类胡萝卜素作为维生素A的唯一前体,其中的β-胡萝卜素是最主要的维生素A源。而维生素E在防治心脑血管疾病、肿瘤、中枢神经系统疾病、维持人体免疫系统平衡等方面具有广泛的作用。维生素E包括4种不同形式的生育酚和4种不同形式的生育三烯酚(α-,β-,γ-,δ-生育酚和α-,β-,γ-,δ-生育三烯酚)。α-生育酚具有最高的维生素E活性。水稻是世界上重要的粮食作物,是世界上超过一半人口的主食。但水稻中缺乏维生素A且α-生育酚含量低,长期只以水稻为主食而不补充其他营养物质,将导致营养缺乏。鉴于以上原因,本研究的目的在于：将玉米来源的八氢番茄红素合酶基因(psy)和细菌欧文氏菌来源的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtl)转化到水稻中,在水稻胚乳特异性启动子谷蛋白的驱动下表达,从而使得β-胡萝卜素在水稻种子中积累;将玉米来源的γ-生育酚甲基转移酶基因(γ-TMT)转化到水稻中,提高水稻种子中α-生育酚的含量;将水稻种子中β-胡萝卜素积累的psylcrtI转化植株与α-生育酚含量提高的转化植株进行杂交,培育成β-胡萝卜素和α-生育酚加强的转基因水稻。本研究获得的主要结果如下： 1)通过农杆菌介导的遗传转化,将psylcrtI转化载体分别转化到粳稻中花11和空育131品种中,将玉米来源的y-TMT转化载体转化到粳稻中花11品种中。对得到的转化苗进行PCR检测和Southern blotting检测。经PCR筛选,获得35株阳性psylcrtI中花11转化植株,17株阳性psylcrtI空育131转化植株,和35株阳性y-TMT转化植株。经Southern blotting检测,获得13株目标基因单拷贝的psylcrtI中花11转化植株,6株目标基因单拷贝的psylcrtI空育131转化植株,10株目标基因单拷贝的y-TMT转化植株。 2)通过PCR筛选结合Southern blotting检测,从psylcrtI转化植株中分离得到一个外源基因单拷贝插入的marker-free转基因纯合家系ky1-4。通过Tail-PCR的方法分离到其T-DNA插入位点的右侧侧翼序列,又结合Southern blotting检测初步分析推测该插入位点位于水稻第11号染色体上 3)本研究利用超高效液相色谱(UPLC)测定psylcrtl转化植株水稻种子中β-胡萝卜素含量,不同转基因家系p-胡萝卜素含量为1.99±0.11～4.41±0.30μg/g,其中marker-free家系ky1-4种子中β-胡萝卜素含量为3.11±0.08μg/g。 4)筛选出y-TMT基因的水稻T-DNA插入纯合突变体为：5A-3-1、5A-3-15、5A-5-2、5A-5-7、5A-5-16、5A-6-14、5A-6-17、5A-7-12。经Southern blotting检测该突变体含有2个拷贝的外源T-DNA.利用UPLC测定该突变体的叶片和种子中生育酚的含量,叶片中生育酚含量结果表明：对照野生型Dongjin品种的叶片中γ-生育酚含量7.62±0.40μg/g,a-生育酚含量312.88±10.86μg/g;然而,突变体5A-5-7、5A-5-16和5A-6-14叶片中α-生育酚含量都为0.00±0.00μ/g,且突变体5A-5-7、5A-5-16和5A-6-14叶片中γ-生育酚含量分别为200.63±4.25μg/g、229.49±10.52μg/g、204.85±24.00μg/g。种子中生育酚含量结果表明：对照野生型Dongjin品种的种子中γ-生育酚含量0.95±0.05μg/g,α-生育酚含量14.27±0.17μg/g;突变体5A-6-17种子中γ-生育酚含量10.54±0.80μg/g,α-生育酚含量4.414±0.70μg/g;突变体5A-7-12种子中γ-生育酚含量5.77±0.16μg/g,α-生育酚含量10.52±0.08μg/g。 5)利用UPLC测定y-TMT转化植株叶片和种子中生育酚的含量,对照野生型中花11叶片中α-生育酚含量为247.88±5.46μg/g,y-TMT转化植株叶片中最高α-生育酚含量为359.74±7.89μg/g;对照中花11种子中α-生育酚含量为17.40±0.64μg/g,y-TMT转化植株种子中最高α-生育酚含量为20.46±0.79μg/g。

关键词：水稻维生素A 八氢番茄红素合酶八氢番茄红素脱氢酶 γ-生育酚甲基转移酶维生素E

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