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猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法

福建畜牧兽医 2004年第3期26卷 8-10页

作者：黄印尧张长弓孔繁德方莹颜江华厦门出入境检验检疫局 361012 厦门大学抗癌研究中心 361005 厦门市波生生物技术有限公司 361005

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合 ,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金快速检测试纸法” ,用该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒 ,同时对 1 6份猪血液或血清进行抗体水平检测 ,... 详细信息

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合 ,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金快速检测试纸法” ,用该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒 ,同时对 1 6份猪血液或血清进行抗体水平检测 ,符合率达 1 0 0 %。同时使用金标法对 1 0 0份猪血液和对应血清进行检测 ,结果也相同。试验结果显示 ,金标法与ELISA一样 ,具有微量、特异、准确等优点 ,且操作简易 ,而金标法不需要任何仪器 ,检测时间短 ,结果直观 ,容易判定 ,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。

关键词：猪伪狂犬病抗体免疫金标检测试纸法

猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法的建立和应用

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检验检疫科学 2004年第B12期14卷 50-52页

作者：黄印尧孔繁德张长弓颜江华方莹厦门出入境检验检疫局厦门大学抗癌研究中心厦门市波生生物技术有限公司

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金标快速检测试纸法”,该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒同时对16份猪血液或血清进行抗体水平检测,符合率达... 详细信息

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金标快速检测试纸法”,该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒同时对16份猪血液或血清进行抗体水平检测,符合率达100%。同时对100份猪血液和对应血清进行检测,结果也相同。试验结果显示,本法与ELISA一样,具有微量、特异、准确等优点,且操作简易,而本方法不需要任何仪器,检测时间短,结果直观,容易判定,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。

关键词：猪伪狂犬病免疫金标快速检测试纸法急性传染病

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神经肽的免疫电镜新途径

解剖学杂志 1993年第6期16卷 505-508页

作者：彭庆廉张敏海刘胜洪刘汉武同济医科大学组织学与胚胎学教研室武汉430030

一种冷冻替代变法能同时保存好脑垂体后叶的亚微结构及饿酸敏感性神经肽(催产素和血管加压素)的抗原性.可能为神经毡处神经肽的包埋后免疫金标研究提供一种新的简易可靠实用技术.

关键词：神经肽神经毡包埋后免疫金标

大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上Ⅲ型IP3受体的免疫电镜定位分析

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科学技术与工程 2012年第8期20卷 1733-1736页

作者：杨璐卫静黄晓峰焦凯第四军医大学唐都医院内分泌科西安710038 第四军医大学中心实验室西安710032

研究Ⅲ型1,4,5三磷酸肌醇受体(IP3R-Ⅲ型)在大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上的定位。利用免疫电镜技术,5nm胶体金标记IP3R-Ⅲ型抗原后定位观察其分布情况。实验表明在胰岛β细胞中,金颗粒大量定位于胰岛素分泌颗粒的内部及颗粒膜上。在... 详细信息

研究Ⅲ型1,4,5三磷酸肌醇受体(IP3R-Ⅲ型)在大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上的定位。利用免疫电镜技术,5nm胶体金标记IP3R-Ⅲ型抗原后定位观察其分布情况。实验表明在胰岛β细胞中,金颗粒大量定位于胰岛素分泌颗粒的内部及颗粒膜上。在分泌颗粒表面的切线部位,也有金颗粒的聚集。本研究证明胰岛素分泌颗粒存在IP3R-Ⅲ型,提示IP3-IP3R3型可能参与了β细胞胰岛素分泌的调节。

关键词： IP3R-Ⅲ型胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒免疫金标

大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上Ⅲ型IP3受体的免疫电镜定位分析

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大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上Ⅲ型IP3受体的免疫电镜定位分析

作者：杨璐第四军医大学

学位级别：硕士

研究背景糖尿病的发生主要是由于胰岛β细胞分泌胰岛素的绝对或相对不足而引起的。当胰岛β细胞受到内源性或外源性的物质，如葡萄糖、胰高血糖素、乳糖、核糖等刺激后，分泌胰岛素经全身血液循环运输到肌肉、肝脏和脂肪组织等靶组织... 详细信息

研究背景糖尿病的发生主要是由于胰岛β细胞分泌胰岛素的绝对或相对不足而引起的。当胰岛β细胞受到内源性或外源性的物质，如葡萄糖、胰高血糖素、乳糖、核糖等刺激后，分泌胰岛素经全身血液循环运输到肌肉、肝脏和脂肪组织等靶组织和靶器官，与其相应的胰岛素受体结合后，使血糖降低的同时促进糖原、脂肪及蛋白质的合成。既往研究已证明，胰岛β细胞内胰岛素分泌颗粒胞裂外排分泌胰岛素是由胞内Ca浓度的迅速升高而直接引起的。胞内钙库的Ca释放和胞膜上钙通道的Ca内流是胞内Ca升高的主要来源。胰岛β细胞中存在多种钙库[1]，如IP(Inositol-1,4,5-triphosphate，三磷酸肌醇)敏感钙库、兰诺定(ryanodine)敏感钙库、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)敏感钙库及线粒体钙库等。在小鼠胰腺细胞上首次发现了IP敏感钙库，后来经研究证实，在神经、心肌、骨骼肌等多种细胞中都存在。IPR(IPReceptor)是存在于内质网及核膜上的一种配体门控Ca释放通道蛋白，研究发现在小鼠胰岛β细胞内胰岛素分泌颗粒上也存在IPR。分泌颗粒作为β细胞内含钙量最高的钙库，里面有大量的钙离子沉积。颗粒膜与质膜融合发生胞吐时，钙离子可伴随胰岛素内容物一起外排，从而保持质膜内外钙离子的动态平衡。而此过程可能是通过激活分泌颗粒膜上IP3R实现的。关于分泌颗粒是如何准确的参与并调节胰岛素分泌，从而控制机体生理活动的过程，目前尚不清楚，相关研究报道也甚少，并且仍有人质疑IP3R是否确实存在于分泌颗粒上。因此，本研究参考并改进了Blondel[2]的实验设计，应用胶体金免疫电镜的技术对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒的IP3R-Ⅲ型进行定位分析，进一步明确分泌颗粒上IPR-Ⅲ型的存在，提示IP3-IP3RⅢ型可能参与了β细胞胰岛素分泌的调节，为科室的进一步实验研究IP3R与胰岛素分泌的关系作出铺垫。目的应用胶体金免疫电镜的技术对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒的IPR-Ⅲ型进行定位分析，明确分泌颗粒上是否存在IPR-Ⅲ型。为进一步揭示分泌颗粒的生理意义打下基础。方法 1.雄性SD大鼠经胰腺胆总管逆行灌注Ⅴ型胶原酶溶液充分消化后，Histopaque-1077纯化获得充盈的胰腺。 2.双硫腙溶液鉴定胰岛。 3.胰岛标本经固定后电镜制样。 4.免疫组织化学染色，一抗为兔抗大鼠IPR-Ⅲ型抗体，二抗为5nm胶体金标记的山羊抗兔IgG。对照组的一抗为TBS(pH7.4)，其他步骤相同。 5.经过醋酸铀、枸橼酸铅轻度复染后通过透射电子显微镜技术观察5nm金颗粒在胰岛β细胞的胰岛素分泌颗粒上的分布情况。结果 1.用双硫腙染色后的胰岛细胞团，呈圆形或椭圆形，包膜完整，界限清楚，为不透光实体。双硫腙染色后呈猩红色。每个胰岛直径约为100～300μm。 2.实验组的胰岛β细胞中，金颗粒大量定位于胰岛素分泌颗粒的核心及颗粒膜上。并且内质网上也有少量的胶体金标记。对照组的照片中胰岛素分泌颗粒上无金颗粒标记。结论 1.免疫电镜方法可用于胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上IPR-Ⅲ型的定性分析。 2.胰岛素分泌颗粒上确实存在IPR-Ⅲ型。

关键词： IP3R-Ⅲ型胰岛β细胞 Ca2+ 胰岛素分泌颗粒免疫金标

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幼鼠颌下腺IP_3受体免疫电镜观察

广西医科大学学报 2001年第4期18卷 462-463页

作者：劳明 Godfried M.Roomans 广西医科大学人体解剖学教研室南宁530021

目的 :观察 IP3受体在幼年大鼠颌下腺的分布 ,探讨其增龄变化及其意义。方法 :采用胶体金标免疫电镜观察 IP3受体在幼年大鼠颌下腺的分布。结果 :金标颗粒定位于大鼠颌下腺腺泡细胞内质网上 ,以及肌上皮细胞和内皮细胞。 1d龄幼鼠颌下腺... 详细信息

目的 :观察 IP3受体在幼年大鼠颌下腺的分布 ,探讨其增龄变化及其意义。方法 :采用胶体金标免疫电镜观察 IP3受体在幼年大鼠颌下腺的分布。结果 :金标颗粒定位于大鼠颌下腺腺泡细胞内质网上 ,以及肌上皮细胞和内皮细胞。 1d龄幼鼠颌下腺 IP3受体免疫金标数量最多 ,随增龄而减少。结论 :IP3受体可能在幼鼠颌下腺细胞的分化。

关键词：大鼠颌下腺三磷酸肌醇受体免疫金标 IP3受体

部分国产抗-HCV ELISA试剂盒特异性观察

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江西医学检验 2005年第3期23卷 268-268页

作者：崔相法陈立华孔庆东山东省立医院济南250021 济南市中心血站 250001

目前检测丙型肝炎病毒抗体多采用ELISA、RIA和免疫金标等方法,其中较为常用的为ELISA方法[1].为研究国产ELISA方法抗-HCV试剂的特异性,笔者分别留取六家国产的抗-HCV第三代ELISA试剂,判为阳性的标本各50份,以意大利Sorin公司的第三代EL... 详细信息

目前检测丙型肝炎病毒抗体多采用ELISA、RIA和免疫金标等方法,其中较为常用的为ELISA方法[1].为研究国产ELISA方法抗-HCV试剂的特异性,笔者分别留取六家国产的抗-HCV第三代ELISA试剂,判为阳性的标本各50份,以意大利Sorin公司的第三代ELISA试剂复检,再进一步用PCR证实,结果发现,个别国产厂家的试剂假阳性率达44.0%,详细情况分析如下.

关键词： ELISA试剂盒国产抗-HCV 异性 ELISA方法丙型肝炎病毒抗体抗-HCV试剂假阳性率免疫金标第三代