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免疫组化SP法检测前列腺雄激素受体

中国航天医药杂志 2002年第3期4卷 64-65页

作者：刘炎张长淮首都医科大学附属北京友谊医院北京100050

良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PC)是老年男性常见疾病.研究表明,BPH和PC的发生与性激素代谢紊乱有关.因此,对性激素代谢的中介物-性激素受体的研究日益受到重视,其中,雄激素受体(AR)在前列腺疾病的研究、临床内分泌治疗等方面具有重... 详细信息

良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PC)是老年男性常见疾病.研究表明,BPH和PC的发生与性激素代谢紊乱有关.因此,对性激素代谢的中介物-性激素受体的研究日益受到重视,其中,雄激素受体(AR)在前列腺疾病的研究、临床内分泌治疗等方面具有重要价值.目前,AR的检测方法主要有生化法、荧光组化法、免疫组化法等.免疫组化法多采用抗睾酮抗体检测结合状态的AR.我们采用抗AR-sp法,检测BPH和PC组织中的AR分布情况,旨在摸索一种特异性强、定位准确、结果稳定的AR检测方法,为临床内分泌治疗在受体水平上提供参考依据.

关键词：免疫组化SP法雄激素受体前列腺疾病临床意义

Gomori染色法与免疫组化SP法联合应用制备肝组织标本

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浙江临床医学 2002年第5期4卷 335-335页

作者：吴晓星邵芯仪李冰如杭州市第六人民医院实验室 310014

我们采用Gomori浸银染色与免疫组织化学sp法结合的双重染色方法,可在肝活检组织石蜡切片中同时显示网状纤维和病毒抗原,该法快速而有效,值得推广.

关键词：病毒抗原标本制作网状纤维 Gomori染色法免疫组化SP法肝组织标本

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卵泡刺激素受体在雌性山羊颈动脉体的分布

中国兽医学报 2017年第5期37卷 893-897页

作者：孙曼郭雅茹徐永平金秀芳杜宜楠黄双西北农林科技大学动物医学学院陕西杨凌712100

为了检测雌性山羊颈动脉体中是否存在卵泡刺激素受体(FSHR),探讨卵泡刺激素(FSH)是否可以影响雌性山羊颈动脉体的活动,本试验采用免疫组织化学sp法观察卵泡刺激素受体(FSHR)在山羊颈动脉体内的分布特点,利用IPP 6.0图像半定量分析系统分... 详细信息

为了检测雌性山羊颈动脉体中是否存在卵泡刺激素受体(FSHR),探讨卵泡刺激素(FSH)是否可以影响雌性山羊颈动脉体的活动,本试验采用免疫组织化学sp法观察卵泡刺激素受体(FSHR)在山羊颈动脉体内的分布特点,利用IPP 6.0图像半定量分析系统分析FSHR在颈动脉体中实质细胞和非实质细胞上的表达量差异。结果显示,FSHR主要分布在颈动脉体的实质细胞(Ⅰ型细胞和Ⅱ型细胞)。Ⅰ型细胞中FSHR强阳性产物分布于细胞核,中等阳性产物分布于细胞膜,弱阳性或阴性产物分布于细胞质;Ⅱ型细胞中有强阳性产物;血管内皮细胞中有中等阳性或强阳性产物。FSHR在颈动脉体的实质细胞与非实质细胞中相对表达量呈显著性差异(P<0.05)。结果表明,证实FSHR在雌性非妊娠山羊颈动脉体内广泛表达,提示颈动脉体可能接受FSH的调节,这为研究FSH作用于非生殖系统及颈动脉体神经内分泌调节机制提供形态学依据。

关键词：卵泡刺激素受体颈动脉体免疫组化SP法山羊

凋亡相关因子FADD与Caspase-7在胃腺癌中的表达及意义

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凋亡相关因子FADD与Caspase-7在胃腺癌中的表达及意义

作者：徐璐璐承德医学院

学位级别：硕士

作为世界常见的恶性肿瘤,胃癌（GC,Gastric cancer）是一种来源于胃黏膜上皮组织的恶性肿瘤,在临床上拥有较高的发病率。据权威报告显示,胃癌的发病率在所有恶性肿瘤的发病率中排名第4,死亡率排在第3。在胃癌中男性明显高于女性,并且年... 详细信息

作为世界常见的恶性肿瘤,胃癌（GC,Gastric cancer）是一种来源于胃黏膜上皮组织的恶性肿瘤,在临床上拥有较高的发病率。据权威报告显示,胃癌的发病率在所有恶性肿瘤的发病率中排名第4,死亡率排在第3。在胃癌中男性明显高于女性,并且年龄越大发病率越高。而在胃癌中,胃腺癌是最常见的恶性肿瘤。大多数胃腺癌患者没有明显的早期症状,就诊时更多的患者出现了严重的癌细胞浸润和转移,对人类的身心健康造成了极其严重的威胁,是我国癌症预防和治疗的重点。肿瘤细胞的异常增殖和细胞凋亡的失调,是导致恶性肿瘤发生的重要因素。机体内的肿瘤细胞由于受到各方面因素的影响,导致其无法正常凋亡,能够进一步导致肿瘤的发生。因此,探究调节胃腺癌细胞凋亡机制的核心分子及其作用机制,对于胃腺癌的早期筛查及诊疗至关重要。相关研究表明肿瘤细胞的凋亡与多种靶基因的调控作用有关。其中,细胞凋亡的死亡受体途径和线粒体途径在当前所有的研究中,是研究较为热门的主要发生机制。Fas相关死亡结构域蛋白（Fas associated protein with death domain,FADD）是存在于胞浆中的一种能与Fas分子死亡结构域（death domain,DD）产生相互作用的全新的胞浆连接蛋白。FADD中的DD与Fas分子中的DD在相互作用的过程中激活肿瘤细胞中的Fas-Fas L信号通路。Fas-Fas L信号传导途径,在细胞凋亡中属于死亡受体途径。我国对恶性肿瘤中的FADD在胃腺癌组织中表达情况鲜有报道,仅限于蛋白水平。Caspase-7（cysteine protease-7protein,半胱氨酸蛋白酶-7蛋白）被起始因子Caspase-1、Caspase-8激活后,执行凋亡功能,位于凋亡级联反应的下游,是细胞凋亡的关键效应因子。但是,当前我国对Caspase-7在胃腺癌组织中表达的情况研究较少,也仅限于蛋白水平。对于胃腺癌中FADD、Caspase-7两者表达的相关性,当前并未出现有关该方面的研究报道。综上,本次设计主要利用免疫组化SP法、blotting Western技术、PCR-q RT技术分别检测FADD蛋白及m RNA、Caspase-7蛋白及m RNA在胃腺癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的表达情况,同时对两者是否存在相关性进行综合分析,并对其在胃腺癌组织中与临床病理特征之间的关系进行研究。探讨FADD及Caspase-7对胃腺癌的产生、发展具有怎样的影响,从而为胃腺癌患者的诊断、治疗提供新的理论依据。目的:本研究旨在探究FADD蛋白及m RNA和Caspase-7蛋白及m RNA在胃腺癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的的表达情况,分析二者在胃腺癌组织中表达是否具有相互关系,分析胃腺癌临床病理特征与两者之间的关系。方法:1通过免疫组织化学sp染色法及Western blotting技术检测60例临床胃腺癌组织样本和50例癌旁正常胃黏膜组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达水平,探究胃腺癌组织中两者表达是否具有相互关系,并分析其与胃腺癌临床病理特征之间存在的关系。2采用q RT-PCR技术,检测60例临床胃腺癌组织样本和50例癌旁正常胃黏膜组织样本中FADDm RNA及Caspase-7m RNA的表达水平,探究胃腺癌组织中两者表达是否具有相互关系,并分析其与胃腺癌临床病理特征之间存在的关系。结果:1通过免疫组化SP法,发现胃腺癌组织内Caspase-7蛋白、FADD蛋白的阳性表达率分别为46.7%、38.3%,在癌旁正常胃黏膜组织中,两者阳性表达率分别为68.0%、60.0%,二者在胃腺癌中的阳性表达率与癌旁正常胃黏膜组织相比下调,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。1.1胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白表达水平与患者年龄的大小、性别的差异不存在关系,统计学分析不具有差异性（P＞0.05）。而分析数据发现,淋巴结转移、分化程度、临床TNM分期、浸润深度均与两者的表达水平有关系,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。1.2胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达之间具有相互关系,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。2通过blotting Western结果检测分析,胃腺癌组织样本中FADD蛋白和Caspase-7的蛋白表达水平相比,在胃腺癌组织中表达低,在癌旁正常胃黏膜组织中表达高,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。2.1胃腺癌组织样本中FADD蛋白及Caspase-7表达水平与患者年龄的大小、性别的差异并无关系,统计学分析不具有差异性（P＞0.05）,但分析数据发现,淋巴结转移、分化程度、临床TNM分期、浸润深度均与两者表达水平有关系,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。2.2胃腺癌组织样本中,FADD蛋白及Caspase-7蛋白的表达有相关性,统计学分析具有差异性（P＜0.05）。3 q R

关键词：胃腺癌 FADD Caspase-7 细胞凋亡免疫组化SP法蛋白印迹实时荧光定量PCR

TUFT1在卵巢上皮性癌组织中的表达及对卵巢上皮性癌SKOV3细胞生物学功能的影响

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中华妇产科杂志 2020年第2期55卷 125-129页

作者：王芳崔金全张海玲杨宝娟张珂张霞郑州大学第二附属医院妇产科 450014

目的研究釉丛蛋白1(TUFT1)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及其对卵巢癌SKOV3细胞生物学功能的影响。方法(1)收集郑州大学第二附属医院妇产科2009—2014年收治的卵巢癌患者114例,以同期因子宫良性疾病同时切除正常卵巢的患者30例作... 详细信息

目的研究釉丛蛋白1(TUFT1)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及其对卵巢癌SKOV3细胞生物学功能的影响。方法(1)收集郑州大学第二附属医院妇产科2009—2014年收治的卵巢癌患者114例,以同期因子宫良性疾病同时切除正常卵巢的患者30例作为对照,免疫组化SP法检测卵巢癌及正常卵巢组织中TUFT1蛋白的表达,分析不同临床病理特征的卵巢癌组织中TUFT1蛋白表达的差异,并采用Kaplan-Meier法分析TUFT1蛋白阳性、阴性患者的预后。(2)逆转录(RT)-PCR技术检测卵巢癌细胞系SKOV3细胞中TUFT1 mRNA的表达,慢病毒转染SKOV3细胞,实验分为转染组和阴性对照组,采用活细胞计数法(CCK-8法)、流式细胞仪、细胞克隆形成实验分别检测转染后两组SKOV3细胞的增殖、凋亡、克隆能力及细胞周期比例的差异。结果(1)卵巢癌组织中TUFT1蛋白的阳性表达率为74.6%(85/114),正常卵巢组织为26.7%(8/30),两者比较,差异有统计学意义(χ2=23.818,P=0.000)。TUFT1蛋白的表达与卵巢癌的病理分级、手术病理分期、淋巴结转移显著相关(P组SKOV3细胞中TUFT1 mRNA的表达水平为0.26±0.07,阴性对照组为1.17±0.15,两组比较,差异有统计学意义(t=-9.447,P=0.001)。CCK-8法检测显示,转染后分别培养24、48、72 h后,转染组和阴性对照组细胞的A值分别比较,差异均有统计学意义(P组细胞的凋亡率为(26.8±3.4)%,阴性对照组为(12.9±2.7)%,两组比较,差异有统计学意义(t=5.532,P=0.005);与阴性对照组比较,转染组细胞的G0/G1期比例显著增高,S期比例显著下降,分别比较,差异均有统计学意义(P组细胞的克隆数为(16.0±2.6)个,阴性对照组为(108.0±11.4)个,两组比较,差异有统计学意义(t=-13.664,P=0.000)。结论TUFT1蛋白在卵巢癌组织中高表达,TUFT1阳性患者的生存率低;TUFT1能够促进卵巢癌细胞增殖、克隆的形成,抑制卵巢癌细胞的凋亡,并影响卵巢癌细胞的细胞周期比例。

关键词： SKOV3细胞卵巢上皮性癌正常卵巢组织子宫良性疾病对照组细胞卵巢癌细胞系免疫组化SP法

NF-κB Apaf-1蛋白在胃癌组织中的表达及意义

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河北医学 2022年第5期28卷 766-770页

作者：杨波杨涛杨东霞张歆萍孙海宁李佳欣河北省承德市中心医院河北承德067000 承德医学院病理教研室河北承德067000

目的:探讨核转录因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)和凋亡蛋白酶活化因1(Apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)在胃癌组织中的表达及意义,为胃癌的临床治疗开辟新思路。方法:收集50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常... 详细信息

目的:探讨核转录因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)和凋亡蛋白酶活化因1(Apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)在胃癌组织中的表达及意义,为胃癌的临床治疗开辟新思路。方法:收集50例胃癌患者的胃癌组织及其癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测NF-κB和Apaf-1蛋白的表达情况,分析二者与临床病理特征的关系和二者间相关性。结果:NF-κB蛋白在胃癌组织中的表达高于癌旁正常组织,而Apaf-1蛋白的表达低于癌旁组织,二者蛋白表达变化与分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴转移均有关(P组织中NF-κB蛋白和Apaf-1蛋白表达为负相关(rs=-0.36,P组织中NF-κB蛋白和Apaf-1蛋白表达异常,参与了胃癌的发生、发展,有望为胃癌的诊断及治疗提供参考。

关键词：胃癌核转录因子-κB 凋亡蛋白酶活化因子1 免疫组化SP法

子宫颈癌组织中RACK1蛋白的表达及其意义

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中华妇产科杂志 2016年第3期51卷 219-221页

作者：杨丹丹刘琴陈友国苏州大学附属第一医院妇产科 215006 现在江苏省昆山市第一人民医院妇产科 215003 江苏省昆山市第一人民医院妇产科

子宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌。以往文献报道，构架蛋白1（RACK1）在多种恶性肿瘤，如结肠癌、肺小细胞癌和黑色素瘤中表达增高，在血管新生过程中表达也上调。血管新生是实体肿瘤生长的必要条件，可提供恶性... 详细信息

子宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌。以往文献报道，构架蛋白1（RACK1）在多种恶性肿瘤，如结肠癌、肺小细胞癌和黑色素瘤中表达增高，在血管新生过程中表达也上调。血管新生是实体肿瘤生长的必要条件，可提供恶性肿瘤细胞快速增殖所需要的营养，促进肿瘤生长。因此，本研究应用蛋白印迹（westernblot）法和免疫组化SP法检测子宫颈癌及其癌旁组织中RACK1蛋白的表达情况，以探讨其在子宫颈癌发生、发展过程中的作用及意义。

关键词：蛋白印迹宫颈癌组织恶性肿瘤细胞免疫组化SP法子宫颈癌血管新生肿瘤生长肺小细胞癌

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IFNGR在山羊腹腔肠系膜前神经节的表达

中国农业科学 2015年第5期48卷 959-965页

作者：李强王志豪金秀芳徐永平郭晓董伟刘文刚西北农林科技大学动物医学院

【目的】为了解山羊腹腔肠系膜前神经节（celiac cranial mesenteric ganglion,CCMG）是否具备接受γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）作用的条件,即是否有IFN-γ受体（interferon-γreceptor,IFNGR）存在。【方法】取健康雌、雄性成年... 详细信息

【目的】为了解山羊腹腔肠系膜前神经节（celiac cranial mesenteric ganglion,CCMG）是否具备接受γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）作用的条件,即是否有IFN-γ受体（interferon-γreceptor,IFNGR）存在。【方法】取健康雌、雄性成年山羊的CCMG,经40 g·L-1多聚甲醛磷酸缓冲固定液固定4 h后,用自来水冲洗10h,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后,制作石蜡切片。石蜡切片分4套:第1套做H.E.染色;第2套经脱蜡复水,抗原热修复后,再进行免疫组化SP法染色;第3套经免疫组化SP法染色后用苏木精复染;第4套用作阴性对照组。染色后在光学显微镜下观察记录切片,使用Motic数码显微镜下拍照后,对图片分析处理,计算CCMG的IFNGR相对表达量。将相对表达量数据用spSS18.0软件分析处理,并利用单因子方差分析（One-way ANOVA,LSD）进行显著性检验。取健康雌性、雄性成年山羊的CCMG,经充分研磨后,使用总RNA提取试剂盒提取总RNA,再以牛的IFNGR1 c DNA序列为模板设计IFNGR1的引物,克隆山羊IFNGR1 c DNA序列并进行扩增。将扩增产物使用琼脂糖凝胶电泳检测是否有目的条带,并进行DNA双向测序。将测序结果在NCBI上进行比对和确认,并与其他的物种的序列进行了同源性比对。【结果】免疫组化染色显示,在CCMG内IFNGR免疫阳性产物分布广泛,在神经元胞体、卫星细胞及神经纤维中均有不同程度的着色。其中神经元均为IFNGR免疫阳性。几乎所有的神经元胞质为黄褐色,IFNGR呈中等阳性,仅有少数神经元胞质染色弱为淡黄色,IFNGR呈弱阳性;在神经元细胞核中,核质部分明显呈棕褐色,IFNGR为强阳性,而核仁染色相对较弱或无着色,IFNGR为弱阳性或阴性。在非神经元结构中,卫星细胞染色呈棕褐色或棕色,IFNGR为强阳性或中等阳性。神经纤维和血管内皮细胞为黄褐色或淡黄色,IFNGR为中等阳性或弱阳性。图像分析表明与其他非神经元结构成分相比,神经元胞体IFNGR的相对表达量差异性极显著（P免疫调节途径和自主神经对胃肠道调节的神经途径之间相互协调的关键点。

关键词： γ-干扰素受体腹腔肠系膜前神经节免疫组化SP法 PCR 山羊

PAK4在乳腺癌及良性乳腺病变中的表达及意义

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南方医科大学学报 2010年第5期30卷 981-983,988页

作者：杨金星韩宇晶郑航罗荣城南方医科大学南方医院肿瘤中心广东广州510515 中山大学肿瘤防治中心广东广州510060

目的探讨p21活化激酶4(p21-activatedkinase-4,PAK4)在乳腺癌发病、发展及转移过程中的作用。方法采用免疫组化SP法检测35例正常乳腺组织、22例乳腺囊性增生病、28例乳房纤维腺瘤、37例乳腺癌(其中非浸润性癌7例,早期浸润癌9例,浸润癌21... 详细信息

目的探讨p21活化激酶4(p21-activatedkinase-4,PAK4)在乳腺癌发病、发展及转移过程中的作用。方法采用免疫组化SP法检测35例正常乳腺组织、22例乳腺囊性增生病、28例乳房纤维腺瘤、37例乳腺癌(其中非浸润性癌7例,早期浸润癌9例,浸润癌21例)及13例乳腺癌转移瘤组织中的PAK4含量,比较各类组织中PAK4的表达特点与分布特征。结果 PAK4表达主要位于胞浆,胞核偶有少量表达,而乳腺腺体细胞外基质中基本不表达;正常乳腺组织、良性病变(乳腺囊性增生病和乳腺腺瘤)、乳腺癌和乳腺癌转移瘤组织中的PAK4表达总体阳性率依次升高;乳腺非浸润性癌、早期浸润癌、浸润癌组织中PAK4的表达阳性率亦呈依次升高趋势。结论 PAK4与乳腺癌的演进和转移密切相关,PAK4及其基因有可能成为乳腺癌诊断和治疗的新靶点。

关键词：乳腺癌/发病机制 p21活化激酶4 免疫组化SP法分子靶向治疗