检索结果-南通市图书馆

现代肿瘤医学 2020年第7期28卷 1137-1141页

作者：禹乐朱启淦温路生魁国菊杨立民郭以河孟加榕联勤保障部队第909医院厦门大学附属东南医院病理科福建漳州363000

目的:探讨应用免疫磁珠阴性富集法制作恶性胸腔积液细胞块的可行性及其应用价值。方法:收集确诊为肺腺癌的胸腔积液57例,每例标本平均分成两份,分别用传统直接离心沉淀法(A法)和免疫磁珠阴性富集法(B法)制作细胞块,对两种方法获得的细... 详细信息

目的:探讨应用免疫磁珠阴性富集法制作恶性胸腔积液细胞块的可行性及其应用价值。方法:收集确诊为肺腺癌的胸腔积液57例,每例标本平均分成两份,分别用传统直接离心沉淀法(A法)和免疫磁珠阴性富集法(B法)制作细胞块,对两种方法获得的细胞块的HE染色、免疫组化效果及提取DNA的合格率、EGFR基因突变检测结果进行比较。结果:免疫磁珠阴性富集法的HE、免疫组化效果均优于传统的直接离心沉淀法;直接离心沉淀法提取的DNA浓度普遍高于免疫磁珠阴性富集法;直接离心沉淀法和免疫磁珠阴性富集法提取DNA的合格率分别为96.61%(57/59)和98.31%(58/59),两者差异无统计学意义(P>0.05);免疫磁珠阴性富集法EGFR基因突变阳性率为59.32%(35/59),高于直接离心沉淀法的54.24%(32/59),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用免疫磁珠阴性富集法制作恶性胸腔积液细胞块的方法可行,在HE染色、免疫组化以及后续的分子病理检测与传统的直接离心沉淀法相比较均显示出较大的优势。

关键词：免疫磁珠阴性富集法 DNA提取恶性胸腔积液细胞块

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫磁珠阴性法富集胸水脱落细胞对恶性胸腔积液诊断价值的研究

免疫磁珠阴性法富集胸水脱落细胞对恶性胸腔积液诊断价值的研究

引用

作者：朱海妹广州医科大学

学位级别：硕士

研究背景胸腔积液(pleural effusion)是胸膜疾病最常见的临床表现之一,根据临床影响因素和患者预后的不同,胸腔积液往往分为两种类别,即良性胸腔积液(benign pleural effusion,BPE)和恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)。由... 详细信息

研究背景胸腔积液(pleural effusion)是胸膜疾病最常见的临床表现之一,根据临床影响因素和患者预后的不同,胸腔积液往往分为两种类别,即良性胸腔积液(benign pleural effusion,BPE)和恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)。由于两种类型胸腔积液的病因和预后存在很大区别,因此对于两者的准确鉴别尤为重要。但是长期以来,良恶性胸腔积液的鉴别诊断一直是困扰临床医生的一大问题。尽管胸腔积液中找到肿瘤细胞的是诊断胸腔积液的“金标准”,但是其阳性率各方报道变异很大,在40%‐87%之间[1]。此外,对于胸水细胞学阴性的胸腔积液,目前使用的一些指标,如乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氢酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)等,在某种程度上有一定的鉴别价值,但是这些标志物的特异性和敏感性不十分理想。故探讨一种敏感度及特异度高的鉴别良恶性胸腔积液辅助检测方法,为临床诊断提供依据非常必要。近年来,循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)检测逐渐进入精准医学时代。目前已有众多研究者在探索CTC的诊断价值、预后价值、疗效监测和预测肿瘤复发等方面作出了很大贡献。作为血液中的“稀有细胞”,CTC的检测在技术层面上的要求通常很高。Cellsearch系统长期以来作为CTC检测的“金标准”;但是在深入研究和临床使用过程中,Cellsearch系统的局限性逐渐显现出来,主要是由于无法检测到发生“上皮—间质转化”(epithelial‐mesenchymal transition,EMT),造成假阴性结果。随着技术的不断革新,免疫磁珠分选法悄然进入科学家的视野。这种细胞富集法与Cellsearch系统不同,它不依赖上皮标志物的表达,可富集到发生EMT的肿瘤细胞。免疫磁珠分选法分为阳性和阴性分选法。由于阳性分选法受到肿瘤细胞异质性的影响,且可能引起肿瘤细胞内部分子信号通路的活化。而阴性分选法通过去除标本中的白细胞和红细胞等成分,使得富集到的CTC处于自然状态,且不依赖肿瘤细胞表面分子的表达,因而阴性分选法适用于任何肿瘤类型的CTC富集,应用更为广泛。通过方法学的改进,目前阴性富集理论上回收率能够达到100%[2]。富集后的细胞成分经过免疫荧光染色后可去除白细胞,采用荧光原位杂交技术进一步鉴定后可用于后续的功能分析。CTC鉴定方法主要有基于肿瘤细胞表面抗原表达、细胞特异性m RNA表达以及染色体核型异常等而进行的实验方法。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)已被证实可用于前列腺癌、结直肠癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等上皮来源肿瘤的细胞鉴定。FISH不依赖肿瘤细胞表面分子标记物的表达,因而可以检测上皮细胞特异性标记物表达弱化或消失的CTC,同时可以在显微镜下直观的观察到恶性的CTC肿瘤细胞。研究目的探讨免疫磁珠阴性富集法联合FISH技术和免疫荧光染色——SOP‐im FISH技术[3],找到胸水脱落细胞(胸水“CTC”)对诊断恶性胸腔积液的价值。研究方法(一)研究对象:于2015年3月至2017年1月期间在广州市第一人民医院住院的胸腔积液患者,并且符合纳入及排除标准。(二)实验方法:采用免疫磁珠阴性分选法富集胸腔积液和外周血中的CTC,通过FISH杂交信号和免疫荧光染色CD45抗原鉴定所富集的细胞是否为CTCs。同时收集胸水传统细胞学检查结果进行对比分析。(三)实验设计1.样本分组:分为两组,即恶性胸腔积液组(实验组)与良性胸腔积液组(对照组)。1.1恶性胸腔积液病例来源1.1.1纳入标准(1)年龄≧18岁,性别不限(妊娠期、哺乳期女性除外);(2)体格检查和(或)影像学检查证实胸腔积液;(3)经组织病理学或细胞学确诊为恶性肿瘤;(4)能耐受胸腔穿刺抽液;(5)自愿参加本研究者。1.1.2排除标准(1)妊娠期、哺乳期的女性;(2)组织病理学或细胞学未证实为恶性肿瘤;(3)行手术、放化疗后3个月内者;(4)伴有严重心血管、肝、肾等疾病不能耐受胸腔穿刺术;(5)依从性差或拒绝参加此项研究的患者。1.2良性胸腔积液病例来源1.2.1纳入标准(1)年龄≧18岁,性别不限(妊娠期、哺乳期女性除外);(2)表现为渗出液的非恶性胸腔积液,包括结核性胸膜炎、肺炎等其他非恶性疾病所致的胸腔积液;(3)既往无恶性肿瘤疾病病史患者。(4)自愿参加此研究,并能积极配合的患者。1.2.2排除标准(1)妊娠期、哺乳期的女性;(2)因心力衰竭、低蛋白血症、肾病综合征等其他疾病所致的胸腔积液表现为漏出液者;(3)胸腔积液为包裹性或由于量少等其他原因无法行胸腔穿刺引流术者。(4)既往恶性肿瘤病史。2.标本收集:实验组选取2015年3月至2017年1月期间广州

关键词：胸腔积液脱落细胞 CTC 免疫磁珠阴性富集法荧光原位杂交免疫荧光染色胸水传统细胞学检查

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

循环肿瘤细胞的分析、分离和生物学特性及其与肿瘤转移的关系

循环肿瘤细胞的分析、分离和生物学特性及其与肿瘤转移的关系

引用

作者：梁海燕福州大学

学位级别：硕士

目的:恶性肿瘤术后的转移是造成癌症病人死亡的主要原因,循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)是导致肿瘤转移的根源,因此CTC的分离、表征和体外培养具有重要的干预肿瘤转移的意义。本文旨在建立一种稳定可行、灵敏特异性分离、表... 详细信息

目的:恶性肿瘤术后的转移是造成癌症病人死亡的主要原因,循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)是导致肿瘤转移的根源,因此CTC的分离、表征和体外培养具有重要的干预肿瘤转移的意义。本文旨在建立一种稳定可行、灵敏特异性分离、表征和计数人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)CTC的方法;研究CTC的数量及生物学特性与临床转移的相关性;初步探讨CTC的体外培养条件;初步探索上皮细胞-间充质转化(epithelial mesenchymal transitions,EMT)相关蛋白在评价及预测CRC预后中的意义。方法:1.建立免疫磁珠阴性富集结合流式细胞分选术计数、表征及分离CRC病人血液中CTC的方法;在健康人血中加入定量HCT116结肠癌细胞以检测以上方法的特异性、重现性及敏感性;采用流式细胞术检测CTC表面蛋白CD47/CD44的表达,探讨其与肿瘤分期的相关性;利用免疫荧光技术鉴定分选出的 CTC;人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)与HCT116共孵育等实验探讨CTC体外培养条件。2.流式细胞术检测CRC癌旁组织/癌变组织CD324、CD47、CD66表面蛋白的表达;RT-PCR技术检测CRC癌旁组织/癌变组织EMT相关基因表达差异,探讨其与肿瘤转移的相关性。结果:1.验证实验表明免疫磁珠阴性富集结合流式细胞分选术计数、表征及分离CTC的方法,对HCT116的平均回收率为61%,标准曲线相关系数为0.992,并可在单细胞水平检测到HCT116。所有的CRC样本均显示出CD47+,而CD44+仅有4.3-61.2%;鉴定结果确定DAPI+CD45-CK+细胞为CTC;内皮细胞与癌细胞显示良好共孵现象,但未能实现分离所得CTC的体外培养。2.癌变组织处CD66表达显著上升,RT-PCR结果显示癌变组织CDH1表达下降,SNAI1、SNAI2、ZEB1、ZEB2 等表达则升高。结论:1.免疫磁珠阴性富集结合流式细胞分选术计数、表征及分离CTC的方法具有高敏感性、特异性、及良好的重现性;病人血中CTC的数量及CD44+与癌症TNM分期相关;内皮细胞与癌细胞显示良好共孵现象。2.癌变组织CD66+与TNM分期相关,SNAI1、SNAI2、ZEB1、ZEB2等基因的表达与EMT转化过程相关。本文对CTC的分析、分离、表征为CTC与肿瘤转移动力学的研究提供了重要的理论依据和生物学工具。

关键词：循环肿瘤细胞结肠癌免疫磁珠阴性富集法流式细胞分选术

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

循环肿瘤细胞在膀胱癌诊疗中的应用价值

引用

医学信息 2021年第8期34卷 72-75页

作者：苗岳松刘杰刘昕王志勇承德医学院附属医院泌尿外科

目的检测膀胱癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的表达情况,探究在膀胱癌手术前后动态监测CTCs的价值。方法选择2018年10月～2019年6月就诊于承德医学院附属医院泌尿外科的92例膀胱癌患者作为试验组,另外选择同期22例健康志愿者作为对照... 详细信息

目的检测膀胱癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的表达情况,探究在膀胱癌手术前后动态监测CTCs的价值。方法选择2018年10月～2019年6月就诊于承德医学院附属医院泌尿外科的92例膀胱癌患者作为试验组,另外选择同期22例健康志愿者作为对照组,采用免疫磁珠阴性富集法结合荧光细胞化学染色技术(SE-iFISH)检测两组外周血中CTCs水平,绘制受试者工作曲线(ROC),确定cut-off值,分析外周血中CTCs与试验组肿瘤浸润程度、病理分级、肿瘤分期及多样性的关系。结果试验组CTCs阳性率高于对照组(91.30%vs 4.50%),差异有统计学意义(P0.05)。结论 CTCs可作为诊断膀胱癌的评价指标,具有潜在的临床应用价值,可作为监测膀胱癌治疗疗效的肿瘤标志物,且其表达与肿瘤的浸润程度、病理分级有一定关系。

关键词：循环肿瘤细胞膀胱癌肿瘤标志物免疫磁珠阴性富集法

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：