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免疫层析试纸条技术及其在转基因检测中的应用

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中国生物工程杂志 2017年第2期37卷 101-110页

作者：夏启玉李美英杨小亮肖苏生贺萍萍郭安平中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术与遗传资源利用重点实验室海口571101 农业部转基因植物及植物用微生物环境安全监督检验测试中心海口571101

转基因检测是转基因生物安全监管的重要环节。目前需要一种适合于大规模筛查的快速检测转基因成分的方法,以扩大转基因生物安全的监测范围。免疫层析试纸条是一种快速免疫分析技术,是目前常用的快速检测方法之一,具有操作简单、样品量... 详细信息

转基因检测是转基因生物安全监管的重要环节。目前需要一种适合于大规模筛查的快速检测转基因成分的方法,以扩大转基因生物安全的监测范围。免疫层析试纸条是一种快速免疫分析技术,是目前常用的快速检测方法之一,具有操作简单、样品量少、检测快速、成本低等优点,已在医学、食品和环境等多个领域广泛应用。介绍了免疫层析试纸条的组成结构、检测原理及免疫标记物,并总结了其在转基因检测方面的研究进展。

关键词：免疫层析试纸条免疫标记物转基因检测蛋白试纸条核酸试纸条

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免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用

食品安全导刊 2023年第25期 168-170页

作者：李磊涛河南聚谷检测研究有限公司河南郑州450000

随着现代食品安全问题的日益凸显,研发快速、准确、低成本的食品安全检测方法具有重要意义。免疫层析试纸条作为一种常用的检测工具,已被广泛应用于食品安全领域。本研究旨在探究免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用潜力。通过对相关... 详细信息

随着现代食品安全问题的日益凸显,研发快速、准确、低成本的食品安全检测方法具有重要意义。免疫层析试纸条作为一种常用的检测工具,已被广泛应用于食品安全领域。本研究旨在探究免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用潜力。通过对相关文献进行综述,可知免疫层析试纸条具有高度的选择性和敏感性,能够迅速检测出食品中的有害物质和致病菌。此外,免疫层析试纸条还具有操作简便、不需要复杂仪器设备、检测周期短等优点,适用于在实验室和现场进行食品安全快速检测。

关键词：免疫层析试纸条食品安全检测方法

免疫层析试纸条上转换发光检测系统的研究与开发

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电子器件 2017年第6期40卷 1588-1592页

作者：刘超王晓荣许新岳王换换王翔南京工业大学电气工程与控制科学学院南京211816

针对目前市场上上转换发光检测系统体积较大、不具便携性、线性范围窄等缺点,基于上转换发光免疫分析原理,充分运用电子学、光电学、机械学等多个学科,对免疫层析试纸条上转换发光检测系统进行研究与开发。主要内容包含光学系统设计、... 详细信息

针对目前市场上上转换发光检测系统体积较大、不具便携性、线性范围窄等缺点,基于上转换发光免疫分析原理,充分运用电子学、光电学、机械学等多个学科,对免疫层析试纸条上转换发光检测系统进行研究与开发。主要内容包含光学系统设计、平台驱动系统设计、嵌入式系统设计、计算机系统设计。通过测试,检测系统具有良好的稳定性与测量精度,测量相对误差小于1.5%,表明符合设计要求,具有一定的应用价值。

关键词：免疫层析试纸条上转换发光光电检测嵌入式系统

免疫层析试纸条技术及其在食源性致病菌检测中应用的研究进展

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食品科学 2011年第17期32卷 380-383页

作者：李怀明许恒毅熊勇华南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047 南昌大学中德联合研究院江西南昌330047 南昌大学环境与化学工程学院江西南昌330047

食源性致病菌是引起食物中毒的最主要原因之一,全球每年由其引发的食物中毒事件达上亿例。免疫层析试纸条法是一种简便、快速且价格低廉的检测方法,广泛应用于国内基层单位对食源性致病菌现场快速检测及诊断。本文就其在食源性致病菌检... 详细信息

食源性致病菌是引起食物中毒的最主要原因之一,全球每年由其引发的食物中毒事件达上亿例。免疫层析试纸条法是一种简便、快速且价格低廉的检测方法,广泛应用于国内基层单位对食源性致病菌现场快速检测及诊断。本文就其在食源性致病菌检测方面的研究现状及发展方向进行综述。

关键词：免疫层析试纸条食源性致病菌食物中毒快速检测

检测寨卡病毒核酸的RT-LAMP可视化方法的建立

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中国兽医学报 2024年

作者：宋雨濛黄培金宏丽焦翠翠白玉洁张梦瑶龚志远李媛媛张海丽王化磊吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室长春西诺生物科技有限公司

为建立简单、便捷、灵敏、特异的寨卡病毒(Zikavirus，ZIKV)快速检测方法，本研究通过对不同时间、不同地区分离的寨卡病毒全基因组序列进行分析，筛选ZIKVNS5基因保守区为靶标，同时设计特异性引物及探针，结合RT-LAMP恒温扩增技术和... 详细信息

为建立简单、便捷、灵敏、特异的寨卡病毒(Zikavirus，ZIKV)快速检测方法，本研究通过对不同时间、不同地区分离的寨卡病毒全基因组序列进行分析，筛选ZIKVNS5基因保守区为靶标，同时设计特异性引物及探针，结合RT-LAMP恒温扩增技术和免疫层析技术，成功构建寨卡病毒反转录环介导等温扩增核酸可视化(RT-LAMP-VF)检测方法。结果显示，该方法具有良好的特异性和敏感性，当内、外、环引物比为FIP:LF:F3=4:2:1时，在61℃条件下恒温扩增45min，可特异性检测到102copies/μL的RNA标准品以及2.15pfu的ZIKV，且与其他黄病毒(日本乙型脑炎病毒、猪瘟病毒)等无交叉反应。血液组织中的其他RNA不影响RT-LAMP-VF 的敏感性和特异性，表明该方法可用于临床样本ZIKV的检测。本文中建立的ZIKV RT-LAMP-VF检测方法操作简单、不需要特殊仪器设备，尤其适用于基层单位ZIKV的现场快速检测，为寨卡病毒病的现场快速检测和预警预报体系的建立提供技术支持与物质保障。

关键词：寨卡病毒环介导等温扩增免疫层析试纸条核酸可视化检测

基于量子点荧光微球（QDM）的布鲁菌病快速诊断方法的构建和评价

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中国兽医学报 2022年

作者：史伯昌韩慧李华斌李聪李春和谭凌云李欣昱李敏李波尹秀云曾利军贺威郑源强赵忠鹏内蒙古自治区分子生物学重点实验室内蒙古医科大学北京标驰泽惠生物科技有限公司安徽医科大学基础医学院内蒙古华希生物科技有限公司解放军总医院第五医学中心青岛滨海学院

布鲁菌病是一种死灰复燃的自然疫源性人兽共患病，在畜间引发动物流产、不孕，在人间造成“懒汉症”，是目前最需要实行牧场净化管理的疾病。牧场净化当前最迫切需要的是具伴随诊断试剂的疫苗产品。本课题组基于量子点荧光微球标记的免... 详细信息

布鲁菌病是一种死灰复燃的自然疫源性人兽共患病，在畜间引发动物流产、不孕，在人间造成“懒汉症”，是目前最需要实行牧场净化管理的疾病。牧场净化当前最迫切需要的是具伴随诊断试剂的疫苗产品。本课题组基于量子点荧光微球标记的免疫层析技术，通过反应条件的调整和优化，构建了一种用于受检者血清布鲁菌LPS抗体的快速检测方法，并对其敏感性，特异性，稳定性进行了系统评价。本试纸条最低可检测的阳性血清浓度为0.1 IU/mL，且不易与其他特异血清发生交叉反应。常温下可保存18个月，稳定性良好。对临床血样的总敏感性为97%，特异性为90%，表明试纸条检出效率符合现行诊断试剂的标准。因此，本产品具有简便、快速的特点，且对血清样品没有物种来源的限制，进一步实现了基层净化检测的便利性，为布鲁菌的快速诊断和现场筛查奠定了的物质条件。

关键词：布鲁菌病 LPS 量子点荧光微球免疫层析试纸条

北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫层析试纸条的研制及初步应用

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中国预防兽医学报 2022年第8期44卷 842-849页

作者：李宛生李敏华张洪亮李超许浒付军龚帮俊郭镇洋刘建波彭金美周国辉王倩田志军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069 北京爱德士元亨生物科技有限公司北京101318

为研制一种快速检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的免疫层析试纸条(ICS),本研究以红色乳胶微球偶联的PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)1H4为检测抗体,并包被在结合垫上,以MAb 1H4和羊抗鼠IgG为捕获抗体,并分别包被在硝酸纤维素膜上... 详细信息

为研制一种快速检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的免疫层析试纸条(ICS),本研究以红色乳胶微球偶联的PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)1H4为检测抗体,并包被在结合垫上,以MAb 1H4和羊抗鼠IgG为捕获抗体,并分别包被在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,经各反应条件的优化建立了检测PRRSV的乳胶微球ICS。各反应条件优化结果显示,乳胶微球偶联的MAb即检测抗体浓度为1.5 mg/mL,检测线MAb即检测线捕获抗体的浓度为2.0 mg/mL,质控线羊抗鼠IgG即质控线捕获抗体的浓度为1.0 mg/mL。特异性试验结果显示,该方法可特异性检测我国出现的高致病性、NADC30-like、NADC34-like等北美型PRRSV代表株,与欧洲型PRRSV DV疫苗株及猪的其他常见病毒(CSFV、PRV、PCV2、PEDV、TGEV、PPV)均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对系列稀释PRRSV(10^(5.0) TCID_(50)/mL~2.5×10^(2.0) TCID_(50)/mL)的最低检测限为5×10^(2.0) TCID_(50)/mL,对2倍倍比稀释的重组N蛋白(rN,24000 ng/mL~3.75 ng/mL)的最低检测限为15 ng/mL;重复性试验结果显示,同一批次和不同批次试纸条的检测结果均无差异;对不同类型北美型PRRSV株(高致病性株、NADC30-like株、类高致病性株)感染的猪血清检测结果显示,利用该ICS可以从相应猪血清中检测到不同北美型的PRRSV。对采集的108份疑似PRRSV感染的猪肺组织及血清样品分别采用本研究建立的ICS及本研究室建立的PCR方法检测,结果显示,ICS检测的阳性率为37.03%(40/108),PCR检测的阳性率为42.59%(46/108),二者的总体符合率为83.33%。上述结果表明,该方法可以用于我国PRRSV主要流行株及临床样品的检测。本研究首次以同一株MAb分别作为检测抗体和检测线捕获抗体,建立检测PRRSV的乳胶微球ICS,为现地PRRSV流行病学调查及临床快速检测提供了新的技术手段。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒北美型 N蛋白免疫层析试纸条

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免疫层析试纸条在燕窝糖蛋白检测中的应用

免疫层析试纸条在燕窝糖蛋白检测中的应用

作者：郑丽娟福建农林大学

学位级别：硕士

燕窝为雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液与绒羽等混合凝结所筑成的巢窝,主要产于东南亚沿海国家,以及我国的福建、海南和广东沿海一带。燕窝有丰富的营养价值及药用价值,自古以来便被誉为滋补珍品,深受大众喜爱。然而,有不法商贩... 详细信息

燕窝为雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液与绒羽等混合凝结所筑成的巢窝,主要产于东南亚沿海国家,以及我国的福建、海南和广东沿海一带。燕窝有丰富的营养价值及药用价值,自古以来便被誉为滋补珍品,深受大众喜爱。然而,有不法商贩为牟取利益,对燕窝进行掺假,给消费者带来了巨大的经济损失和身心危害。目前,燕窝的检测分析和真伪鉴别方法主要包括理化性质检测、仪器分析以及酶联免疫分析等,然而大多数检测方法使用的仪器价格昂贵、操作繁琐、分析时间长,使得燕窝的检测受到场地和检测条件的限制,无法满足快速检测的需求。因此需要开发一种具有高灵敏度、方便快捷,可用于现场的分析技术实现对燕窝的检测。本文从燕窝当中提取纯化燕窝糖蛋白,制备能够特异性识别糖蛋白的多克隆抗体,采用双抗体夹心法构建免疫层析试纸条,对燕窝糖蛋白进行定性和定量的检测分析,为燕窝的真伪鉴别提供了一定的理论依据。主要研究内容和结论如下:(1)通过单因素实验和响应曲面法优化燕窝糖蛋白提取工艺,获得的最佳提取工艺条件为:浸提时间2.6 h、料液比为1:47、浸提次数2次,得到的蛋白质提取率为3.96%,多糖提取率为1.54%。(2)燕窝糖蛋白提取液经mono Q柱分离纯化,采用SDS-PAGE电泳和HPLC鉴定纯化后的燕窝糖蛋白为单一成分,分子量为75 kDa左右,纯度达到90%以上;通过DSC测得热变性温度为119.9℃;红外吸收光谱表明该燕窝糖蛋白糖链是吡喃糖的β-型糖苷键结构;成分测定表明该糖蛋白为燕窝特征性成分-唾液酸糖蛋白。以该纯化糖蛋白为抗原制备多克隆抗体,通过间接ELISA方法确定抗血清效价符合免疫要求,采用亲和纯化层析柱纯化获得多克隆抗体,浓度为0.6mg/mL。(3)以纯化得到的多克隆抗体为免疫识别元素,构建基于纳米复合材料(GNP-SiNR)的燕窝糖蛋白免疫层析试纸条。对免疫层析试纸条进行工作条件的优化和分析检测性能的研究。确定最佳工作参数为:GNP-SiNR与糖蛋白检测抗体结合的最适pH为9;测试线上糖蛋白捕获抗体最佳喷涂次数为1次;与GNP-SiNR结合的糖蛋白检测抗体最佳浓度为0.72 μg/mL;结合垫上GNP-SiNR-Ab复合物的最佳用量为8μL;试纸条流动相缓冲溶液组分为PBST,其中Tween-20的浓度为0.25%。在最佳工作条件下,试纸条在10-1200 ng/mL浓度范围内对燕窝糖蛋白呈现良好的线性关系,检测限为7.02 ng/mL,并且表现出良好的重现性和特异性,不和其他非特异性目标物存在交叉反应,在室温下保存1个月稳定性良好。

关键词：燕窝糖蛋白提取纯化免疫层析试纸条检测

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免疫层析试纸条的工艺应用

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2021年第7期 0124-0125页

作者：姚红霞景德镇市卫生学校江西景德镇333000

免疫层析技术是将免疫学检测技术与层析分离方法结合的一种操作简单,测试快速,结果准确的检测方法。免疫试纸条就是该技术工艺的主要产品形式,在微生物、体外诊断等领域都有重要的应用,试纸条由样本垫、结合垫、NC膜、吸水纸和背衬组成... 详细信息

免疫层析技术是将免疫学检测技术与层析分离方法结合的一种操作简单,测试快速,结果准确的检测方法。免疫试纸条就是该技术工艺的主要产品形式,在微生物、体外诊断等领域都有重要的应用,试纸条由样本垫、结合垫、NC膜、吸水纸和背衬组成,本文将免疫层析试纸条的工艺技术进行总结归纳,展望未来。

关键词：免疫层析试纸条工艺应用技术