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贵阳医学院学报 2006年第1期31卷 18-20页

作者：张婷单可人李毅何燕齐晓岚赵艳谢渊吴昌学任锡麟官志忠贵阳医学院分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的：了解PCR产物直接测序法与克隆测序法在单核苷酸多态性（SNP）检测上的差别。方法：对2型糖尿病患者的载脂蛋白J外显子2基因及旁侧进行聚合酶链反应（PCR）扩增，分别对其产物进行直接测序和克隆测序。结果：在样本的检测中，PCR... 详细信息

目的：了解PCR产物直接测序法与克隆测序法在单核苷酸多态性（SNP）检测上的差别。方法：对2型糖尿病患者的载脂蛋白J外显子2基因及旁侧进行聚合酶链反应（PCR）扩增，分别对其产物进行直接测序和克隆测序。结果：在样本的检测中，PCR产物直接测序法所测序列与43～60bp以后克隆测序相同；检出一个突变位点并与GenBank（DQ012938）发表序列一致。结论：PCR产物直接测序法和克隆测序法都是检测SNP的有效方法，但前者不仅特异性强，敏感度高，而且比克隆测序方法更为快速简便，节省材料。

关键词：载脂蛋白类多态性单核苷酸糖尿病非胰岛素依赖型聚合酶链反应直接测序法克隆测序法

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混合血样品检测的克隆测序法研究

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中国法医学杂志 2004年第3期19卷 162-163页

作者：曹洋万立华黄映雪刘春胡淑辉江苏省公安厅刑侦局江苏南京210024 重庆市刑事科学技术研究所重庆400042 西南政法大学刑侦学院重庆400031

在法医生物物证检验的DNA分析中,经常会遇到多个个体的混合血样的检测,如受害人与犯罪嫌疑人的混合血,受害人阴道上皮细胞与犯罪嫌疑人精子细胞或男性上皮细胞的混合斑等.

关键词：混合血样品检测克隆测序法 DNA分析法医物证学线粒体DNA mtDNA

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荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法在临床的应用评价

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世界华人消化杂志 2005年第11期13卷 1291-1294页

作者：张淑云刘伟李迪谷鸿喜仰曙芬周志红杜博金茜常曼丽哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探... 详细信息

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探针定量PCR法(FT—PCR)和荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测HBVDNA含量和YMDD及其变异;其中78份HBVDNA阳性标本采用基因型特异性多引物对巢式PCR法进行基因分型(A—F),30份标本用PCR产物克隆测序法检测HBVYMDD及其变异.结果:血浆标本HBVDNA阳性率(≥1.0×106copies/L)为75.6%(164/217).YMDD及其变异检出率为67.7%(147/217).其中YMDD44.9%(66/147),YIDD22.5%(33/147).YVDD17.7%(26/147),YIDD/YVDD混合株10.9%(16/147),其他混合株4.0%(6/147);结合HBVDNA含量,HBVYMDD及其变异的检出下限为HBVDNA=5.0×106copies/L,但在106copies/L时检出率较低,仅为36.4%,随着HBVDNA含量增高,检出率显著增高(>80%),且在107copies/L时即有显著增高(χ2=7.177,P测序法的检测结果为相对标准,则FH—PCR—MC法检测HBVYMDD及其变异的相对敏感性、特异性和符合率分别为96.3%(26/27),100%(3/3)和96.7%(29/30);对于HBVYMDD及其变异的类型,两种方法检测结果一致.结论:FH—PCR—MC法是一种快速、特异的HBVYMDD及其变异检测方法,具有较高的检出率,且能区分YMDD及其变异的类型.

关键词：荧光标记曲线法双探针融解杂交乙型肝炎病毒聚合酶慢性乙型肝炎患者 DNA含量 YMDD 天门冬氨酸临床应用评价定量PCR法 Taqman 巢式PCR法 HBV 血浆标本基因分型 D基因型总检出率检测结果克隆测序法 PCR产物基因型变异

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实验方法与改进

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中国医学文摘（检验与临床） 2006年第6期20卷 349-349页

直接测序法与克隆测序法在单核苷酸多态性检测中的比较；基于DNA芯片的细菌基因表达谱技术的建立与评价；根据NCCLS-EP9-A2评价2种发光免疫分析法的一致性；

关键词：单核苷酸多态性发光免疫分析法验方克隆测序法直接测序法基因表达谱 DNA芯片一致性

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