检索结果-南通市图书馆

AMD3100对apoE^-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2008年第7期35卷 807-813页

作者：王佐周晓峰王仁童中艺姜志胜王贵学南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室衡阳421001 湖南常德职业技术学院医药系病理学教研室常德415000 重庆大学生物工程学院重庆400044

探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨... 详细信息

探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Westernblot检测内皮祖细胞上CXCR4mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达.

关键词： AMD3100 内皮祖细胞微孔法克隆形成单位增殖迁移黏附

胚胎干细胞微环境增强人角膜缘干细胞的干性和抑制凋亡的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验眼科杂志 2015年第5期33卷 389-399页

作者：刘志平沙翔垠王智崇李朝阳刘颖周瑾广州医科大学附属第二医院眼科 510260 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州510060

背景成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞（ESCs）微环境能增强人角膜缘干细胞（LSCs）的干性,其作用机制是研究热点. 目的探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细... 详细信息

背景成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞（ESCs）微环境能增强人角膜缘干细胞（LSCs）的干性,其作用机制是研究热点. 目的探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细胞株（E14细胞）分别用CnT-20培养液和CnT-20＋体积分数20％ ES（ESC-CM）培养液进行培养和传代.采用新鲜供体人角膜缘组织块培养法,分别用CnT-20培养液和ESC-CM培养液培养和传代LSCs,细胞经固定后于光学显微镜下观察细胞克隆形态并计算克隆形成率（CFE）.ESC-CM培养组细胞分别转染端粒酶逆转录酶（TERT） siRNA（19-25nt siRNA）或siRNA（sc37007）,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡、线粒体膜电位的改变;采用免疫荧光技术和流式细胞技术检测siRNA转染前后细胞中端粒酶的表达和活性氧簇（ROS）的产生情况;采用RT-PCR、免疫荧光技术和Western blot法检测细胞中干细胞标志物p63、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）、整合素β1（integrin β1）和细胞分化标志物细胞角蛋白3（CK3） mRNA及其蛋白的表达;采用Western blot法检测细胞中黏着斑激酶（FAK）、Akt和糖原合成酶激酶3β（GSK3β）及其磷酸化蛋白以及p21蛋白的改变. 结果 ESC-CM培养组LSCs可传至第8代,CFE为（7.6±0.6）％,CnT-20培养组传至第6代,CFE为（5.6±0.6）％,差异有统计学意义（t=4.454,P=0.011）;ESC-CM培养组第2、3、4、5、6代LSCs的凋亡百分比均明显低于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;siRNA-F转染细胞的凋亡率为（7.7±1.3）％,明显低于siRNA-TERT转染细胞的（32.3±3.1）％,差异有统计学意义（t=-12.588,P=0.000）.ESC-CM培养组与CnT-20培养组的原代LSCs 中干细胞标志物mRNA及其蛋白、TERT蛋白的相对表达量差异均无统计学意义（均P＞0.05）,但ESC-CM培养组CK3 mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;ESCCM培养组第2代细胞中干细胞标志物蛋白及TERT蛋白表达量均明显高于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.siRNA-TERT转染组细胞端粒酶活性为（4.83±0.67）％,明显低于siRNA-F转染组的（46.71±1.22）％,差异有统计学意义（t=52.116,P=0.000）.ESC-CM培养组培养液中添加了FAK抑制剂和GSK3β抑制剂以及转染TERT-siRNA后,细胞中pFAK、pAkt、pGSK3β的表达明显减弱,而p21的表达增强.ESC-CM培养组第2代LSCs及siRNA-F转染组细胞的线粒体膜电位明显高于CnT-20培养组和siRNA-TERT 转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;ESC-CM培养组原代和第2代细胞中及siRNA-F转染组细胞中ROS表达比例均明显低于CnT-20培养组及siRNA-TERT转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）. 结论 ESC-CM培养体系可促进LSCs干性的维持,抑制细胞凋亡,其机制可能与端粒酶-p21-线粒体通路及FAK/Wnt 信号通路的激活有关.

关键词：胚胎干细胞微环境端粒酶角膜缘干细胞信号通路凋亡克隆形成单位

体外负压培养对小鼠骨髓间充质干细胞增殖能力和血管内皮生长因子分泌水平的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2020年第1期24卷 33-39页

作者：杨雄峰姜慧娇王小义郭黎姣周青韩欢欢李林林廖振宇雷振陈雪玲张宏伟吴向未石河子大学医学院第一附属医院

背景:如何增强骨髓间充质干细胞增殖活性使其移植后发挥应有的疗效是目前急需解决的问题。目的:探讨体外负压培养技术对小鼠骨髓间充质干细胞增殖活性及血管内皮生长因子分泌水平的影响。方法:取第3代骨髓间充质干细胞,给予间歇性负压培... 详细信息

背景:如何增强骨髓间充质干细胞增殖活性使其移植后发挥应有的疗效是目前急需解决的问题。目的:探讨体外负压培养技术对小鼠骨髓间充质干细胞增殖活性及血管内皮生长因子分泌水平的影响。方法:取第3代骨髓间充质干细胞,给予间歇性负压培养(-6.65,-13.3,-26.6kPa),2h/次,1次/12h,对照组在正常条件下培养。培养12,24,36,48,60h,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,ELISA检测细胞分泌血管内皮生长因子水平,RT-PCR检测血管内皮生长因子受体mRNA表达。根据上述结果,选择一个最佳负压条件和时间(-26.6kPa,24h),将骨髓间充质干细胞分为正常对照组、负压组、负压+血管内皮生长因子受体抑制剂Axitinib组,CCK-8法检测细胞增殖情况,EDU试剂盒检测EDU细胞阳性率,结晶紫染色观察细胞集落形成单位。结果与结论:①与对照组比较,3个负压干预组骨髓间充质干细胞显著增殖(P克隆形成单位数量及EDU阳性细胞率较负压干预组明显降低;④结果表明,体外负压培养可能通过上调血管内皮生长因子分泌水平促进骨髓间充质干细胞增殖。

关键词：骨髓间充质干细胞负压培养细胞增殖血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体克隆形成单位

再生障碍性贫血患者造血祖细胞对环孢菌素A反应性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第三军医大学学报 2004年第18期26卷 1696-1697页

作者：贾志凌何学鹏刘端祺陈书长中国人民解放军北京军区总医院肿瘤科北京100700 北京协和医院血液科北京100730

近年来国内外相继报道了临床应用环孢菌素A (cyclosporin A, CSA) 对再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)有较好疗效,为了进一步研究CSA对AA的治疗作用我们观察了CSA在体外对54例AA和30例正常人CFU-GM、CFU-E的作用,现报道如下.……

关键词：环孢菌素A 再生障碍性贫血粒细胞/巨噬细胞克隆形成单位红系克隆形成单位

氨氯地平对氧化低密度脂蛋白致大鼠骨髓内皮祖细胞损伤的保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

氨氯地平对氧化低密度脂蛋白致大鼠骨髓内皮祖细胞损伤的保护作用

作者：童海南华大学

学位级别：硕士

目的:氨氯地平对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)致大鼠骨髓内皮祖细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法:实验分为三组,①对照组:加等量含200μmol/L DMSO的全培养液;②oxLDL组(50μg/ml oxLDL)组;③氨氯地平组:50μg/ml oxLDL+0.5μmol/L氨... 详细信息

目的:氨氯地平对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)致大鼠骨髓内皮祖细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法:实验分为三组,①对照组:加等量含200μmol/L DMSO的全培养液;②oxLDL组(50μg/ml oxLDL)组;③氨氯地平组:50μg/ml oxLDL+0.5μmol/L氨氯地平。贴壁法培养分离与培养内皮祖细胞(EPCs),用细胞免疫荧光、流式细胞术和摄取acLDL和结合UEA-1三种方法联合鉴定EPCs,MTT法检测细胞增殖,transwell测定细胞迁移,明胶粘附法测定EPCs的粘附,photshop7.0计算血管样结构长度,显微镜下观测单个细胞克隆大小和克隆数目,RT-PCR和western blotting分别检测一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA水平和蛋白表达情况,细胞免疫组织化学技术检测eNOS蛋白在EPCs的表达和分布情况,并采用DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧(ROS)的量,采用Griess试剂法测定一氧化氮(NO)水平。结果:①采用贴壁法能从大鼠骨髓的单个核细胞中分离出纯度达70%以上的CD133+/VEGFR-2+双阳性EPCs;②EPCs在第3d时可见集落形成单位(CFUs)出现,第14d时可见铺路石内皮细胞样形态出现;③0.5μmol/L氨氯地平可显著拮抗oxLDL对EPCs增殖的抑制作用;④EPCs经50μg/ml的oxLDL处理后,细胞的迁移能力下降近3倍,而0.5μmol/L氨氯地平可基本恢复EPCs的迁移能力;⑤EPCs经50μg/ml的oxLDL处理后,细胞的克隆形成能力显著下降(7.56±0.85比2.3±0.45,P克隆形成能力(5.6±1.54比2.3±0.45,P形成能力显著下降(15.13mm±1.62mm/每个视野比1.52 mm±0.71 mm /每个视野,P形成能力(11.01 mm±2.14 mm /每个视野比1.52 mm±0.71 mm /每个视野,P<0.01,n=5)。机制研究发现:①EPCs经过50μg/ml的oxLDL处理后, eNOS mRNA和蛋白表达均显著下调,一氧化氮(NO)显著减少(24.35±4.62比11.44±1.15),而oxLDL的这种作用可因0.5μmol/L氨氯地平能显著改善,相对于oxLDL处理组,eNOS显著上调(P<0.01,n=3或n=5),NO生成显著增加(18.17.35±1.94比11.44±1.15,P<0.01,n=3);②EPCs经50μg/ml的oxLDL处理后,细胞的活性氧生成显著增加(荧光强度为1.00±0.25比2.53±0.32,P<0.01,n=3),而0.5μmol/L氨氯地平可显著抑制活性氧的生成(荧光强度为2.53±0.32比1.56±0.18,P<0.01,n=3)。结论:氨氯地平能拮抗oxLDL对EPCs的损伤,氨氯地平的拮抗作用与上调eNOS表达和降低活性氧的生成有关。

关键词：内皮祖细胞氧化低密度脂蛋白氨氯地平一氧化氮合酶增殖迁移粘附克隆形成单位血管样结构活性氧

LP（a）对小鼠骨髓源性内皮祖细胞损伤作用的初步研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

LP（a）对小鼠骨髓源性内皮祖细胞损伤作用的初步研究

作者：苏维南华大学

学位级别：硕士

目的：初步探讨心血管疾病独立危险因子脂蛋白（a）[LP（a）]对小鼠骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）的损伤作用及其可能的机制。方法：实验分为6组：①对照组，加等量含200μmol/L EDTA的全培养液;②1μg/ml的LP（a）处理组，③10μg/ml LP... 详细信息

目的：初步探讨心血管疾病独立危险因子脂蛋白（a）[LP（a）]对小鼠骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）的损伤作用及其可能的机制。方法：实验分为6组：①对照组，加等量含200μmol/L EDTA的全培养液;②1μg/ml的LP（a）处理组，③10μg/ml LP（a）处理组，④100μg/ml的LP（a）处理组，⑤300μg/ml LP（a）处理组，⑥600μg/ml LP（a）处理组。贴壁法分离与培养内皮祖细胞（EPCs），摄取ac-LDL和结合UEA-1鉴定EPCs，MTT法检测细胞存活与增殖，transwell测定细胞迁移，明胶粘附法测定EPCs的粘附，基质胶上种植EPCs，photshop7.0计算血管长度，显微镜下观测单个细胞克隆大小和克隆数目，RT-PCR和western blotting分别检测一氧化氮合酶（eNOS）的mRNA水平和蛋白表达情况，细胞免疫组织化学技术检测eNOS蛋白在EPCs的表达和分布情况，并采用DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧（ROS）的量，采用Griess试剂法测定一氧化氮（NO）水平。结果：①采用贴壁法能从小鼠鼠骨髓的单个核细胞中分离出纯度达70%以上的EPCs。②LP（a）剂量依赖性影响EPCs存活，100μg/ml LP（a）开始对EPCs产生一定的破坏作用，300μg/ml LP（a）对EPCs的破坏作用急速加大。③1μg/mlLP（a）即能显著抑制EPCs的迁移，当LP（a）浓度达到10μg/ml时，迁移到下槽的细胞数目大大减少，其迁移细胞数不到对照组的1/6，LP（a）浓度为100μg/ml时，其迁移细胞数减少到对照组的1/9，300μg/ml时其迁移细胞数约为对照组的1/14。④LP（a）剂量依赖性抑制EPCs的粘附。1μg/ml的LP（a）可明显减少EPCs粘附细胞数目（145.2±8.4个/每个视野vs115.2±12.6个/每个视野，P＜0.05，n=5），当LP（a）的浓度达到10μg/ml时，EPCs粘附能力进一步下降，下降到对照组的1/2，当LP（a）的浓度达到100μg/ml时下降到对照组的约1/3，当LP（a）的浓度达到300μg/ml时，EPCs粘附能力下降最显著，其下降到对照组的约1/16。⑤EPCs经10μg/ml LP（a）处理后，血管形成能力的明显受到损伤，当LP（a）的浓度增加到100μg/ml时，EPCs的血管形成能力大大减弱，已经不到对照组的1/4（36.34±1.54mm/每个视野vs8.76±0.62mm/每个视野，P＜0.001，n=5）;当LP（a）的浓度增加到300μg/ml时，差不多已经见不到完整的血管样结构。⑥经100μg/ml的LP（a）处理后，不但克隆数目明显减少（10.2±1.3vs3.1±0.4，P＜0.01，n=5），而且克隆生长明显受到抑制。⑦机制研究发现： EPCs经过100μg/ml的LP（a）处理后， eNOS mRNA和蛋白表达均显著下调，一氧化氮（NO）显著减少（36.35±3.91vs3.91±0.79，P＜0.001，n=3）。活性氧检测结果表明，在1μg/ml LP（a）作用下，活性氧产生显著增加（1±0.12vs3.92±0.36，P＜0.05，n=5）;当LP（a）的浓度为10μg/ml时，荧光强度是对照组的近15倍;当LP（a）的浓度为100μg/ml时，与前述各组相比较，胞内绿色荧光强度和发出绿色荧光的细胞均增多（图12D），其荧光强度是对照组的31倍多，是1μg/mlLP（a）的近8倍，是10μg/ml LP（a）的2倍多。结论： ①LP（a）浓度依赖性地抑制EPCs增殖;②LP（a）浓度依赖性地抑制EPCs迁移;③LP（a）浓度依赖性地抑制EPCs粘附;④LP（a）浓度依赖性地抑制EPCs血管形成能力;⑤LP（a）抑制EPCs的克隆形成;⑥LP（a）对EPCs的损伤作用与抑制eNOS表达和NO生成有关，还与促进活性氧生成有关。

关键词：内皮祖细胞脂蛋白(a) 损伤一氧化氮合酶增殖迁移粘附克隆形成单位血管样结构活性氧

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

骨髓基质细胞成脂肪分化的研究进展

中国骨质疏松杂志 2006年第5期12卷 543-546页

作者：范焕琼崔燎广东医学院药理教研室

实验与临床研究证明,骨髓基质细胞成脂肪分化与骨质疏松存在着不可忽视的关系.在去卵巢或类固醇诱发的骨质疏松的动物模型均发现,骨量的丢失伴有骨髓腔内的脂肪细胞的数目大大增加.各种原因导致的骨质疏松患者中,骨髓腔内的脂肪细胞与... 详细信息

实验与临床研究证明,骨髓基质细胞成脂肪分化与骨质疏松存在着不可忽视的关系.在去卵巢或类固醇诱发的骨质疏松的动物模型均发现,骨量的丢失伴有骨髓腔内的脂肪细胞的数目大大增加.各种原因导致的骨质疏松患者中,骨髓腔内的脂肪细胞与松质的骨量成反比.对成纤维细胞克隆形成单位(CFU-Fs)的分析表明,9月龄大鼠骨髓中的基质干细胞数量明显少于6月龄大鼠[1],提示了骨髓基质细胞数量的减少和髓内脂肪细胞的增多存在某种关系.

关键词：骨髓基质细胞成脂肪分化骨质疏松患者干细胞数量脂肪细胞克隆形成单位骨髓腔内成纤维细胞

补肾中药诱导干预骨髓间充质干细胞成骨分化研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用中医药杂志 2013年第4期29卷 324-326页

作者：李文宝李刚山东中医药大学第一临床学院山东中医药大学附属医院骨科山东济南250014

干细胞是一种具有自我更新，高度增殖和多向分化潜能的细胞。骨髓组织中有两种干细胞，即造血干细胞和骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcell，MSCs），后者早期称为克隆形成单位成纤维细胞（colony—forming—unitsfibroblasts，CFU—... 详细信息

干细胞是一种具有自我更新，高度增殖和多向分化潜能的细胞。骨髓组织中有两种干细胞，即造血干细胞和骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcell，MSCs），后者早期称为克隆形成单位成纤维细胞（colony—forming—unitsfibroblasts，CFU—F）或骨髓基质细胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）。BMSCs在体外的概念是指能够快速贴壁，容易克隆和持续扩增的骨髓来源的细胞。BMSCs在一定的条件下可以分化为成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、脂肪细胞等。近几年来利用中药制剂诱导骨髓间充质细胞定向分化的成骨细胞移植治疗骨缺损导致的骨不连和延迟愈合以及股骨头坏死等疾病受到了广泛的关注，成为临床和实验研究的热点之一。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化中药诱导克隆形成单位 BMSCs 干预补肾多向分化潜能

基因治疗中高效表达逆病毒的包装细胞系建立及其影响因素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第四军医大学学报 1998年第2期19卷 158-158页

作者：张惠中王文亮朱明华第四军医大学基础部病理学教研室西安710033

高效稳定表达逆病毒颗粒的包装细胞系的建立是逆病毒载体介导的基因治疗中关键步骤,是决定基因治疗成败的关键因素[‘’.尽管未来将有越来越多的携带有目的基因的逆病毒载体借该技术进人临床匕],但目前对其应用中技术指标进行系统报道较... 详细信息

高效稳定表达逆病毒颗粒的包装细胞系的建立是逆病毒载体介导的基因治疗中关键步骤,是决定基因治疗成败的关键因素[‘’.尽管未来将有越来越多的携带有目的基因的逆病毒载体借该技术进人临床匕],但目前对其应用中技术指标进行系统报道较少.为指导相关技术的临床应用,我们对其建立过程及其影响因素进行厂系统的比较性研究.

关键词： PA317 克隆形成单位逆转录病毒基因治疗