检索结果-南通市图书馆

固相萃取-高效液相色谱法同时测定克伦特罗和沙丁胺醇

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分析科学学报 2003年第2期19卷 145-147页

作者：尚红霞卢业玉黄宝华何欣广东工业大学轻化学院广州510090

提出用固相萃取 -高效液相色谱法同时测定饲料中微量克伦特罗和沙丁胺醇的新方法。选用 Dikma Diamonsil C18-ODS分析柱 (2 0 0× 4.6mm,5μm) ,乙腈 -0 .0 1mol/ L KH2 PO4 (p H 3 .0 )作流动相 ,应用波长编程进行检测。克伦特罗和沙... 详细信息

提出用固相萃取 -高效液相色谱法同时测定饲料中微量克伦特罗和沙丁胺醇的新方法。选用 Dikma Diamonsil C18-ODS分析柱 (2 0 0× 4.6mm,5μm) ,乙腈 -0 .0 1mol/ L KH2 PO4 (p H 3 .0 )作流动相 ,应用波长编程进行检测。克伦特罗和沙丁胺醇的线性范围为 0 .1～ 1 0 0μg/ m L,相关系数分别为 0 .99999和 0 .99977,检出限分别为0 .3 1 ng/ m L和 0 .2 4ng/ m L ,回收率分别为 91 .2 %～ 92 .0 %和 91 .9%～ 93 .0 % ,相对标准偏差分别是 1 .2 0 %～ 2 .0 5%和 1 .2 9%～ 2 .51 %。

关键词：固相萃取高效液相色谱法同时测定克伦特罗沙丁胺醇饲料添加剂合成饲料分析

抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件的初步研究

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食品工业科技 2010年第9期31卷 161-165页

作者：刘细霞王弘杨金易张宏斌雷红涛沈玉栋孙远明广东省食品质量安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所广东广州510640 广州军区广州总医院医学实验中心广东广州510010

初步研究抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)的表达条件,提高CBLscFv-AP融合蛋白的表达量。采用液体发酵法培养抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)基因工程菌,研究不同宿主菌、初始pH、诱导时期、诱导... 详细信息

初步研究抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)的表达条件,提高CBLscFv-AP融合蛋白的表达量。采用液体发酵法培养抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)基因工程菌,研究不同宿主菌、初始pH、诱导时期、诱导时间和培养基对CBLscFv-AP融合蛋白表达量的影响以及重组质粒的稳定性。选用E·coliBL21(DE3)pLysS为宿主菌,在初始pH为7·4的LB培养基中培养至A600nm为0·8～0·9时,诱导表达8h,为CBLscFv-AP融合蛋白最佳表达条件。而且重组质粒pBV220-scFv-phoA具有较好的结构稳定性。在该表达条件下,提高了CBLscFv-AP融合蛋白的表达量,为进行大规模发酵生产CBLscFv-AP融合蛋白奠定基础。

关键词：克伦特罗单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白表达条件

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抗克伦特罗重组抗体发酵条件的优化

广东农业科学 2009年第8期36卷 200-202页

作者：梁艳王弘杨金易刘细霞徐小艳张宏斌雷红涛沈玉栋孙远明广州市质量监督检测研究院广东广州510110 广东省食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所广东广州510640 广州军区广州总医院广东广州510010

为提高抗克伦特罗(clenbuterol,CBL)单链抗体(single chian Fv,scFv)的表达量,考察了Mg2+、Ca2+、NH4+、NaHPO4-等无机离子,初始pH值以及装液量对重组抗体表达量的影响。优化试验结果表明,重组大肠杆菌E.coli BL21在初始pH值为7.2、含2 ... 详细信息

为提高抗克伦特罗(clenbuterol,CBL)单链抗体(single chian Fv,scFv)的表达量,考察了Mg2+、Ca2+、NH4+、NaHPO4-等无机离子,初始pH值以及装液量对重组抗体表达量的影响。优化试验结果表明,重组大肠杆菌E.coli BL21在初始pH值为7.2、含2 mmol/L Ca2+和20 mmol/L NaHPO4-的培养基中培养,装液量为25 mL,42℃诱导表达后抗CBL-scFv的表达量为33.7%。

关键词：克伦特罗重组抗体发酵

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免疫分析法在克伦特罗残留检测中的应用

化学试剂 2019年第7期41卷 675-681页

作者：韦林洪张军王承莉董大鹏王赪胤扬州市职业大学生物与化工工程学院江苏扬州225009 扬州市职业大学科技产业处江苏扬州225009 扬州大学化学化工学院江苏扬州225002

克伦特罗能提高脂肪型动物的瘦肉和脂肪的比率,因此常被用做畜禽饲料添加剂。由于其化学性质稳定,残留在畜禽产品中的克伦特罗对人类健康产生了严重的危害,故检测畜禽产品中的克伦特罗残留对于保证食品安全非常重要。免疫分析法特异性... 详细信息

克伦特罗能提高脂肪型动物的瘦肉和脂肪的比率,因此常被用做畜禽饲料添加剂。由于其化学性质稳定,残留在畜禽产品中的克伦特罗对人类健康产生了严重的危害,故检测畜禽产品中的克伦特罗残留对于保证食品安全非常重要。免疫分析法特异性强、灵敏度高、反应条件温和,广泛应用于食品安全检测。综述了免疫亲和色谱法、放射免疫分析法、酶联免疫分析法、化学发光免疫分析法、免疫层析法、时间分辨荧光免疫分析法、免疫传感器、分子印迹免疫分析法等免疫分析法在克伦特罗残留分析中的应用,并展望了这些分析方法的发展趋势。

关键词：免疫分析法克伦特罗分析

抗克伦特罗单克隆抗体杂交瘤的建立及其分泌单抗的免疫学特性鉴定

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中国免疫学杂志 2004年第3期20卷 194-198页

作者：王选年周继勇杨艳艳邢广旭李青梅杨继飞柴书军赵东康晓笛张改平河南职业技术师范学院动物科学系浙江大学动物科学学院河南省农业科学院生物技术研究所河南百奥生物工程有限公司郑州450002

目的 :建立抗克伦特罗 (CL)单克隆抗体杂交瘤细胞系 ,制备CL单克隆抗体 ,并鉴定其免疫学特性。方法 :用重氮化法将半抗原CL偶联于载体蛋白BSA ,形成结合抗原BSA CL ;以BSA CL免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术建立分泌CL单克隆抗体细胞株 ... 详细信息

目的 :建立抗克伦特罗 (CL)单克隆抗体杂交瘤细胞系 ,制备CL单克隆抗体 ,并鉴定其免疫学特性。方法 :用重氮化法将半抗原CL偶联于载体蛋白BSA ,形成结合抗原BSA CL ;以BSA CL免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术建立分泌CL单克隆抗体细胞株 ;用体内诱生腹水法生产CL单抗 ,硫酸钠盐析法提纯。应用抗小鼠同种型抗体测定单抗的同种型 ,用竞争性ELISA和胶体金膜层析试验测定CL单抗的反应特异性和反应动力学。结果 :筛选出C 4G1、C 2H6、C 2D6和C 4C94株高敏感性和高特异性杂交瘤生产单抗 ,其单抗的间接ELISA效价分别为 5× 10 -5、3× 10 -4、6× 10 -4、2× 10 -5;同种型分别为IgG1/κ、IgG1/κ、IgG2a/κ、IgG2a/λ。C 4G1的亲和力常数K =1 6 8× 10 8L/mol,C 2H6的亲和力常数K =1 3× 10 8L/mol。经WestGold蛋白质印迹鉴定单抗与CL特异性结合。C 4G1单抗对CL的半数抑制浓度 (IC50 )为 7 94ng/ml,对沙丁胺醇 (Sb)的IC50 为 10 0 0ng/ml,对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的IC50 均≥ 6 4 0 0ng/ml;C 4G1单抗与Sb的交叉反应性为0 79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 12 % ,而与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。结论

关键词： β-肾上腺素激动剂克伦特罗单克隆抗体免疫学特性

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γ辐照降解肉制品中克伦特罗的初步研究

江苏农业科学 2010年第6期38卷 414-416页

作者：杨郡亭冯敏赵永富季萍石岩李俐俐唐玉新江苏省农业科学院原子能农业利用研究所江苏南京210014 江苏瑞迪生科技有限公司江苏南京210014

采用酶联免疫法(ELISA)检测肉制品中瘦肉精——克伦特罗γ射线辐照降解效应,结果表明:辐照可以显著降低肉制品中克伦特罗含量,降解率随辐照剂量增大而提高,当辐照剂量为3.4 kGy时,肉制品中克伦特罗的降解率在80%以上。

关键词：克伦特罗降解

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抗克伦特罗单链抗体基因构建及蛋白结构模拟

食品科学 2009年第13期30卷 227-231页

作者：王弘刘细霞潘科雷红涛沈玉栋孙远明广东省食品质量安全重点实验室、华南农业大学食品质量与安全研究所广东广州510640

目的:构建抗克伦特罗单链抗体(scFv)基因cbl,进行蛋白质结构模拟并对其理化特性进行分析。方法:采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗克伦特罗mAb的杂交瘤细胞株5D1为原料,构建抗克伦特罗scFv基因cbl,进行测序,采用生物信息软件对氨基... 详细信息

目的:构建抗克伦特罗单链抗体(scFv)基因cbl,进行蛋白质结构模拟并对其理化特性进行分析。方法:采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗克伦特罗mAb的杂交瘤细胞株5D1为原料,构建抗克伦特罗scFv基因cbl,进行测序,采用生物信息软件对氨基酸序列推导并进行结构预测,同时对理化性质进行分析。结果:抗克伦特罗scFv基因cbl全长720bp,对应225个氨基酸,单链抗体分子量约为25826.6,等电点预测值8.78,为碱性蛋白质;二级结构显示抗克伦特罗单链抗体含α螺旋20处,β折叠99处,β转角28处,随机卷曲93处。cbl三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)形成一个疏水的"口袋",Linker游离于此结构之外,符合scFv的结构特点,明显具有抗原结合位点的空间构象,理论上应该具有良好的抗原结合活性。结论:构建一个抗克伦特罗scFv基因cbl,应用信息学技术所获得的预测和分析结果为抗克伦特罗单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息。

关键词：克伦特罗单链抗体结构预测

高效液相色谱-质谱法同时测定猪尿中克伦特罗和莱克多巴胺

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理化检验（化学分册） 2011年第7期47卷 859-860,862页

作者：陈海玲郝春莉黄华斌蔡尽忠赵丽庄峙厦厦门华厦职业学院食品药品安全检测中心厦门361024 厦门大学化学化工学院厦门361005

克伦特罗和莱克多巴胺同属于β_2-肾上腺素受体激动剂（简称β_2-兴奋剂）,能够改善动物养分的代谢途径,促进动物肌肉的合成,抑制脂肪合成的积累,因此常被不法分子添加于动物饲料或饮用水中,以提高胴体瘦肉率。由于其易在动物肝脏中积... 详细信息

克伦特罗和莱克多巴胺同属于β_2-肾上腺素受体激动剂（简称β_2-兴奋剂）,能够改善动物养分的代谢途径,促进动物肌肉的合成,抑制脂肪合成的积累,因此常被不法分子添加于动物饲料或饮用水中,以提高胴体瘦肉率。由于其易在动物肝脏中积聚残留,并通过食物链进入人体。

关键词：高效液相色谱-质谱法克伦特罗莱克多巴胺同时测定猪尿肾上腺素受体动物肌肉脂肪合成

Nafion修饰电极检测饲料中克伦特罗的研究

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饲料工业 2004年第2期25卷 47-49页

作者：柴春彦刘国艳朱元凯上海交通大学农业与生物学院动物科学系

为探索检测克伦特罗等激素类药物快速、灵敏的检测方法,本文采用玻碳电极为工作电极,以伏安法检测了克伦特罗的电化学行为。克伦特罗在+1.24V处具有氧化峰电流,检测的线性范围为1×10-7mol/l～1×10-5mol/l,检测限为1×10-8mol/l,回收率... 详细信息

为探索检测克伦特罗等激素类药物快速、灵敏的检测方法,本文采用玻碳电极为工作电极,以伏安法检测了克伦特罗的电化学行为。克伦特罗在+1.24V处具有氧化峰电流,检测的线性范围为1×10-7mol/l～1×10-5mol/l,检测限为1×10-8mol/l,回收率达97%。当玻碳电极用Nafion修饰后,可显著提高检测的特异性及灵敏度,使检测下限达1×10-9mol/l。同时本文对不同支持电解质溶液、pH值、断路富积时间对测定结果的影响及修饰电极的再生等进行了详细的探讨。

关键词：饲料克伦特罗检测方法 Nafion修饰电极现场检测