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基于QuEChERS法结合UPLC-MS/MS同时测定僵蚕和土鳖虫中14种真菌毒素检测技术研究

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中国中药杂志 2024年

作者：朱贵红杨昌贵江维克郭兰萍康传志袁青松吴小风周涛贵州中医药大学中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室

建立一种可同时测定僵蚕和土鳖虫材中多种真菌毒素检测方法，为该类药材的监测和质量控制提供技术支撑。以易霉变的僵蚕、土鳖虫为研究对象，采用UPLC-MS/MS技术进行检测，并对色谱、质谱条件、供试品制备方法和QuEChERS净化参数进行优... 详细信息

建立一种可同时测定僵蚕和土鳖虫材中多种真菌毒素检测方法，为该类药材的监测和质量控制提供技术支撑。以易霉变的僵蚕、土鳖虫为研究对象，采用UPLC-MS/MS技术进行检测，并对色谱、质谱条件、供试品制备方法和QuEChERS净化参数进行优化，在多反应监测模式（MRM）下扫描，基质标准曲线法定量分析。所检14种真菌毒素在0.04～500 ng·mL-1内线性关系良好，相关系数（r）≥ 0.99，检出限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）分别为0.01～0.648 μg·kg-1和0.022～1.435 μg·kg-1；在高、中、低3个添加水平下，所测毒素平均回收率为70.99%～124.7%，相对标准偏差（RSD）为0.44%～8.5%，均符合2020年版《中国药典》的规定。将方法应用于20批次僵蚕、土鳖虫药材中真菌毒素的检测，共检测出DON、AFB1、ST、AFG1、OTA 5种毒素。其中，10批僵蚕样本中，有OTA、AFB1、AFG13种毒素被检出，AFs存在10.0%的超标；10份土鳖虫样本中检出AFB1、AFG1、ST、DON 4种毒素，AFB1、AFs均存在10.0%的超标，存在一定的风险，应重点关注。本研究成功建立了一种能适用于僵蚕和土鳖虫等动物类中药材中多种真菌毒素的检测方法，该方法适用范围广，解决了现有真菌毒素检测方法适用性窄的问题，可为其他易霉变中药材真菌毒素检测方法的开发提供参考。

关键词：僵蚕土鳖虫真菌毒素 QuEChERS UPLC-MS/MS

HPLC法测定僵蚕5个核苷类成分的含量及聚类分析

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辽宁中医杂志 2024年

作者：杨永泓种叶敏齐景梁杨蕾殷莉丽李敏苟琰成都中医药大学药学院/现代中药产业学院省部共建西南特色中药资源国家重点实验室四川省药品检验研究院(四川省医疗器械检测中心)国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室

目的：建立同时测定僵蚕药材中5种核苷类成分含量的方法，并比较不同来源僵蚕药材中上述成分的差异性，为僵蚕药材的质量控制提供参考。方法：采用月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色谱柱；以纯水-甲醇为流动相，梯度洗脱，流速为0.8 ... 详细信息

目的：建立同时测定僵蚕药材中5种核苷类成分含量的方法，并比较不同来源僵蚕药材中上述成分的差异性，为僵蚕药材的质量控制提供参考。方法：采用月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色谱柱；以纯水-甲醇为流动相，梯度洗脱，流速为0.8 mL/min；检测波长为260 nm，柱温为26 ℃；进样量为20 μL。以21批不同来源的僵蚕药材为样品，测定上述5种成分含量，并采用SPSS 25.0统计学软件对21批不同来源的僵蚕药进行聚类分析。结果：尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷及腺嘌呤分别在1～32 μg/mL(r=1.0000)、0.3～9.6 μg/mL(r=0.9999)、2～64 μg/mL(r=0.9999)、5～160 μg/mL(r=0.9998)、5～160 μg/mL(r=0.9999)的浓度范围内与峰面积的线性关系良好，精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD＜3.00%，平均加样回收率为98.86%～101.73%，RSD＜3.00%。不同来源僵蚕之间5个成分含量存在显著性差异。经聚类分析，21批样品共聚为3类，产地样品即S1、S4、S5、S7、S8、S9聚类第Ⅰ类，市场样品聚为第Ⅱ类，产地样品S2、S3、S6聚为第Ⅲ类。结论：该方法简便准确、重复性好，可用于同时测定僵蚕药材中上述5种核苷类成分的含量。同一产区僵蚕质量较为稳定，含量较高，市场僵蚕来源复杂，含量较低。

关键词：僵蚕核苷类成分含量测定质量评价聚类分析

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僵蚕与其掺伪品鉴别方法的研究

特产研究 2024年第1期46卷 124-128,135页

作者：崔业波马晓静王丹彧赵艳马彧四平市食品药品检验所吉林四平136000 吉林省药品检验研究院吉林长春130117

为探索僵蚕与其掺伪品的鉴别方法。本研究通过样品形态、质地、断面和气味特征,对僵蚕及其掺伪品进行性状描述;采用光学显微技术比较僵蚕与掺伪品体表被有的白色粉霜状物的区别;用稀盐酸与僵蚕体表被有的白色粉霜状物反应,判断僵蚕与其... 详细信息

为探索僵蚕与其掺伪品的鉴别方法。本研究通过样品形态、质地、断面和气味特征,对僵蚕及其掺伪品进行性状描述;采用光学显微技术比较僵蚕与掺伪品体表被有的白色粉霜状物的区别;用稀盐酸与僵蚕体表被有的白色粉霜状物反应,判断僵蚕与其掺伪品的真伪;采用薄层色谱法,以硅胶G为固定相,以石油醚(60~90℃)-丙酮(7:3)为展开剂,置365nm紫外灯下检视,对僵蚕与掺伪品甲醇提取物进行鉴别。结果表明,与正品僵蚕比较,通过性状鉴别,掺伪品可分为3类,通过光学显微镜检查,部分样品中检出淀粉粒,部分样品呈碳酸盐或碳酸氢盐阳性反应,部分样品的薄层色谱特征存在明显差异。该方法快速、易操作、专属性良好,为僵蚕的鉴别方法提供参考。

关键词：僵蚕性状鉴别显微鉴别理化鉴别

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僵蚕中黄曲霉毒素的测定及风险评估

质量安全与检验检测 2024年第1期34卷 50-54,107页

作者：马晓静张亦萌崔业波马彧四平市食品药品检验所吉林四平136000

采用高效液相色谱法,对僵蚕药材及其饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)残留量进行分析,并对黄曲霉毒素B_(1)的安全风险进行评估,为僵蚕药材及其饮片的市场监管提供依据。样品经提取后,通过免疫亲和柱处理,采用高效液相色谱... 详细信息

采用高效液相色谱法,对僵蚕药材及其饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)残留量进行分析,并对黄曲霉毒素B_(1)的安全风险进行评估,为僵蚕药材及其饮片的市场监管提供依据。样品经提取后,通过免疫亲和柱处理,采用高效液相色谱法测定,色谱柱为YMC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,荧光检测器激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。对收集的24批次僵蚕药材及其饮片进行定量分析。采用暴露限值法对黄曲霉毒素B_(1)进行风险评估。结果显示,黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)检测方法的线性关系、精密度、回收率良好;僵蚕药材及其饮片中黄曲霉毒素整体检出率较高,有1批黄曲霉毒素B_(1)超出限量,黄曲霉毒素B_(1)的MOE值≤10000。僵蚕中黄曲霉毒素B_(1)的暴露水平可能会对人体健康产生不良影响,对人体健康存在潜在风险,需要引起关注。本研究可为僵蚕黄曲霉毒素的检测和风险评估提供技术支持。

关键词：黄曲霉毒素僵蚕高效液相色谱法风险评估

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僵蚕药材及饮片质量标准研究

中国药物评价 2024年第1期41卷 47-51页

作者：高鹏文永盛罗霄代琪李及许莉成都市药品检验研究院/国家药品监督管理局中药材质量监测评价重点实验室四川成都610045

目的:对不同来源僵蚕质量进行评价,完善其质量标准。方法:建立僵蚕中白僵菌素、草酸铵HPLC含量测定方法,对58批次具有代表性的不同来源僵蚕药材及饮片进行测定分析。结果:58批次僵蚕样品中,10批次未检出特征性成分白僵菌素、草酸铵,占比... 详细信息

目的:对不同来源僵蚕质量进行评价,完善其质量标准。方法:建立僵蚕中白僵菌素、草酸铵HPLC含量测定方法,对58批次具有代表性的不同来源僵蚕药材及饮片进行测定分析。结果:58批次僵蚕样品中,10批次未检出特征性成分白僵菌素、草酸铵,占比17.2%。白僵菌素含量分布在0.0101%~0.1192%间,草酸铵含量分布在4.71%~10.84%间,两者呈显著正相关(P僵蚕质量。僵蚕存在较高质量风险,有待进一步完善僵蚕质量标准。

关键词：僵蚕白僵菌素草酸铵质量评价

《中医方剂大辞典》含僵蚕方剂的组方规律分析

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光明中医 2024年第13期 2569-2573页

作者：姚海霞赵桂峰天津中医药大学天津中医药大学第一附属医院心内科

目的探索《中医方剂大辞典》中含僵蚕内服方剂的用药配伍规律。方法利用中医传承计算平台V 3.0对《中医方剂大辞典》检索出的含僵蚕方剂的用药频次、功效分类、四气五味、归经和主治疾病进行统计分析，应用关联规则探索整体用药规律... 详细信息

目的探索《中医方剂大辞典》中含僵蚕内服方剂的用药配伍规律。方法利用中医传承计算平台V 3.0对《中医方剂大辞典》检索出的含僵蚕方剂的用药频次、功效分类、四气五味、归经和主治疾病进行统计分析，应用关联规则探索整体用药规律。结果含僵蚕的内服方剂共1582个，涉及中药339味。功效分类以平肝息风类为主。四气五味分布以辛、温为主，归经分布依次为肝、肺、脾等。主治疾病共258种，以惊风、中风、疮疡肿毒、咽喉疾病为主。结论《中医方剂大辞典》收录的含僵蚕内服方剂整体用药辛散温通，功效以祛风止痉、化痰通络为主。进一步利用关联规则分析僵蚕在治疗高频疾病惊风、中风、疮疡肿毒、咽喉疾病时的组方配伍规律，为其临床使用提供借鉴和依据。

关键词：僵蚕中医传承计算平台数据挖掘用药规律组方配伍《中医方剂大辞典》

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炒僵蚕鉴别方法研究

亚太传统医药 2024年第1期20卷 69-71页

作者：崔业波王丹马晓静王丹彧马彧四平市食品药品检验所吉林四平136000

目的:基于显微鉴别技术、微量升华技术和薄层色谱技术,建立炒僵蚕饮片的鉴别方法。方法:依据显微鉴别法,对炒僵蚕粉末的显微特征进行描述;采用微量升华法,对炒僵蚕升华物结晶状态进行描述;采用薄层色谱法,僵蚕对照药材和伪品为对照,对... 详细信息

目的:基于显微鉴别技术、微量升华技术和薄层色谱技术,建立炒僵蚕饮片的鉴别方法。方法:依据显微鉴别法,对炒僵蚕粉末的显微特征进行描述;采用微量升华法,对炒僵蚕升华物结晶状态进行描述;采用薄层色谱法,僵蚕对照药材和伪品为对照,对炒僵蚕进行薄层色谱鉴别。结果:炒僵蚕粉末呈黄褐色,在显微镜下清晰可见菌丝体、体壁碎片、刚毛、未消化的桑叶组织、草酸钙簇晶、草酸钙方晶及导管等结构,与僵蚕对照药材类似;炒僵蚕的升华物呈霜花状、羽状结晶,与僵蚕对照药材类似;TLC图中,斑点清晰、专属性好。结论:该方法快速、易操作、专属性好,可作为炒僵蚕饮片的鉴别方法,并为提高鉴别标准提供参考。

关键词：僵蚕显微鉴别技术微量升华技术薄层色谱鉴别技术

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云南僵蚕生产技术

蚕桑茶叶通讯 2024年第2期 9-11页

作者：范永慧李继娅陈海佺李琼艳王永生刘敏云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所 661101

概述了白僵菌的分类和球孢白僵菌的浸染途径,结合饲养前准备、接种前饲育、接种、接种后饲育、采收及僵化等环节,重点介绍了僵蚕的饲养技术,提出了在僵蚕生产过程中的注意事项。

关键词：僵蚕侵染途径饲养技术

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川芎羌活僵蚕汤治疗原发性针刺样头痛1例

实用中医药杂志 2024年第4期40卷 788-789页

作者：常华军南京中医药大学泰州附属医院脑病科江苏泰州225300

原发性针刺样头痛是一种自发发生的短暂、局限的针刺样头痛,不伴有脑部潜在的结构性病变或者颅神经的病变[1]。国内对于原发性针刺样头痛的研究不多,关于中医药治疗原发性针刺样头痛的报道更少。现将川芎羌活僵蚕汤治疗原发性针刺样头痛... 详细信息

原发性针刺样头痛是一种自发发生的短暂、局限的针刺样头痛,不伴有脑部潜在的结构性病变或者颅神经的病变[1]。国内对于原发性针刺样头痛的研究不多,关于中医药治疗原发性针刺样头痛的报道更少。现将川芎羌活僵蚕汤治疗原发性针刺样头痛1例报道如下。1临床资料患者,男,38岁。因“右侧颞枕部针刺样疼痛4天”于2023年1月10日11时36分入院。

关键词：针刺样颅神经中医药治疗颞枕部僵蚕临床资料羌活川芎