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红细胞储存时间对输血不良反应发生的初步研究

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红细胞储存时间对输血不良反应发生的初步研究

作者：王向明北京协和医学院

学位级别：硕士

红细胞（RBC）储存是保证红细胞临床用血充足和安全的前提。然而,研究证实:红细胞在储存过程中发生了一系列形态学和理化性质等方面改变,其程度随着红细胞储存时间的延长而日渐明显;这种改变被称为红细胞储存损伤,并可能在一定程度上对... 详细信息

红细胞（RBC）储存是保证红细胞临床用血充足和安全的前提。然而,研究证实:红细胞在储存过程中发生了一系列形态学和理化性质等方面改变,其程度随着红细胞储存时间的延长而日渐明显;这种改变被称为红细胞储存损伤,并可能在一定程度上对于受血者产生不利影响。因此,近二十多年来红细胞储存损伤逐渐成为输血医学领域研究的重点。2015年,56个临床回顾性研究与8个随机对照研究的分析结果不但缺乏一致性;并且没有将输血不良反应作为研究终点。本研究将在课题组前期工作的基础上,第一部分从回顾性临床研究入手分析了临床输血不良反应发生的总体特点,并对红细胞储存时间与输血不良反应发生率的关系进行了初步分析。第二部分借鉴动物实验的感染模型来分析红细胞储存时间对于感染大鼠输注效果的影响。一、回顾性临床研究目的:调查成都市一家三甲综合医院7年来输血不良反应的发生情况,并分析红细胞储存时间与输血不良反应的相关性,为深入研究输血不良反应发生的相关因素提供参考。方法:通过查询成都市一家三甲综合医院近7年来不良反应回报单和输血不良反应记录,医院电子病历的输血管理系统以及患者病历等资料,获取并完善349例输血不良反应病历的具体信息。具体包括:不良反应发生日期、反应类型;血制品类型、剂量、血袋号和有效期;患者性别、年龄、科室、疾病类型、输血或妊娠生育史;处理方式和处理结果;通过电子病历的输血管理系统统计出25803例悬浮红细胞的有效期和输注日期。结果:2010年以来,从该院输血不良反应发生率来看,总体发生率为2.38±0.86‰（349 次/151605U）;血小板为 5.64‰,红细胞为 3.17‰,血浆为 1.28‰,冷沉淀为0.94‰。在非溶血性发热反应中RBC占64%（172/212）;过敏反应中血浆占38.1%（40/105）,血小板占28.6%（30/105）;消化内科和血液内科分别占输血反应总数的32%和21%（110/349和72/349）;消化道出血患者发生的不良反应中RBC占为93%（63/68）;肝病患者发生的不良反应中血浆占71%（17/24）;白血病患者发生的不良反应中血小板占57%（20/35）。悬浮红细胞占所有血制品使用总量的45.31%,其引起的输血不良反应占比为64%。储存期在第1、2、3和第4周的悬浮RBC不良反应发生率分别为5.66‰、4.49‰、3.65‰和 4.89‰。二、动物实验目的:探讨红细胞储存时间对大肠杆菌感染大鼠输注效果的影响;方法:将69只SPF级SD大鼠,根据是否使用免疫抑制剂（环磷酰胺和地塞米松）和输注RBCs的储存时间不同,随机分成2个实验组:免疫抑制+9 dRBCs组、免疫抑制+1 d RBCs组。1个对照组:免疫抑制+生理盐水（NS）组;一个空白组:单纯NS组;三免疫抑制组各为18只大鼠,空白组15只。每只大鼠经股静脉放出全身20%血液后,分别输注与失血量相同的储存9或1d的浓缩RBCs及等量NS,随后植入大肠杆菌溶液0.5ml,并连续观察7d。术后24 h,取尾静脉血用亚铁嗪微板法测定血清铁,并用LB培养基进行血细菌培养15 h后用紫外分光光度计测定OD600;术后24h处死各免疫抑制组大鼠3只/组,取组织做病理检查。结果:3个免疫抑制组分别输注9d、1d RBCs和NS后的大鼠死亡率分别为10/15,11/15和9/15（P＞0.05）,死亡大鼠的平均生存时间（h）分别为55.6±21.3、38±16.6 和 28.3±15.0（P＜0.05）;24h 后血清铁离子浓度（μmol/L）分别为 34.1±9.8,28±10.2,26.8 ± 9.0 和 22.4 ± 5.9（P＞0.05）;血培养的结果（OD=600nm）分别为 0.510±0.340,0.790±0-281,0.427±0.107 和 0.349±0.069（P＜0.05）;24 h回肠组织细菌计数（个/1000倍视野）分别为44±9,101±7 和 27±8（P＜0.05）。结论:1、在所有血液成分中,悬浮红细胞不仅临床用量最多,而且其引起的输血不良反应数量也最多。2、RBC发生的输血不良反应以非溶血性发热为主,其他血液成分以过敏反应为主;3、随着悬浮RBC储存时间的延长,其输血不良反应的发生率出现先降低后升高的趋势。4、输注不同储存时间的红细胞对大肠杆菌感染的免疫抑制大鼠死亡率没有明显影响;5、相比储存时间长的红细胞,新鲜红细胞促进了免疫抑制大鼠体内大肠杆菌的增值;并加速了感染大鼠的死亡。

关键词：输血红细胞储存损伤动物实验大鼠感染输血不良反应

一家三甲医院近7年输血不良反应的发生情况及原因分析

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中国输血杂志 2017年第4期30卷 375-378页

作者：王向明柏灵灵王珏尹湧华王旭宋宁田力康凯练正秋刘忠中国医学科学院北京协和医学院输血研究所四川成都610052 成都市第三人民医院输血科川北医学院医学检验系

目的全面了解该院7年来输血不良反应的发生情况,并分析其分布特点和可能的相关性因素,为深入研究输血不良反应的发生机制提供参考。方法通过手工查阅2010年以来所有输血不良反应的相关记录信息,通过电子病历的输血管理系统查阅2013年来... 详细信息

目的全面了解该院7年来输血不良反应的发生情况,并分析其分布特点和可能的相关性因素,为深入研究输血不良反应的发生机制提供参考。方法通过手工查阅2010年以来所有输血不良反应的相关记录信息,通过电子病历的输血管理系统查阅2013年来所有悬浮红细胞的有效期和发血日期。结果 2010年以来,从该院输血不良反应发生率来看,总体发生率为2.38±0.86‰(349次/151 605 U),血小板为5.64‰,红细胞为3.17‰,血浆为1.28‰,冷沉淀为0.94‰。在非溶血性发热反应中RBC占64%(172/212);过敏反应中血浆占38.1%(40/105),血小板占28.6%(30/105)。消化内科和血液内科分别占输血反应总数的32%和21%(110/349和72/349);消化道出血患者发生的不良反应中RBC占93%(63/68);肝病患者发生的不良反应中血浆占71%(17/24);白血病患者发生的不良反应中血小板占57%(20/35)。储存期为第1、2、3和第4周的悬浮RBC不良反应发生率分别为5.66‰、4.49‰、3.65‰和4.89‰。结论 RBC发生的输血不良反应以非溶血性发热为主,其他血液成分以过敏反应为主;随着悬浮RBC储存时间的延长,其输血不良反应的发生率出现先降低后升高的趋势。本研究不能完全排除疾病类型和相关血液成分之间发生特定输血不良反应的相关性。

关键词：输血不良反应消化道出血红细胞储存损伤临床输血

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体外贮存致悬浮红细胞凋亡损伤的研究

安徽医科大学学报 2015年第2期50卷 189-193页

作者：马文娟卞茂红郑美娟乔金平王峰许哲马胜利沈继龙安徽医科大学第一附属医院输血科合肥230022 安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 河南省永城市人民医院麻醉科永城476600 河南省永城市人民医院感染科永城476600 安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室合肥230032

目的探讨贮存期内不同保存时间致悬浮红细胞凋亡损伤及可能的机制。方法采集12例健康献血员血液,常规去除白细胞和血浆。取保存后3、11、19、27、35 d 5个时相点的红细胞,用凋亡试剂染色经流式细胞仪检测红细胞凋亡率及红细胞体积大小变... 详细信息

目的探讨贮存期内不同保存时间致悬浮红细胞凋亡损伤及可能的机制。方法采集12例健康献血员血液,常规去除白细胞和血浆。取保存后3、11、19、27、35 d 5个时相点的红细胞,用凋亡试剂染色经流式细胞仪检测红细胞凋亡率及红细胞体积大小变化,用Fluo-3 AM染色经流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度。同时留取上清液,利用酶标仪检测血红蛋白在405 nm的吸光度。结果与保存3 d的红细胞比较,红细胞凋亡率和细胞内Ca2+浓度逐渐增加,至27 d与35 d差异均有统计学意义(P储存损伤的原因之一。Ca2+内流可能是凋亡主要的发生机制。

关键词：悬浮红细胞储存损伤红细胞凋亡钙离子

血红素通过增强STAT3磷酸化加重脓毒症小鼠肺损伤作用的研究

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血红素通过增强STAT3磷酸化加重脓毒症小鼠肺损伤作用的研究

作者：王凌峰中国人民解放军陆军军医大学

学位级别：硕士

背景:红细胞的储存损伤(storage lesion)问题一直被众所关注,大量的临床研究表明输注储存时间长的红细胞将给患者带来不良临床预后。血红素作为血红蛋白的降解产物,是红细胞溶血后释放的主要损伤相关分子模式(damage associated molecul... 详细信息

背景:红细胞的储存损伤(storage lesion)问题一直被众所关注,大量的临床研究表明输注储存时间长的红细胞将给患者带来不良临床预后。血红素作为血红蛋白的降解产物,是红细胞溶血后释放的主要损伤相关分子模式(damage associated molecular patterns,DAMPs),亦是储存红细胞释放出的主要毒性物质,其在储存红细胞上清液中的浓度随着储存时间的延长逐渐上升,过多的血红素可通过多种机制引起机体的炎症反应。急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是脓毒症患者器官功能损害时的常见并发症,死亡率极高。研究表明输注陈旧红细胞能增加脓毒症患者ARDS的发生率,但血红素在其中的作用及相关机制尚不清楚。信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)作为重要的转录因子,它的激活在ARDS的炎症反应调控中发挥了关键作用。同时,血红素也能激活STAT3调控疟疾等溶血性疾病造成的炎症损伤,但其在脓毒症所致ARDS的炎症损伤中是否也发挥调控作用未见相关报道。目的:探讨Hemin对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导脓毒症小鼠肺损伤的影响以及潜在的作用机制,并在小鼠RAW264.7细胞中进一步证实。方法:选用C57BL/6小鼠,采用腹腔注射LPS(20 mg/kg)复制脓毒症小鼠动物模型进行体内实验,Hemin与LPS同时经腹腔注入。将小鼠分为Hemin组、LPS组、LPS+Hemin组,观察不同剂量Hemin(5、10、30、50 mg/kg)对脓毒症小鼠48 h生存率的影响。将小鼠分为对照组、Hemin组、LPS组、LPS+Hemin,探讨Hemin(10 mg/kg)对LPS诱导脓毒症小鼠肺损伤的影响;增设LPS+Hemin+Vehicle组(溶剂对照组)、LPS+Hemin+Stattic组,探讨STAT3磷酸化在其中的作用,其中STAT3磷酸化抑制剂Stattic(20 mg/kg)预先45 min经腹腔注入。在给药处理后4 h、6 h、12 h收集血液及肺组织,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察肺形态学改变,ELISA法检测血清及肺组织中促炎症细胞因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平变化,Western blot检测肺组织STAT3磷酸化改变。选用小鼠RAW264.7细胞,采用LPS(100 ng/ml)处理复制脓毒症细胞模型进行体外实验。将细胞分为对照组、Hemin组、LPS组、LPS+Hemin组,用不同浓度Hemin(10、30、50μmol/L)同时刺激处理。增设LPS+Hemin+Vehicle组(溶剂对照组)、LPS+Hemin+Stattic组,探讨Hemin(50μmol/L)对脓毒症细胞模型STAT3磷酸化水平的影响;增设Hemin+Stattic组、LPS+Stattic组、LPS+Hemin+Stattic组,探讨抑制STAT3磷酸化脓毒症细胞模型促炎症细胞因子的表达变化,其中Stattic(10μmol/L)预先45 min给药处理。4 h收取细胞及培养液上清用qPCR法及ELISA法检测TNF-α和IL-6 mRNA及蛋白的表达变化,2 h收取细胞用Western blot方法检测STAT3磷酸化变化。结果:1.与LPS组相比,Hemin剂量依赖地显著减少了LPS诱导脓毒症小鼠的生存时间,增加了小鼠的死亡率(P损伤评分显示,Hemin显著增加脓毒症小鼠肺损伤的严重程度(P损伤的严重程度(P损伤程度,增加小鼠死亡率,其可能机制是Hemin增强STAT3磷酸化。

关键词：脂多糖红细胞储存损伤血红素脓毒症急性呼吸窘迫综合征 STAT3 磷酸化

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储存红细胞保护的研究进展

国际麻醉学与复苏杂志 2020年第7期41卷 727-731页

作者：贾豫王海英芶大明遵义医科大学麻醉学院 563000 遵义医科大学附属医院麻醉科 563000

红细胞输注是临床输血中应用最广泛的治疗方法之一,也是挽救生命和液体复苏的一个重要组成部分,常用于重度贫血、失血性休克以及严重创伤的患者,在医疗应急保障中发挥着重要作用。尽管现在的保存方法延长了红细胞的保存时间、提高了保... 详细信息

红细胞输注是临床输血中应用最广泛的治疗方法之一,也是挽救生命和液体复苏的一个重要组成部分,常用于重度贫血、失血性休克以及严重创伤的患者,在医疗应急保障中发挥着重要作用。尽管现在的保存方法延长了红细胞的保存时间、提高了保存质量,但随着红细胞体外储存时间的延长还是会引起其生理、生化以及形态学相应的改变,导致输血产生不良后果。如何提高红细胞保存质量一直是医学研究的热点,文章对储存红细胞保护的研究进展进行综述。

关键词：红细胞储存损伤红细胞保存

芦丁对体外储存悬浮红细胞凋亡和ATP的影响及机制研究

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重庆医学 2020年第2期49卷 192-196页

作者：陈雄燕肖倩欧阳清蒋延芳蒋利星广西壮族自治区桂林市人民医院 541002 桂林医学院第一附属医院广西桂林541001 广西壮族自治区桂林市中心血站 530001

目的探究不同浓度芦丁对体外储存悬浮红细胞凋亡及腺苷三磷酸(ATP)水平的影响,并探究其凋亡相关蛋白表达的变化。方法通过流式细胞术及Western blot分析不同浓度芦丁处理20和40 d后悬浮红细胞的凋亡及其凋亡相关蛋白的变化。同时,通过AT... 详细信息

目的探究不同浓度芦丁对体外储存悬浮红细胞凋亡及腺苷三磷酸(ATP)水平的影响,并探究其凋亡相关蛋白表达的变化。方法通过流式细胞术及Western blot分析不同浓度芦丁处理20和40 d后悬浮红细胞的凋亡及其凋亡相关蛋白的变化。同时,通过ATP水平检测分析不同浓度的芦丁处理后体外储存悬浮红细胞在第20、40天时ATP水平。结果芦丁处理第20天10、20和40μmol/L芦丁处理组红细胞凋亡率分别为(2.21±0.09)%、(1.97±0.09)%和(1.81±0.08)%,均低于0μmol/L[(2.51±0.16)%],差异有统计学意义(P储存悬浮红细胞中ATP水平也明显升高(P储存悬浮红细胞中ATP的水平。

关键词：红细胞芦丁细胞凋亡腺苷三磷酸储存损伤

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红细胞微粒及其生物学性质的研究进展

临床输血与检验 2020年第5期22卷 551-556页

作者：朱跃跃卞茂红安徽医科大学第一附属医院输血科合肥230022 六安世立医院输血管理科

微粒(microparticles,MPs)是由不同类型的细胞如白细胞、单核细胞、血小板及红细胞等释放的一种直径小于1μm的浆膜囊泡。长期以来,人们一直认为红细胞微粒是没有任何生物学作用的细胞碎片。随着对其研究的深入,尽管其功能尚未完全阐述... 详细信息

微粒(microparticles,MPs)是由不同类型的细胞如白细胞、单核细胞、血小板及红细胞等释放的一种直径小于1μm的浆膜囊泡。长期以来,人们一直认为红细胞微粒是没有任何生物学作用的细胞碎片。随着对其研究的深入,尽管其功能尚未完全阐述清楚,但已有越来越多的证据表明RMPs具有广泛的生物学性质如清除物质、信息传递、炎症及凝血等。并且发现在许多如镰状细胞病、急性移植物抗宿主病以及输血相关性急性肺损伤等疾病中,红细胞微粒的数量显著增加。本文通过分析近年来红细胞微粒研究的相关文献,从现阶段的研究成果及目前存在的问题等方面,对红细胞微粒及其生物学性质的研究进展作一综述。

关键词：红细胞微粒储存损伤凝血 TRALI

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储存血细胞中非编码RNA研究进展

临床输血与检验 2021年第4期23卷 416-420页

作者：苑召虎魏亚明广州市第一人民医院输血科 510180

非编码RNA(Non-coding RNA,ncRNA)是一类不编码蛋白质的RNA。在红细胞及血小板储存损伤发生发展中起调控作用的非编码RNA主要集中在microRNA、lncRNA及circRNA,本文将围绕此3种非编码RNA在红细胞及血小板储存损伤中的作用展开探讨。

关键词：红细胞血小板储存损伤 microRNA lncRNA circRNA

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储存红细胞质量检测研究进展

中国输血杂志 2019年第5期32卷 503-505页

作者：杨俊鸿骆展鹏黄霞重庆市血液中心

红细胞储存期的质量检测是判断红细胞储存期间质量变化的重要技术手段,主要包括红细胞的形态、功能、生化指标以及基础代谢研究。随着组学技术在输血医学领域的广泛应用,为储存红细胞的质量检测提供了新的研究方法和策略。本文将系统性... 详细信息

红细胞储存期的质量检测是判断红细胞储存期间质量变化的重要技术手段,主要包括红细胞的形态、功能、生化指标以及基础代谢研究。随着组学技术在输血医学领域的广泛应用,为储存红细胞的质量检测提供了新的研究方法和策略。本文将系统性地对红细胞储存期质量检测指标、检测方法和技术进行综述,归纳比较这些检测指标和检测方法的发展,为储存红细胞的临床使用和基础研究提供参考。

关键词：红细胞质量检测质量指标储存损伤