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结直肠癌组织中突变型Axin2对Wnt信号转导系统的调控及其机制

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癌症 2007年第10期26卷 1041-1046页

作者：王凤玮温玲朱思伟姚嫱蔡玉梅马刚天津市人民医院放疗科天津300130 张家港市中医院妇产科江苏张家港215600 天津市人民医院肿瘤科天津300130 天津市人民医院肛肠科天津300130

背景与目的:Axin2是近期发现的Wnt信号转导系统的新基因,其在结直肠癌中最主要的突变形式为羧基端缺失突变(mutant-type Axin2,mtAxin2)。本研究的目的在于探索mtAxin2对Wnt信号转导系统的调控作用及其相关机制。方法:采用免疫组化的方... 详细信息

背景与目的:Axin2是近期发现的Wnt信号转导系统的新基因,其在结直肠癌中最主要的突变形式为羧基端缺失突变(mutant-type Axin2,mtAxin2)。本研究的目的在于探索mtAxin2对Wnt信号转导系统的调控作用及其相关机制。方法:采用免疫组化的方法检测大肠癌组织中β-catenin的表达;构建pCMV-Flag-wtAxin2和pCMV-Flag-mtAxin2质粒转染293细胞,采用免疫沉淀(co-immunoprecipitation,IP)和Western印迹杂交研究mtAxin2与Wnt信号转导系统中其它关键蛋白的作用;应用TNTT3/T7体外转录翻译系统体外合成mtAxin2蛋白,用于mtAxin2的体外聚合实验;使用Dual-Luciferase报告检测系统检测Firefly和Renilla荧光酶活性;构建视网膜受体(retinoid receptor,RR)与蜕皮素受体(ecdysone receptor,ECR)质粒,用于恢复mtAxin2的DIX功能区对mtAxin2功能影响的研究。结果:免疫组化检测显示在有Axin突变的结直肠癌标本中β-catenin蛋白在核内积聚,而无Axin突变者在胞浆内。Western印迹杂交显示mtAxin2仍具有与GSK-3β、APC、β-catenin、DVL-1和PP2A形成复合体的功能。将Flag-wtAxin2和Flag-mtAxin2共转染293细胞后,mtAxin2与wtAxin2可竞争性地与β-catenin结合。在TNTT3/T7体外转录翻译实验中,wtAxin2与Flag-wtAxin2结合,而与Flag-mtAxin2不结合,mtAxin2不能形成二聚体或多聚体。pCMV-Flag-mtAxin2-RXR质粒转染293细胞后可降低T细胞转录因子报告基因(T-cell factor,TCF)活性,pCMV-Flag-mtAxin2-ECR质粒转染后TCF活性升高;pCMV-Flag-mtAxin2-RXR和pCMV-Flag-mtAxin2-ECR共转染,TCF活性也下降,显示mtAxin2与RXR融合后,融合蛋白可形成二聚体,恢复了Axin2的功能,致TCF报告基因的活性下降。结论:因为缺失DIX区,mtAxin2不能形成二聚体,干扰了β-catenin的降解,引起β-catenin在核内的积聚进而激活Wnt信号转导系统。

关键词： Axin2 突变 Wnt信号信号转导系统结直肠肿瘤

IRAK-4:TLR/IL-1R家族共同信号转导系统中的关键因子

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生理科学进展 2005年第3期36卷 276-279页

作者：刘作金刘长安龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010

最近发现的一种新的白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin1receptorassociatedkinase4,IRAK4)不仅可促使白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)磷酸化,还是IRAK1募集于TLR/IL1R复合物的必要条件,从而成为调控IRAK1生物活性以及内毒素胞内信... 详细信息

最近发现的一种新的白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin1receptorassociatedkinase4,IRAK4)不仅可促使白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)磷酸化,还是IRAK1募集于TLR/IL1R复合物的必要条件,从而成为调控IRAK1生物活性以及内毒素胞内信号转导的最关键分子。充分认识IRAK4的作用机制,将有助于设计出新的针对感染性疾病的治疗策略。

关键词： TLR/IL-1R家族 IRAK-4 天然免疫信号转导系统

猪链球菌2型二元信号转导系统ciaR基因敲除突变株的构建及生物学功能研究

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中国人兽共患病学报 2009年第3期25卷 214-219页

作者：冯晓丹程功王晶王长军潘秀珍唐家琪南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏南京210029 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

目的构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33二元信号转导系统1094HK/1095RR的反应调节因子ciaR基因敲除突变株(ΔciaR),并研究ΔciaR的生物学功能。方法和结果基于同源重组原理筛选ciaR基因缺失株,PCR分析及Southern杂交结果均显示突变株构建成... 详细信息

目的构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33二元信号转导系统1094HK/1095RR的反应调节因子ciaR基因敲除突变株(ΔciaR),并研究ΔciaR的生物学功能。方法和结果基于同源重组原理筛选ciaR基因缺失株,PCR分析及Southern杂交结果均显示突变株构建成功。通过检测OD600值绘制生长曲线,发现突变株在37℃和40℃其OD600值均明显低于野生株;与40mmol/L过氧化氢共作用15min后涂板计数,突变株存活率明显低于野生株;不同pH值的培养基中培养,发现在pH5.0的酸性环境中突变株OD600值明显低于野生株;野生株与突变株对BALB/c小鼠攻毒(约1×109CFU/只),各10只,两组16h后均死亡9只。结论成功获得05ZYH33ciaR基因敲除突变株;发现删除ciaR基因会导致细菌的生长繁殖能力减弱,抗氧化应激能力下降,在酸性环境生长存活能力下降;但对小鼠毒力无差别。

关键词：信号转导系统猪链球菌2型生物学功能基因敲除 PCR扩增产物突变株分离菌株鼠源性

氯胺酮对大鼠脑NO/cGMP信号转导系统的影响

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中华麻醉学杂志 1998年第4期18卷 229-231页

作者：胡兴国王钧曾因明段世明许鹏程万龄丽徐州医学院麻醉研究所附属医院麻醉科 221002

目的:了解氯胺酮对大鼠不同脑区一氧化氮合酶(NOS)活性,一氧化氮(NO)产量和环鸟苷酸(cGMP)含量的影响。方法:SD大鼠32只,随机分为对照组和氯胺酮组,分别腹腔注射(ip)生理盐水10ml·kg^(-1)和氯胺酮100mg·kg^(-1),用分光光度法测定NOS... 详细信息

目的:了解氯胺酮对大鼠不同脑区一氧化氮合酶(NOS)活性,一氧化氮(NO)产量和环鸟苷酸(cGMP)含量的影响。方法:SD大鼠32只,随机分为对照组和氯胺酮组,分别腹腔注射(ip)生理盐水10ml·kg^(-1)和氯胺酮100mg·kg^(-1),用分光光度法测定NOS活性和NO产量,放射免疫法测定cGMP含量。结果:大鼠氯胺酮100mg·kg^(-1)ip能明显抑制小脑、大脑皮层、海马的NOS活性(P信号转导系统在氯胺酮全麻机理中可能发挥重要作用。

关键词：氯胺酮一氧化氮环鸟苷酸信号转导系统

中枢毒蕈碱受体亚型及其信号转导系统与认知功能障碍

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中国老年学杂志 2004年第10期24卷 982-984页

作者：李永生黄流清邵福源第二军医大学长征医院上海200043

中枢胆碱能系统在学习和记忆等认知功能中的重要性已众所周知。胆碱酯酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)治疗有效也进一步证明了AD发病“胆碱能学说”的合理性。然而，对于乙酰胆碱(ACh)参与认知功能的机制迄今未能完全阐明。由于ACh的作用涉... 详细信息

中枢胆碱能系统在学习和记忆等认知功能中的重要性已众所周知。胆碱酯酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)治疗有效也进一步证明了AD发病“胆碱能学说”的合理性。然而，对于乙酰胆碱(ACh)参与认知功能的机制迄今未能完全阐明。由于ACh的作用涉及受体、信号转导系统、基因表达和调控等诸多环节，因此需要将整体、组织、细胞及分子各水平所获得的资料进行整合，才可能阐明ACh与认知功能的关系。近年来，对中

关键词：信号转导系统认知功能障碍中枢亚型毒蕈碱受体治疗学习和记忆证明环节参与

T细胞激活机理研究的新线索——CD4:p56lck信号转导系统

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免疫学杂志 1990年第3期6卷 209-211页

作者：药立波第四军医大学生物化学教研室西安710032

T细胞激活机理是近年来免疫学研究热点。酪氨酸蛋白激酶p56^(lck)在T细胞激活过程中的信号转导作用的发现为此开辟了新的途径,本文就lck的分子生物学及其与CD4、CD8分子关系的进展介绍如下。

关键词： T细胞激活信号转导系统

葡甲胺-环磷腺苷在信号转导系统中作用的分子生物学基础

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第二军医大学学报 2003年第5期24卷 561-562页

作者：孟庆才江苏万邦生化医药股份有限公司徐州221003

细胞信号系统实际上是外界信息在细胞内的传递过程.早在20世纪50年代,Sutherland及Rall发现了环磷腺苷(cAMP)在糖代谢中的重要作用,并据此提出了第二信使学说而获得了1971年生理与医学诺贝尔奖.几乎在同一年代美国华盛顿大学的Kerbs及Fi... 详细信息

细胞信号系统实际上是外界信息在细胞内的传递过程.早在20世纪50年代,Sutherland及Rall发现了环磷腺苷(cAMP)在糖代谢中的重要作用,并据此提出了第二信使学说而获得了1971年生理与医学诺贝尔奖.几乎在同一年代美国华盛顿大学的Kerbs及Fisher阐明了蛋白质磷酸化在糖代谢中的作用,建立了以cAMP为基础的第二信使系统,并进一步证实,蛋白质可逆性磷酸化普遍存在于细胞内其他信号传递系统,因而获得了1992年生理与医学诺贝尔奖,成为细胞信号研究史上的另一里程碑.

关键词：葡甲胺环磷腺苷信号转导系统分子生物学糖代谢

在大鼠切口疼痛模型中鞘内新斯的明对脊髓NO/cGMP信号转导系统的影响

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中华麻醉学杂志 2001年第4期21卷 229-232页

作者：胡兴国杨亚夫张云翔钟敏曾因明段世明潘道波湖南省桃源县人民医院麻醉科 415700 徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室湖南省常德市第一人民医院麻醉科

目的　了解大鼠切口疼痛模型中鞘内 (IT)新斯的明 (NEO)对脊髓一氧化氮合酶 (NOS)活性、一氧化氮 (NO)产量和环鸟苷酸 (cGMP)含量的影响。方法雄性SD大鼠 6 4只 ,随机分为四组 ,每组 1 6只 :假手术组 (组Ⅰ )、术前 30minIT 0 9%氯化钠... 详细信息

目的　了解大鼠切口疼痛模型中鞘内 (IT)新斯的明 (NEO)对脊髓一氧化氮合酶 (NOS)活性、一氧化氮 (NO)产量和环鸟苷酸 (cGMP)含量的影响。方法雄性SD大鼠 6 4只 ,随机分为四组 ,每组 1 6只 :假手术组 (组Ⅰ )、术前 30minIT 0 9%氯化钠 2 0 μl组 (组Ⅱ )、术后 30minITNEO 1 0 μg组(组Ⅲ )和术前 30minITNEO 1 0 μg组 (组Ⅳ )。按Brennan法制成切口疼痛模型 ,以累积疼痛评分确定疼痛行为。在术后 2h断头取腰段脊髓 ,以分光光度法测定NOS活性、NO产量 ;放射免疫法测定cGMP含量。结果　组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的累积评分均明显低于组Ⅱ (P 0 0 5)。结论　在大鼠切口疼痛模型中 ,术前ITNEO的抗伤害作用可能与NO/cGMP信号转导系统有关。

关键词：疼痛新斯的明一氧化氮环鸟苷酸注射脊髓信号转导系统切口疼痛麻醉

从受体及信号转导系统的研究着手促进内分泌及代谢病研究的深入

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上海医学 2006年第4期29卷 201-201,202页

作者：刘志民第二军医大学附属长征医院内分泌科上海200003

内分泌领域的研究有100多年历史，过去的100多年内分泌学家主要研究激素及内分泌腺体，如腺体解剖及发育、激素分泌及调节、激素生化及生理功能等。经100多年的努力，对已知激素基本已经清楚。随着研究的深入，人们发现有时激素水平很... 详细信息

内分泌领域的研究有100多年历史，过去的100多年内分泌学家主要研究激素及内分泌腺体，如腺体解剖及发育、激素分泌及调节、激素生化及生理功能等。经100多年的努力，对已知激素基本已经清楚。随着研究的深入，人们发现有时激素水平很高，但表现出激素缺乏的临床表现，使人们领悟到激素的生物效应不但与激素的质和量相关，与激素的反应性即受体及信号转导系统关系更密切。

关键词：信号转导系统内分泌腺体受体代谢病激素分泌内分泌学生理功能激素水平临床表现激素缺乏