检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

木蝴蝶内生真菌分离鉴定及促生功能初步研究

云南农业大学学报（自然科学版） 2023年第5期38卷 878-885页

作者：许娟娟房佳茹周士家李伟孙正海西南林业大学园林园艺学院云南省面向南亚东南亚经济林全产业链联合研发中心云南省观赏草集成利用国际联合研发中心云南省高效经济林培育示范型国际科技合作基地云南昆明650224 云南吉成园林科技股份有限公司云南弥勒652339

【目的】解析木蝴蝶[Oroxylum indicum(L.)Vent.]内生真菌的种类及其促生功能。【方法】以木蝴蝶树皮、种子、果皮和叶片为材料分离鉴定内生真菌,依据生理指标对分离的内生真菌促生活性进行分析;选取部分代表性内生真菌转接到黄豆植株... 详细信息

【目的】解析木蝴蝶[Oroxylum indicum(L.)Vent.]内生真菌的种类及其促生功能。【方法】以木蝴蝶树皮、种子、果皮和叶片为材料分离鉴定内生真菌,依据生理指标对分离的内生真菌促生活性进行分析;选取部分代表性内生真菌转接到黄豆植株进行培养,以黄豆产量指标验证其实际促生效果。【结果】从木蝴蝶树皮、种子、果皮和叶片中分离得到50株内生真菌,隶属于13属23种,其中果皮部位分离菌株最多,炭疽属(Colletotrichum)为优势菌属;9株代表性真菌均具有产吲哚乙酸和固氮的能力,其中6株真菌还具有溶磷和解钾特性。转接栽培试验结果表明:9株菌处理后黄豆果荚数增加5%~75%,产量提高37%~231%;其中壳青霉(Penicillium crustosum)促生效果最好。【结论】本研究首次开展了木蝴蝶内生真菌的分离研究,并对其功能进行了验证,其中壳青霉促生效果最好,转接黄豆后可提高其果荚数和产量,具有开发为微生物菌肥的潜力。

关键词：木蝴蝶内生真菌纯培养分离促生功能

一株水稻内生菌久留里副伯克霍尔德(Paraburkholderia kururiensis)的分离鉴定及促生功能的评价

维普期刊数据库博看期刊

同方期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国土壤与肥料 2022年第4期 218-228页

作者：王星孟炯放马荣何山文郭鹤宝张晓霞中国农业科学院农业资源与农业区划研究所北京100081 上海市园林科学规划研究院上海200232

从水稻根中分离出的内生细菌HMC50通过16S rRNA基因和全基因组序列分析鉴定为久留里副伯克霍尔德菌(Paraburkholderia kururiensiss)。在基因组水平预测到该菌株具有与促进植物生长、鞭毛介导的运动性和解毒作用相关的主要特征,发现与... 详细信息

从水稻根中分离出的内生细菌HMC50通过16S rRNA基因和全基因组序列分析鉴定为久留里副伯克霍尔德菌(Paraburkholderia kururiensiss)。在基因组水平预测到该菌株具有与促进植物生长、鞭毛介导的运动性和解毒作用相关的主要特征,发现与固氮相关的18个基因中包括关键基因nifH以及色氨酸合酶α链(EC 4.***.1.20)基因和色氨酸合酶β链(EC 4.***.1.20)基因,因此推测该菌株具有固定N_(2)和分泌生长素(IAA)的能力;通过植物促生特性试验的验证,发现HMC50的确具有分泌IAA的能力(29.57 mg/L)并且具有较高的固氮酶活性11.9nmol/(mL·h),除此之外,该菌株同时具有产铁载体的能力,定量检测A/Ar是0.29,1-氨基环丙烷羧酸脱氨酶活性为0.35 U/mg,溶解无机磷的能力较强(菌落溶磷透明圈直径HD与菌落直径CD的比值为3.97);盆栽试验发现该菌株对水稻有促进生长的潜能,接菌后水稻幼苗的根长、茎长、根重以及总鲜重上都优于空白对照组(P功能特性,可以显著促进水稻幼苗生长,该研究结果可为水稻特用的微生物肥料研制提供优良的菌株资源。

关键词：久留里副伯克霍尔德菌促生功能内生细菌全基因组序列分析

野生鸡油菌不同部位细菌群落结构及其促生功能研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

野生鸡油菌不同部位细菌群落结构及其促生功能研究

作者：葛伟贵州大学

学位级别：硕士

鸡油菌Cantharellus cibarius是隶属于担子菌门的一类珍贵的外生菌根真菌,具有重要的药食两用价值、经济价值和生态效益,广泛分布于我国多个地区。由于鸡油菌独特的进化史和人工驯化等问题吸引了诸多研究者对其生态学、生物学以及系统... 详细信息

鸡油菌Cantharellus cibarius是隶属于担子菌门的一类珍贵的外生菌根真菌,具有重要的药食两用价值、经济价值和生态效益,广泛分布于我国多个地区。由于鸡油菌独特的进化史和人工驯化等问题吸引了诸多研究者对其生态学、生物学以及系统发育学展开了大量研究。研究表明,细菌在鸡油菌菌种分离、不同生长阶段等过程中广泛存在,但其具体作用机制和发挥的功能尚不清楚。本文运用传统分离培养方法结合高通量测序技术研究了采自贵州省贵阳市乌当区羊昌镇、花溪区孟关乡和高坡乡三个样地野生鸡油菌子实体及菌圈土壤样本中共生细菌的群落多样性及其组成,同时运用核心微生物组方法鉴定了不同部位的核心细菌组成员并比较分析其组成和潜在功能差异,以期明确鸡油菌共生细菌在不同结构部位上的分布及潜在功能有无差异。此外,对子实体和菌圈土壤样本可培养细菌进行了多样性、群落组成分析以及潜在固氮、解磷功能菌株的筛选。主要研究结果如下:(1)不同地区野生鸡油菌子实体和菌圈土壤部位均存在丰富的细菌群落,但在物种组成、核心细菌组成员鉴定和潜在功能类群上存在明显差异。基于高通量测序技术,对我国贵州省贵阳市三个不同地区的鸡油菌子实体和菌圈土壤细菌群落组成及多样性研究表明,鸡油菌子实体主要定殖细菌类群为变形杆菌门Proteobacteria和拟杆菌门Bacteroidetes,主要以根瘤菌复合体Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium、噬几丁质菌属Chitinophaga为主。菌圈土壤均以变形杆菌门和放线菌门Actinobacteria等为主,其中,慢生根瘤菌Bradyrhizobium和分枝杆菌属Mycobacterium等更占优势。基于Meta Co MET平台进行核心细菌组成员鉴定发现,野生鸡油菌子实体部位核心细菌组成员主要有30个属,而菌圈土壤部位则多达190个核心细菌组成员,组成上存在较大差异。运用FAPROTAX功能注释平台对子实体和菌圈土壤核心细菌组成员的功能进行注释发现,子实体核心细菌组潜在功能主要集中在氮素营养以及芳香族化合物代谢等;菌圈土壤核心细菌组潜在功能更偏向复杂有机物分解及矿物营养吸收,同时具有防御土壤环境中病虫害侵染等。基于传统经典分离方法对三个地区的鸡油菌子实体部位和菌圈土壤可培养细菌群落组成和多样性进行分析,结果表明,鸡油菌子实体中分离获得的细菌群落组成高度相似,均以假单胞菌属Pseudomonas细菌为最多,而菌圈土壤可培养细菌以芽孢杆菌属Bacillus细菌为主。子实体和菌圈土壤可培养细菌的潜在功能类群与核心细菌组潜在功能类群较为类似,皆出现了功能分化趋势。(2)不同地区的野生鸡油菌子实体和菌圈土壤细菌菌群(多样性、优势属相对丰度、可培养细菌分离频率及核心细菌属)与土壤理化性质均存在不同程度的相关性。研究结果显示,土壤p H值、速效磷AP和全磷TP与鸡油菌子实体和菌圈土壤可培养细菌类群、高通量优势属以及核心细菌类群关联性最大,其次为有机质SOM。冗余分析发现,子实体的可培养细菌与高通量细菌Shannon指数和Simpson指数仅与土壤p H、总氮TN、总磷TP及速效磷AP呈正相关性,与全钾TK、速效钾AK、有机质SOM等呈负相关。然而菌圈土壤可培养细菌和高通量测序细菌群落的Shannon指数与土壤SOM、TN、TK、AN、AK及AP均呈正相关关系,与p H值呈负相关。这表明,鸡油菌子实体细菌多样性主要受p H、N和P等环境理化因子的影响,而菌圈土壤细菌群落多样性受到更多土壤理化因子的影响。(3)野生鸡油菌子实体和菌圈土壤中均存在丰富的固氮、解磷细菌菌株。从野生鸡油菌子实体和菌圈土壤中分离获得287株可培养细菌,其中有9株能在Burk’s无氮培养基上稳定生长,对其定量固氮能力进行了初步测定,发现N2菌株的固氮值最大(27.1768mg/L),其次为N4(24.2228 mg/L)、N6(23.9274 mg/L)、N7(23.9274 mg/L)和N8菌株(20.9734mg/L),它们大多属于泛菌属Pantoea、克雷伯氏菌属Klebsiella、肠杆菌属、类芽孢杆菌Paenibacillus、假单胞菌属及根瘤菌属Rhizobium等,表明其可能具有潜在固氮功能。本研究采用透明圈法初步分离获得具有降解无机磷能力的细菌菌株7株,其中P4菌株的解磷量最大(144.965mg/L),其次为P2(123.96 mg/L)、P5(111.595 mg/L)和P1(99.59 mg/L),它们分属于美洲爱文氏菌Ewingella americana(P4)、成团泛菌***(P2)、荧光假单胞菌***(P5)和阿氏肠杆菌***(P1),其可能在鸡油菌生长发

关键词：野生鸡油菌共生细菌高通量测序土壤理化性质促生功能

甘孜地区药用植物内生放线菌生物多样性与抗菌促生功能评价

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

甘孜地区药用植物内生放线菌生物多样性与抗菌促生功能评价

作者：张瀚能四川农业大学

学位级别：硕士

四川省甘孜州地处川西高原,是四川盆地西缘山地向青藏高原过渡的地带,自然条件复杂,气候多变。该地区药用植物丰富,共计800余种,是我国名贵中药材的主要产区。常年生长于高海拔、高辐射、温差大等极端环境中的药用植物,为植物内生放线... 详细信息

四川省甘孜州地处川西高原,是四川盆地西缘山地向青藏高原过渡的地带,自然条件复杂,气候多变。该地区药用植物丰富,共计800余种,是我国名贵中药材的主要产区。常年生长于高海拔、高辐射、温差大等极端环境中的药用植物,为植物内生放线菌的筛选提供了丰富资源。本研究以甘孜州地区药用植物为研究对象,结合传统分离方法、活性筛选及分子生物学的技术,对药用植物内生放线菌的多样性和抗菌促生功能进行分析。从44种药用植物中分离了 215株内生放线菌。根据放线菌的形态特征和BOXAIR-PCR指纹图谱分析,选取84株代表菌株,16SrRNA测序结果表明,这些内生放线菌属于8个属,分别是链霉菌属(Streptomyces)、假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)、短杆菌属(Brevibacterium)、韩国生工菌属(Kribbella)、拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)、发仙菌属(Pilimelia)、微杆菌属(Microbacterium)、诺卡氏菌属(Nocardia),以链霉菌为药用植物内放线菌的优势种群。84株代表菌株的抗菌活性初筛结果显示,58.6%的菌株对供试的病原菌表现出不同程度的抗性。其中对西瓜枯萎菌拮抗效果最好,对大肠杆菌、沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌拮抗效果较差;对7种功能基因进行扩增,PKS Ⅰ、PKSⅡ、NRPS、Halo、CYP、phzE、dTGD 的阳性检出率分别为 32.1%、64.3%、33.3%、26.2%、46.4%、36.9%、34.5%,其中PKSⅡ所占比例最高,进一步构建了 PKSⅡ KSa基因簇序列的系统发育树,结果表明甘孜州地区药用植物的PKSⅡ功能基因一部分与色素产生相关,一部分与产生芳香聚酮类化合物的合成关系密切。对药用植物内生放线菌促生能力进行检测,38.1%的菌株具有产IAA的能力,31.0%的菌株具有产几丁质酶的能力和产纤维素酶的能力,20.2%的菌株具有产蛋白酶的能力,16.7%的菌株具有产铁载体的能力,而具有溶磷能力的菌株只有15.5%。根据药用植物内生放线菌的促生初筛结果,以药用植物白芨为材料,选取促生效果较好的菌株2、12、20、49、72、122、156、179以及混合处理(菌株72+菌株2)进行盆栽实验,评价各菌株的促生效果。对白芨的各项生理指标的测定结果表明,大部分菌株均有促生效果,其中菌株20和菌株12效果最好,在菌株12和20的作用下,白芨叶长增长了 117.55%和86.47%;分根数增加了91.75%和208.25%;最长根长增长了 295.21%和 355.09%;茎长增长了 112.93%和 56.46%;株高增长了 320.75%和 186.17%;叶宽增加了 234.04%和 140.43%。揭示了药用植物内生放线菌对白芨的促生作用。本研究通过传统分离、活性筛选和分子生物学技术,了解甘孜州地区药用植物内生放线菌资源,揭示了该地区药用植物中蕴藏着丰富的内生放线菌资源,而大多数的内生放线菌具有抗菌促生能力,为寻找新的活性物质,开发新的抗菌药物,发掘代替传统化肥农药的微生物菌剂提供了丰富的菌种资源,也为该地区药用植物内生放线菌资源的研究和开发提供了科学参考。

关键词：甘孜州地区药用植物内生放线菌多样性抗菌活性促生功能

长期豆科绿肥轮作水稻根内生细菌多样性及促生功能研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

长期豆科绿肥轮作水稻根内生细菌多样性及促生功能研究

作者：曹艳花东北农业大学

学位级别：硕士

大量研究证实,绿肥是保持和提高土壤肥力和质量的有效措施之一,虽然已有绿肥对土壤微生物影响的相关研究报道,但由于所用方法和技术所限,相关研究既不系统也不深入,特别是绿肥对水稻根内生细菌影响研究尚属空白。本课题以湖南祁阳农田... 详细信息

大量研究证实,绿肥是保持和提高土壤肥力和质量的有效措施之一,虽然已有绿肥对土壤微生物影响的相关研究报道,但由于所用方法和技术所限,相关研究既不系统也不深入,特别是绿肥对水稻根内生细菌影响研究尚属空白。本课题以湖南祁阳农田系统国家野外科学观测研究站具有28年(1982-2010)长期定位历史的稻-稻-紫云英豆科绿肥及稻-稻-冬闲轮作水稻根为材料,采用基于16S rDNA为基础的先进分子生态学方法与传统培养方法相结合,深入系统研究紫云英绿肥轮作水稻根内生微生物多样性。本研究同时将针对性地分离培养微生物类群,对可培养微生物溶磷性,产植物生长素(IAA),产铁载体,拮抗及固氮酶活性等促生功能研究。通过培养方法检测水稻根内生微生物数量,结果表明：稻-稻-紫云英绿肥轮作系统水稻根中微生物平均数量为7.75×106cfu·g-1鲜土,比稻-稻-冬闲高78.17%。通过传统细菌分离培养方法从稻-稻-冬闲和稻-稻-紫云英水稻根中分别分离77株和169株细菌。对246株细菌溶磷、分泌生长素(IAA)及分泌铁载体的功能进行了初步测定,结果表明稻-稻-紫云英内生细菌具有溶解无机磷活性、溶解有机磷活性、分泌生长素(IAA)能力及产铁载体能力菌株分别为139、12、72、73株,稻-稻-冬闲分别为67、8、40、57株。其中菌株ZYY43的溶磷活性最高;菌株ZYY170产IAA能力最高,为419.17ug/mL;菌株DX78分泌铁载体能力最强,达到了“++++”的水平。在上述研究基础上选取48株菌进行拮抗试验,结果显示,3株菌对棉花红腐病菌(Fusarium moniliforme ACCC36127)有抑制作用,其中的2株对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas campestris *** ACCC05509)有抑制作用。固氮酶活性检测结果发现,菌株DX35的固氮酶活性最高为181.21nmolC2H4/mg protein hr,为参比菌株圆褐固氮菌(Azotobacter chroococcum ACCC10006)的10倍左右,在固氮菌肥开发方面具有非常大的应用潜力。并在此基础上利用大试管和盆栽水稻促生试验的方法筛选10株兼具多种促生功能的优良菌株,菌株ZYY5、ZYY10和ZYY136准备进行田间试验。采用传统的分离培养方法结合分子生物学技术对稻-稻-紫云英和稻-稻-冬闲水稻根内生可培养细菌群落多样性进行研究。用限制性内切酶HaeⅢ和RsaⅠ联合酶切,获得246株菌酶切指纹图谱。结果表明,HaeⅢ和RsaⅠ联合酶切产生了23个基因分型,单一酶切产生的基因分型少。16S rDNA系统发育分析结果表明,分离得到的77株稻-稻冬闲细菌分属14属15个种,分离得到的169株稻-稻紫云英细菌分属19属21个种。两个样品中细菌群落大多数为变形菌纲(Proteobacteria)。其中β-变形菌纲(β-proteobacteria)占据优势地位,其次为γ-变形菌纲(γ-proteobacteria),其他分属α-变形菌纲(α-proteobacteria)及厚壁菌门(Firmicutes)。放线菌门(Actinobacteria)只存在于稻-稻-紫云英水稻根内生可培养细菌中。其中Herbaspirillum和Cedecea为两个处理中分离到的共有优势种群,而稻-稻-紫云英水稻根内生细菌中的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)和泛菌属(Pantoea)也为分离到的优势种群,且在稻-稻-紫云英水稻根这一特殊的生存空间中有1株潜在的根瘤菌属(Rhizobium)新种存在。可培养的细菌中,编号为ZYY136菌株其16S rDNA基因序列在NCBI Blast中比对发现与根瘤菌属(Rhizobium)的Rhizobium alkalisoli (CCBAU01393)的同源性最高,为96.174%。以近缘菌株CCBAU01393(Rhizobium alkalisoli)和SO2(Rhizobium huautlense)为参比菌株,采用多相分类方法,对其形态学特征、唯一碳氮源利用、脂肪酸组成成分分析(MIDI)、 ERIC-PCR和BOX-PCR指纹图谱分析、16S rDNA全序列分析及atpD、gltA、gyrB、recA、 rpoB、thrC持家基因序列的系统发育进行分析。实验结果初步证实,ZYY136菌株为根瘤菌属(Rhizobium)的一个新种。利用细菌通用引物,对从2个水稻根样品中提取总DNA进行16S rDNA基因的PCR扩增,构建克隆文库对PCR产物进行分析,结果显示,2个水稻根样品中细菌群落大多数为变形菌纲(P

关键词：长期豆科绿肥轮作水稻根内生细菌促生功能 16S rDNA克隆文库细菌群落多样性

水稻内生细菌的分离及促生功能研究和几株新菌的多相分类

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻内生细菌的分离及促生功能研究和几株新菌的多相分类

作者：张蕾东北农业大学

学位级别：硕士

本研究以湖南祁阳农田系统国家野外科学研究站长期稻-稻-紫云英、稻-稻-油菜、稻-稻-黑麦草、稻-稻-冬闲四种绿肥轮作下的水稻种子、根为材料,采用可培养方法对水稻种子、根中的内生细菌进行分离,研究微生物的多样性,并筛选出具有促生... 详细信息

本研究以湖南祁阳农田系统国家野外科学研究站长期稻-稻-紫云英、稻-稻-油菜、稻-稻-黑麦草、稻-稻-冬闲四种绿肥轮作下的水稻种子、根为材料,采用可培养方法对水稻种子、根中的内生细菌进行分离,研究微生物的多样性,并筛选出具有促生功能的菌株。对分离出的潜在新菌进行多相分类。通过稀释涂布平板法对不同绿肥轮作下的水稻种子、根内生细菌进行分离、纯化,然后利用细菌通用引物,对纯化后的菌株进行基于16S rDNA基因序列的PCR扩增。结果水稻种子中共获得246株内生细菌,其中稻-稻-冬闲、稻-稻-紫云英、稻-稻-油菜、稻-稻-黑麦草轮作下分离出的内生细菌分别为42、102、58、44株,它们分别属于23个属中的39个种,其中以假单胞菌(Pseudomonas)数目最多,属于优势菌;水稻根中共获得360株内生细菌,其中稻-稻-冬闲、稻-稻-紫云英、稻-稻-油菜、稻-稻-黑麦草轮作下分离出的内生细菌分别为55、173、72、60株,它们分别属于31个属中的50个种,其中以草螺旋属(Herbaspirillum)数目最多,属于优势菌。用大米汤、阿须贝、TSA和1/4R2A四种不同的培养基对水稻种子内生细菌进行分离,结果表明稻-稻-冬闲轮作下内生细菌的数量为大米汤>阿须贝>TSA>1/4R2A,稻-稻-紫云英轮作下为1/4R2A>TSA>阿须贝>大米汤,稻-稻-油菜轮作下为1/4R2A>阿须贝>大米汤>TSA,稻-稻-黑麦草轮作下为1/4R2A>大米汤>阿须贝>TSA。通过定性或定量的研究方法对挑选出的179株优势种进行促生功能初筛,共筛选出具有溶解无机磷活性的有80株,具有分泌铁载体能力的有64株,具有分泌IAA功能的有93株。对40株初筛结果较好的菌株进行复筛,结果显示,具有抗串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的有28株,固氮功能的有5株。对17株经初筛和复筛结果中促生功能较好的菌株进行大试管促生能力评价,结果表明,17株经过促生菌株处理的水稻株高、鲜重和干重都高于对照组,经过SPSS软件对其差异性分析,有4株水稻的株高、鲜重和干重和对照组有显著的差异。并对这些促生功能明显的菌株进行下一步的田间试验。对从稻-稻-紫云英轮作下的水稻根内、水稻根际土中和松嫩平原盐碱地土壤中分离出的四株潜在新种ZYY112,1ZS3-5,NEAU-ST5-5和NEAU-ST5-21,从表型特征、化学分类特征和基因型特征方面进行多项分类鉴定。其中包括形态学特征,生理学特征,生化特征,营养要求,脂肪酸分析,呼吸醌分析,极性脂分析,16S rDNA和持家基因序列的系统发育分析,基因组DNA G+C mol%,DNA-DNA杂交同源性等。结果表明菌株ZYY112属于Novosphingobium属,菌株1ZS3-5属于Paenibacillus属,NEAU-ST5-5和NEAU-ST5-21均属于Pseudomonas属。并且它们与其各自属中最近缘种存在着显著的差异,最后确定它们为各自属中的新成员。

关键词：不同绿肥轮作水稻种子水稻根内生细菌促生功能多相分类

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

白及内生细菌分离鉴定及促生功能研究

白及内生细菌分离鉴定及促生功能研究

作者：罗鸿四川农业大学

学位级别：硕士

白及（Bletilla striata）药用历史悠久,具有消肿止血,治溃祛毒等功效,其入药部分主要为假鳞茎块,药用活性成分主要为白及多糖。近年来随着对白及利用价值的深入研究,白及在生物医药、食品保健、纺织印染等方面都得到了广泛的应用,使得... 详细信息

白及（Bletilla striata）药用历史悠久,具有消肿止血,治溃祛毒等功效,其入药部分主要为假鳞茎块,药用活性成分主要为白及多糖。近年来随着对白及利用价值的深入研究,白及在生物医药、食品保健、纺织印染等方面都得到了广泛的应用,使得白及从单一的药用植物拓展到集医药、保健、美容、工业等多种功能于一体的多功能植物,其价值也随之节节攀升。但是由于长期遭受滥挖乱采及生长环境破坏,使得野生白及资源濒临枯竭,市场上白及原材料供应长期处于供不应求的状态。所以采用人工栽培来提高白及供应量的种植方式便应运而生,由于种植中的白及种子较小且没有胚芽发育不完整,很难在土壤中播种和出苗,目前人工栽培中大都是采用分株和块茎的方式对其进行繁殖。此种栽培方式具有周期短,繁殖率高等优点,被广泛采用。但是在人工栽培过程中白及遭受着品种退化、农残超标、品质下降等问题。因此如何利用环保、健康、高效的方式保护白及资源成为白及可持续发展的关键所在。本研究旨在通过分离筛选出有益于促进白及生长的内生细菌,达到提高白及产量,提升品质,保护白及资源的目的。本研究以采自云南腾冲、昭通,四川雅安、阿坝两省四地白及[Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.]为试验对象,对其内生细菌进行分离、鉴定及促生功能（降解纤维素酶、产几丁质酶、产蛋白质酶、溶磷、固氮、产IAA、产铁载体）分析,并通过田间小区试验分析了促生功能菌株对白及生长及多糖含量的影响。主要研究结果如下:（1）可培养结果、促生结果及分子鉴定结果情况。从白及根、茎、叶中共分离获得95株白及内生细菌,其中,93株菌（97.9%）至少具有所测定的七种促生功能检测中的一种以上,剩余2株不具有七种促生功能中的任何一种。分离得到的95株内生细菌中具有较好降解纤维素能力的菌株74株,占总量的77.9%;具有显著产蛋白酶能力的菌株69株,占总量的72.6%;具有明显产几丁质酶作用的菌株23株,占总量的24.2%;具有清晰产IAA能力的菌株86株,占总量的90.5%;具有明显溶磷作用的菌株24株,占总量的25.3%;具有产生铁载体能力的菌株68株,占总量的71.6%;具有较强固氮作用的菌株25株,占总量的26.3%。最后筛选出6株综合促生能力较强的菌株:LH9516、LH9518、LH9527、LH9545、LH9566、LH9578。经过16S r DNA测序,结果表明LH9516、LH9518、LH9527、LH9545、LH9566属于芽孢杆菌属（Bacillus）;LH9578属于苍白杆菌属（Ochrobactrum）。（2）筛选出的细菌数量分布情况。不同品种之间,紫花三叉白及:茎>根>叶,紫花白及:茎>根>叶,黄花白及:茎>叶>根。不同组织部位之间,根:紫花白及>紫花三叉白及>黄花白及,茎:紫花白及>黄花白及>紫花三叉白及,叶:黄花白及>紫花白及>紫花三叉白及。三个白及品种分离得到的内生细菌数量总体分布为:紫花白及>黄花白及>紫花三叉白及,茎>根>叶。（3）田间小区试验情况。将筛选出的菌株制成单一菌液和复合菌液,种植前对白及幼苗进行浸根半小时后种植,以无菌水浸根作为CK对照组。种植一周后再用单菌与复合菌液进行灌根处理,生长12个月以后,对经三种处理方式生长的白及进行比较,主要存在以下两个方面主要差异。一方面为植株生长状态差异性。经过单菌与复合菌浸根及灌根处理后的白及生长状态更好,优于CK对照组。CK对照组白及植株较为矮小,且病虫害发生率高于经菌株处理后的白及。经过6株单菌及2株复合菌生物处理的白及在株高、根系数、块茎鲜重以及根系长度方面均明显高出对照组,且单菌效果优于复合菌。其中经单菌LH9516、LH9527、LH9578处理后效果最明显,较CK对照组白及块茎鲜重增加了133%、123%、110%。另一方面是多糖含量差异性。经单菌和复合菌（复合菌LHN1除外）处理后的白及多糖含量增加均明显高于CK对照组。其中,经单菌LH9516、LH9518、LH9527处理后的效果最明显,较CK对照组增加了197.4%、220%、155.8%。本研究显示,丰富的内生细菌菌种资源蕴藏于白及各组织器官中,特别在茎块之中,其中具有促生功能的有益菌株在促进白及生长、增加多糖含量以及提高品质等方面都拥有较大的研究价值,为促进白及可持续发展提供了研究方向。

关键词：白及内生细菌促生功能白及多糖

千岛湖外生菌根真菌内生细菌多样性及促生功能研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

千岛湖外生菌根真菌内生细菌多样性及促生功能研究

作者：徐漫南京师范大学

学位级别：硕士

外生菌根真菌具有重要的生态意义和良好的食药用价值,一直受到人们的广泛关注。有关外生菌根真菌的大量研究表明,外生菌根真菌子实体内生细菌多样性具有差异,且多数为菌根促生菌,与外生菌根真菌的生长密切相关。外生菌根真菌特异的内生... 详细信息

外生菌根真菌具有重要的生态意义和良好的食药用价值,一直受到人们的广泛关注。有关外生菌根真菌的大量研究表明,外生菌根真菌子实体内生细菌多样性具有差异,且多数为菌根促生菌,与外生菌根真菌的生长密切相关。外生菌根真菌特异的内生细菌群落是多种因素共同作用的结果,对其生长发育有着不可替代的作用,这种内生细菌的特异性可能与外生菌根真菌子实体生长特定的需求有关,满足子实体的发育条件。外生菌根真菌不仅是珍稀野生食用菌,也是重要的功能保健品,其品质十分重要。然而,大量研究只关注菌根促生菌对外生菌根真菌生长的促进作用,而关于内生细菌对其品质及真菌丝中相关化合物含量的影响都未见报道。千岛湖因其独特的条件,成为研究生境片段化效应的理想场所,岛屿化引起的生态学效应取得了很多研究成果。千岛湖岛屿森林中分布多种外生菌根真菌,且不同岛屿间的外生菌根真菌多样性存在差异,是研究外生菌根真菌子实体内生细菌多样性及其影响因子的良好平台。因此,本研究拟对千岛湖外生菌根真菌子实体内生细菌群落进行研究,探讨子实体内生细菌群落的调控因素,并从菌丝体品质成分角度来探究内生细菌对外生菌根真菌的影响,解读内生细菌的潜在作用。通过对千岛湖外生菌根真菌子实体内生细菌群落的分析,结果表明千岛湖同一岛屿不同外生菌根真菌子实体内生细菌多样性和组成具有差异,不同岛屿同种外生菌根真菌子实体内生细菌多样性和组成也有差异,且差异细菌类群主要体现在科和属水平。外生菌根真菌子实体内生细菌优势菌属具有实质性差异,子实体内生细菌群落会因宿主真菌种类、生长环境不同而产生变化。进一步对外生菌根真菌子实体内生细菌群落的影响因素进行探究,发现子实体正下方和周围土壤理化性质对其内生细菌群落没有显著影响。外生菌根真菌子实体内生细菌表现出明显的岛屿异质性,表明生境片段化效应对子实体内生细菌群落具有一定的影响。宿主真菌特异性(种和属)和岛屿异质性(岛屿面积、周长)对子实体内生细菌群落作用显著,是外生菌根真菌子实体内生细菌群落的调控因子,共同调控外生菌根真菌子实体内生细菌群落。通过细菌代谢物—真菌共培养实验,我们发现荷叶离褶伞内生细菌对真菌菌丝体生长和品质具有有益影响,其中菌株Ld13(嗜麦芽寡养单胞菌)的作用效果最显著。菌株Ld13具有良好的固氮、溶磷、解钾活性,不仅对真菌菌丝生长具有显著促进作用,还能显著提高菌丝的营养及品质。菌株Ld13显著促进菌丝生长,使真菌菌丝生物量提高了1.2倍;对真菌非挥发性化合物(可溶性糖、蛋白、游离氨基酸、5’-核苷酸、有机酸)也有显著作用,并使菌丝的等鲜浓度EUC提高了7.3倍,显著提升了菌丝的营养和品质。

关键词：外生菌根真菌菌根促生菌千岛湖内生细菌多样性非挥发性化合物促生功能

贡嘎山地区杜鹃内生放线菌生物多样性及抗菌促生功能评价

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

贡嘎山地区杜鹃内生放线菌生物多样性及抗菌促生功能评价

作者：赵翀四川农业大学

学位级别：硕士

药用植物杜鹃不仅极富观赏性,有的还可供食用,更有许多种类具有较高的医药价值,也可作为工业原料和植物杀虫剂,为医药、化工业提供了丰富的原材料。贡嘎山地区位于青藏高原的东南缘,自然条件复杂,气候多变,现有杜鹃属植物73种4变种2亚种... 详细信息

药用植物杜鹃不仅极富观赏性,有的还可供食用,更有许多种类具有较高的医药价值,也可作为工业原料和植物杀虫剂,为医药、化工业提供了丰富的原材料。贡嘎山地区位于青藏高原的东南缘,自然条件复杂,气候多变,现有杜鹃属植物73种4变种2亚种,杜鹃资源丰富。本研究以贡嘎山地区杜鹃为研究材料,结合可培养和免培养的方法,对杜鹃内生放线菌多样性进行分析。选择5种不同的分离培养基,从3个海拔高度采集的杜鹃茎、叶、花中分离出内生放线菌161株,根据放线菌的形态特征,选取76株代表菌株,经16S rRNA序列分析,对其种类进行鉴定。结果表明,从贡嘎山地区杜鹃茎、叶、花中分离到的内生放线菌包括13个属,分别是链霉菌属(Streptomyces)、假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)、拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)、纤维微菌属(Celluosimicrobium)、短杆菌属(Brevibacterium)、短状杆菌属(Brachybacterium)、纤维单孢菌属(Cellulomonas)、类诺卡氏菌属(Nocardioides)、红球菌属(Rhodococcus)、中村氏菌属(Nakamurella)、戈登氏菌属(Goradona)、小单孢菌属(Micramonospora)、游动放线菌属(Actinoplanes),其中以链霉菌为杜鹃可培养内生放线菌的优势种群。对贡嘎山地区杜鹃的免培养内生放线菌进行鉴定,结果表明免培养内生放线菌包括18个放线菌属,分别为弗兰克氏菌属(FranAia)、芽球菌属(Blastococcus)、血杆菌属(Sanguibacter)、弗莱德门氏菌属(Friedmanniella)、纤维单孢菌属(Cellulomonas)、中村氏菌属(Nakamurella)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、链霉菌属(Streptomyces)、潮湿球菌属(Humicoccus)、棒杆菌属(Corynebacterium)、假诺卡氏菌属(Pseuudonocardia)、Jatrophihabitans 菌属、微杆菌属(Microbacterium)、类诺卡氏菌属(Nocardioides)、利夫森氏菌属(Leifsonia)、微球菌属(Micrococcus)、地嗜皮菌属(Geodermatophilus)、节杆菌属(Arthrobacter)。结合可培养内生放线菌和免培养内生放线菌的分析结果,揭示了贡嘎山地区杜鹃内生放线菌多样性丰富,存在着大量的放线菌资源。对通过可培养方法筛选出的76株代表菌株进行抗菌促生功能评价。内生放线菌的抗菌活性初筛结果显示,76株供试菌中有81.6%的内生放线菌对9种指示菌表现出不同程度的抗性,抗菌谱较广;同时对菌株聚酮合成酶(PKS)、非核糖体多肽合成酶(NRPS)功能基因簇的筛选结果显示,PKS Ⅰ、PKSⅡ、NRPS基因阳性菌株检出率分别是30.3%、46.1%、13.2%,表明这两种基因簇在药用植物杜鹃内生放线菌中广泛存在,同源性分析也显示出较高的多样性。对内生放线菌促生能力进行检测,结果发现50%的菌株都能产IAA,63.2%的菌株具有产铁载体的能力,28.9%的菌株具有溶磷的能力,31.6%的菌株能降解纤维素,揭示了杜鹃内生放线菌对促进植物生长具有很大潜力。对76株杜鹃内生放线菌抗逆性检测结果表明,不同的内生放线菌对盐碱度、干旱度表现出不同程度的耐受性。其中,对盐浓度的耐受性随着盐浓度的增加而降低,所有菌株均能在盐浓度为0%时生长,92.1%的菌株能在3%的盐浓度下生长,盐浓度为7%时能正常生长的菌株降低到34.2%,而当盐浓度为15%时,还有1.3%的菌株能生长,达到了嗜盐的程度;培养基pH值由7.0向碱性和酸性变化均导致内生放线菌生长率降低,由100.0%(pH=7.0)降低至 94.7%(pH=6.0)和 75.0%(pH=10.0),而当 pH 达到 11.0 时,仍有1.3%的内生放线菌能生长,揭示了杜鹃内生放线菌具有较强的耐碱性;随着PEG浓度由0%增加至25%,水势不断降低,内生放线菌生长率降低,但仍能达到82.9%,表明杜鹃内生放线菌具有较强的耐旱性。已有研究发现,放线菌适宜生长在干燥、微碱性环境,而本实验的内生放线菌经检测发现,有菌株能在盐浓度高达15%,碱性环境pH值达到11.0,水势低至-1.309Mpa的环境中生长,揭示了杜鹃内生放线菌较强的抗逆性。根据内生放线菌的促生初筛结果,筛选出促生效果较好的潜力菌株SICAUZR27和SICAUZR28进行小麦盆栽试验。小麦生理指标测定结果表明,在菌株SICAUZR27和SICAUZR28的作用下,小麦的株高、根长、鲜重和干重比对照增加了 18.8%和5.87%、47.33%和 40.29%、48.99%和

关键词：贡嘎山地区杜鹃内生放线菌 PCR-DGGE 多样性抗菌活性促生功能抗逆性