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李斯特菌侵染宿主细胞过程中磷脂酶D活性变化的初步研究

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微生物学通报 2007年第5期34卷 914-916页

作者：纪蕾韩黎徐培君王菡苏文莉宋华吴旭琴胡小华苏州大学基础医学院病原生物学教研室苏州215123 中国人民解放军疾病预防控制所医院感染监督中心北京100071 西北大学生命科学院西安710069

磷脂酶D(phospholipase,PLD)在感染和炎症反应中发挥重要作用,然而其在单核增生李斯特菌(简称李斯特菌)侵染非洲绿猴肾细胞(Vero)中是否被激活尚未见报道。对李斯特菌刺激下的Vero细胞内PLD的活性变化进行了初步研究。以李斯特菌、佛波... 详细信息

磷脂酶D(phospholipase,PLD)在感染和炎症反应中发挥重要作用,然而其在单核增生李斯特菌(简称李斯特菌)侵染非洲绿猴肾细胞(Vero)中是否被激活尚未见报道。对李斯特菌刺激下的Vero细胞内PLD的活性变化进行了初步研究。以李斯特菌、佛波醇PMA分别刺激正常细胞及高效表达PLD2-K758R功能缺陷蛋白腺病毒预感染的Vero细胞,研究Vero细胞内PLD活性变化。结果发现,与对照组相比(不给予刺激),在李斯特菌和佛波醇PMA刺激正常Vero细胞过程中,胞内PLD活性增强非常显著。mPLD2-K758R蛋白的过度表达对Vero细胞的PLD基础活性无影响,但对李斯特菌和PMA诱导的PLD激活有明显抑制作用。这初步表明,在李斯特菌诱导的Vero细胞对其吞噬过程中的确伴有PLD的激活,并且可能主要是PLD2亚型被激活,但此吞噬过程中PLD的激活机制及激活后PLD的具体功能尚有待进一步研究。

关键词：李斯特菌磷脂酶D 侵染

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冬虫夏草菌侵染及寄生阶段的生长发育研究

菌物学报 2006年第4期25卷 646-650页

作者：曾纬尹定华李泉森李黎重庆市中药研究院重庆400065

冬虫夏草菌侵染进入寄主幼虫血体腔后,断裂形成长梭形的菌体。菌体以顶端出芽的方式增殖,分隔分化,互相质配。质配菌体生长出菌丝充满寄主幼虫血体腔,使幼虫死亡并形成僵虫形的菌核,菌核萌生子座即形成冬虫夏草。

关键词：冬虫夏草侵染寄生生长发育

大熊猫源枝孢样枝孢霉侵染小鼠皮肤的病理学过程

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2020年第3期46卷 350-357页

作者：刘真刘璐马晓平姜尧章王承东古玉四川农业大学动物医学院四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 中国大熊猫保护研究中心四川都江堰611800 四川农业大学生命科学院四川雅安625014

将180只ICR小鼠随机分为试验组和对照组,每组90只。在试验组小鼠两腹侧壁对称取2个点皮下注射大熊猫源枝孢样枝孢霉菌悬液(1×10^6 cfu/mL),接种12 h后(第1天),观察小鼠体况、接种部位表现,最后处死小鼠并取其接种部位的皮肤组织进行组... 详细信息

将180只ICR小鼠随机分为试验组和对照组,每组90只。在试验组小鼠两腹侧壁对称取2个点皮下注射大熊猫源枝孢样枝孢霉菌悬液(1×10^6 cfu/mL),接种12 h后(第1天),观察小鼠体况、接种部位表现,最后处死小鼠并取其接种部位的皮肤组织进行组织病理学检查和逆培养,用Image-Pro Plus 6.0统计病理切片中单位面积内免疫细胞数、孢子数和菌丝数,之后每隔24 h按上述步骤同样处理和观察。结果表明:接种后第1~8天小鼠体表特征变化不明显,小鼠机体免疫细胞由大量聚集到逐步减少,孢子与菌丝数由多到少又逐渐增加,处于萌发生长阶段;接种后第9~10天,接种部位出现小红斑,皮肤出现结节状损伤,各器官之间未粘连,其余症状不明显,免疫细胞持续增多;接种后第11~25天,接种部位红斑面积增大,损伤加大,颜色变深,有增生物,小鼠出现瘙痒症状,饮食明显减少,免疫细胞持续增多后逐步减少,孢子与菌丝数减少后急剧增加,再减少后又急剧增加,在第17、25天出现2次高峰;接种后第26天后小鼠饮食持续减少,接种部位出现局部坏死、黏膜粘连等症状,孢子和菌丝数逐渐减少至无。可见,枝孢样枝孢霉感染小鼠后第1~8天为潜伏期;第9~10天为前驱期,第11~25天为发病期,第26天后为转归期。

关键词：大熊猫小鼠枝孢样枝孢霉侵染组织病理学

腐烂病菌的GFP标记及其在梨叶片组织中的侵染和扩展观察

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果树学报 2015年第6期32卷 1195-1200,I0004,I0005页

作者：贾娜娜翟立峰白晴陈晓忍王彩霞洪霓王国平华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 青岛农业大学山东青岛266109

【目的】明确梨腐烂病菌强、弱致病力菌株在梨树叶片组织中的侵染及扩展情况。【方法】利用农杆菌介导的遗传转化(agrobacterium-mediated transformation technique,ATMT)方法对梨腐烂病菌强、弱致病力菌株进行绿色荧光蛋白(green loor... 详细信息

【目的】明确梨腐烂病菌强、弱致病力菌株在梨树叶片组织中的侵染及扩展情况。【方法】利用农杆菌介导的遗传转化(agrobacterium-mediated transformation technique,ATMT)方法对梨腐烂病菌强、弱致病力菌株进行绿色荧光蛋白(green looresent protein,GFP)标记,并筛选出和野生型菌株比较在生长速度、培养特性以及致病力都没有发生显著变化的阳性转化子菌株;利用荧光显微技术观察其在梨树叶片组织中的侵染和扩展,比较强、弱致病力菌株的侵染差异。【结果】强、弱致病力菌株在叶片上侵染存在差异。菌丝主要在叶片的上表皮扩展,菌丝扩展前端的叶片组织颜色发生变化,形成一段变色带,强致病力菌株侵染形成的变色带较弱致病力菌株形成的变色带宽,强致病力菌株菌丝在叶片组织上的分布较稀疏。【结论】梨腐烂病菌菌丝主要在叶片的上表皮组织扩展;强致病力菌株的侵入能力较强,其在叶片上扩展时菌丝分布较稀疏,扩展前端形成的变色带宽。

关键词：梨腐烂病菌农杆菌介导遗传转化绿色荧光蛋白标记侵染扩展

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谷子腥黑穗病的侵染途径和生物学特性研究

植物病理学报 1989年第1期19卷 27-33页

作者：白金铠汪志红胡吉成沈阳农业大学吉林省农科院植保所

以谷子腥黑穗菌(Tilletia setariae Ling)冬孢子接种正开花的谷子小花后引起发病,为花器局部侵染,当年侵染当年发病的非系统侵染病害。以二甲基亚砜处理,紫外光线照射和土壤越冬处理的冬抱子均能打破其休限期。在15—30℃里均能萌发,最... 详细信息

以谷子腥黑穗菌(Tilletia setariae Ling)冬孢子接种正开花的谷子小花后引起发病,为花器局部侵染,当年侵染当年发病的非系统侵染病害。以二甲基亚砜处理,紫外光线照射和土壤越冬处理的冬抱子均能打破其休限期。在15—30℃里均能萌发,最适萌发温度为25℃,在pH4—7里均可萌发,以pH6为最适。碳、氮源对冬孢子萌发无明显的刺激作用。病菌在人工培养基上生长最适温度是20℃,最适pH值为7.0。在PDA上生长最佳。棉子糖、葡萄糖和可溶性淀粉为最佳碳源,DL-丝氨酸为最佳氮源。冬孢子经扫描电镜观察为T型(瘤突型)。萌发产生的担孢子数多达百个,虽“毛刷状”。在人工培养基上能产生厚垣孢子。以0.5%KOH—safranin O快速核染色剂染色,看到菌丝细胞里多含有双核,及锁状联合。

关键词：谷子腥黑穗病侵染生物学特性

六株冬虫夏草相关菌对蝙蝠蛾幼虫侵染特性的研究

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应用昆虫学报 2021年第6期58卷 1312-1321页

作者：谢放陈照禾朱玉兰苏强军陈晨张育兰州交通大学生物与制药工程学院兰州730070

【目的】本文将冬虫夏草相关菌定义为分离自野生冬虫夏草Cordyceps sinensis,可以反接侵染蝙蝠蛾Hepialus armoricanus幼虫致死及与冬虫夏草菌Ophicordyceps sinensis对峙有相互影响的菌株。本文旨在对分离自冬虫夏草不同部位的6株相关... 详细信息

【目的】本文将冬虫夏草相关菌定义为分离自野生冬虫夏草Cordyceps sinensis,可以反接侵染蝙蝠蛾Hepialus armoricanus幼虫致死及与冬虫夏草菌Ophicordyceps sinensis对峙有相互影响的菌株。本文旨在对分离自冬虫夏草不同部位的6株相关菌单独或与冬虫夏草菌协同侵染蝙蝠蛾幼虫的效应进行研究。【方法】对6株相关菌进行生物学特征描述,并通过ITS序列比对进行种属鉴定;对6株相关菌做了与冬虫夏草菌的对峙实验及单独侵染蝙蝠蛾幼虫的实验;对其中的2株菌做了与冬虫夏草菌复合侵染蝙蝠蛾幼虫实验。【结果】证明了6株相关菌能够影响冬虫夏草菌的生长,其中菌株2F-2、FD、TB-1和TB-4对冬虫夏草菌抑制率接近100%,菌株3-5-2对冬虫夏草菌抑制率为4.32%;菌株MR-1对冬虫夏草菌抑制率为77.27%;6株相关菌均有侵染蝙蝠蛾幼虫的能力:菌株3-5-2对蝙蝠蛾幼虫侵染率为50.0%,菌株2F-2对蝙蝠蛾幼虫侵染率为85.0%,菌株MR-1对蝙蝠蛾幼虫侵染率为73.3%,菌株FD对蝙蝠蛾幼虫侵染率为70.0%,菌株TB-1对蝙蝠蛾幼虫侵染率为64.0%,菌株TB-4为65.0%;相对于单独侵染,复合侵染致死率有所下降。【结论】供试的6株相关菌均有侵染力并与冬虫夏草菌相互影响。

关键词：冬虫夏草相关菌蝙蝠蛾幼虫冬虫夏草菌侵染

原位杂交技术用于虹彩病毒对美国青蛙侵染的诊断

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中国兽医学报 2003年第1期23卷 75-77页

作者：谢简张奇亚李文鑫中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室湖北武汉430072 武汉大学生命科学院湖北武汉430072

蛙虹彩病毒 (Rana grylio virus,RGV)能引起鱼类、两栖类和爬行类水生动物严重的系统性疾病 ,RGV是从我国患病蛙中分离到的一种虹彩病毒。体外扩增的 RGV经人工方法感染幼龄美国青蛙 (Rana grylio) ,运用原位杂交技术 ,分别对感染 1～ 3... 详细信息

蛙虹彩病毒 (Rana grylio virus,RGV)能引起鱼类、两栖类和爬行类水生动物严重的系统性疾病 ,RGV是从我国患病蛙中分离到的一种虹彩病毒。体外扩增的 RGV经人工方法感染幼龄美国青蛙 (Rana grylio) ,运用原位杂交技术 ,分别对感染 1～ 3d后的蛙心、肺、肾、肠、脾、肝等 6种组织进行 RGV分子定位和检测。结果显示 ,在幼蛙的肺和肠中有较强的阳性信号 ,在其他组织中也检测到 RGV的存在。本试验探讨了 RGV感染早期在宿主体内的增殖及在不同组织中的分布状况 ,建立了一种蛙虹彩病毒的早期诊断方法 ,并为揭示 RGV的致病机制奠定了基础。

关键词：原位杂交技术虹彩病毒美国青蛙侵染诊断

大豆胞囊线虫侵染诱导五寨黑豆早期的转录组分析

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中国油料作物学报 2015年第2期37卷 194-200页

作者：李海燕王芳段玉玺陈立杰沈阳农业大学植物保护学院北方线虫研究所辽宁沈阳110866 黑龙江八一农垦大学农学院植物保护系黑龙江大庆163316 齐齐哈尔大学生命科学学院黑龙江齐齐哈尔161006

利用Illumina Hi SeqTM2000对大豆胞囊线虫侵染前后的抗病大豆品种五寨黑豆的转录组进行检测。将测序的两个文库进行拼接,得到长度大于200bp的reads共20 980 831条,总长度约为4.23Gb,筛选到1 045个差异表达基因。Gene ontology功能显著... 详细信息

利用Illumina Hi SeqTM2000对大豆胞囊线虫侵染前后的抗病大豆品种五寨黑豆的转录组进行检测。将测序的两个文库进行拼接,得到长度大于200bp的reads共20 980 831条,总长度约为4.23Gb,筛选到1 045个差异表达基因。Gene ontology功能显著性富集发现差异表达基因在生物过程注释基因最多,共有1 007个差异表达基因。在COG数据库中对基因产物进行直系同源分类,结果表明众多基因参与到碳水化合物及氨基酸的运输和代谢、次生代谢物质合成及信号传导机制过程,并受胞囊线虫侵染的诱导表达。KEGG代谢通路分析显示差异表达基因在苯丙烷类及氧化磷酸化代谢通路显著富集,说明这两个代谢通路在五寨黑豆抗胞囊线虫病中起重要作用。

关键词：大豆侵染大豆胞囊线虫转录组 Illumina高通量测序

影响蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂幼虫的因素及侵染过程观察

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昆虫学报 2012年第7期55卷 790-797页

作者：李江红郑志阳陈大福梁勤福建农林大学蜂学学院福州350002

为探究蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis只侵染封盖前后蜜蜂幼虫的原因及相关侵染机制,本研究利用实验室饲养的意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫,给其接种球囊菌孢子,探究不同接种量(0,1.0×102,1.0×103,1.0×104,1.0×105和1.0×10... 详细信息

为探究蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis只侵染封盖前后蜜蜂幼虫的原因及相关侵染机制,本研究利用实验室饲养的意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫,给其接种球囊菌孢子,探究不同接种量(0,1.0×102,1.0×103,1.0×104,1.0×105和1.0×106孢子/mL)、接种时期(3,4,5和6龄幼虫)以及28℃低温处理6h对蜜蜂球囊菌侵染的影响。同时对处于不同侵染阶段的蜜蜂幼虫做病理学切片,探究球囊菌侵染的过程。结果显示:球囊菌孢子接种量与蜜蜂的发病率密切相关(r=0.9883),蜜蜂幼虫对低于1.0×103孢子/mL的侵染有抗性,与不接孢子的对照组差异不显著(P>0.05)。蜜蜂不同龄期接种发病率的差异是因不同龄幼虫食量不同导致的摄入孢子剂量的不同引起的,28℃低温处理能够显著提高处于幼虫到蛹转化期蜜蜂的发病率(P侵染,降低了侵染成本,提高成功率。该研究阐明了蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂的机制,丰富了昆虫与病原菌之间相互作用的内容。

关键词：蜜蜂蜜蜂球囊菌意大利蜜蜂侵染孢子剂量接种时期致病性