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高三尖杉酯碱对肺癌A549侧群细胞增殖及凋亡的影响

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中国老年学杂志 2023年第23期43卷 5796-5800页

作者：刘彬曾宪晶袁金华余海红井冈山大学附属医院血液肿瘤科江西吉安343000 井冈山大学附属医院全科医学科江西吉安343000 井冈山大学医学部江西吉安343000

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对肺癌A549侧群细胞增殖及凋亡的影响。方法将肺癌A549侧群细胞分为5个不同剂量组,0μg/ml HHT为空白组,其余4组分别加入终浓度为20、40、80、160μg/ml HHT,分别设为HHT 20、40、80、160μg/ml组。HHT处理细... 详细信息

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对肺癌A549侧群细胞增殖及凋亡的影响。方法将肺癌A549侧群细胞分为5个不同剂量组,0μg/ml HHT为空白组,其余4组分别加入终浓度为20、40、80、160μg/ml HHT,分别设为HHT 20、40、80、160μg/ml组。HHT处理细胞48 h后,观察肺癌A549侧群细胞生长抑制率,检测细胞周期,利用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-9、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白水平。结果与空白组相比,经不同浓度HHT作用于A549侧群细胞后,细胞抑制率及细胞凋亡率升高,各组CyclinD1、MMP-9、VEGFmRNA和蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P侧群细胞CyclinD1水平,影响细胞周期,抑制VEGF、MMP-9基因、蛋白水平而参与了细胞凋亡。

关键词：高三尖杉酯碱侧群细胞基质金属蛋白酶细胞周期蛋白

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侧群细胞与肾癌肿瘤干细胞研究进展

中华肿瘤防治杂志 2015年第14期22卷 1161-1164页

作者：来卫东顾润国山东医学高等专科学校外科教研室山东临沂276000

目的总结国内外侧群细胞(side population,SP)及其在肾癌肿瘤干细胞中的研究进展。方法应用PubMed及中国知网期刊全文数据库检索系统,以"肿瘤干细胞、侧群细胞和肾癌"等为关键词,检索1996-01-2015-01的相关文献,共检索到英文文献660条,... 详细信息

目的总结国内外侧群细胞(side population,SP)及其在肾癌肿瘤干细胞中的研究进展。方法应用PubMed及中国知网期刊全文数据库检索系统,以"肿瘤干细胞、侧群细胞和肾癌"等为关键词,检索1996-01-2015-01的相关文献,共检索到英文文献660条,中文文献1 041条。纳入标准:1)肿瘤干细胞生物学特性;2)SP的表面标志和分选方法;3)肾癌肿瘤干细胞与SP相关性的研究。剔除标准:重复研究。最后纳入分析文献39篇。结果肿瘤干细胞是肿瘤发生、生长、转移和复发的根源,SP存在多种肿瘤细胞及肿瘤组织中,具有自我更新、多向分化和强大致瘤能力等干细胞的生物学特性,是肿瘤干细胞富集的亚群。利用SP细胞分选技术分离鉴定肿瘤干细胞及研究其生物学功能,将为肿瘤干细胞的研究提供新的方向。在对肾癌肿瘤干细胞的研究中发现SP细胞的分布,SP细胞表达的腺苷三磷酸转运蛋白G2(ATP binding cassette,ABCG2)能将多种化疗药物和外源性化学物质排出胞外,它的这种特性被认为与肾癌的多药耐药密切相关;肾癌SP细胞中乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)的表达明显高于非SP细胞,ALDH1阳性细胞在成球能力及致瘤能力上明显高于ALDH1阴性细胞。但是无论是ABCG2还是ALDH1都不是形成SP细胞表型的唯一原因。结论 SP可用于肾癌肿瘤干细胞的分选,但肾癌肿瘤干细胞的表面特征性标志仍需进一步研究。

关键词：肾肿瘤肿瘤干细胞侧群细胞综述文献

大蒜素抑制多发性骨髓瘤侧群细胞增殖机制研究

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中国实验血液学杂志 2017年第4期25卷 1086-1091页

作者：曾俊权郑永亮刘彬练建平龚志南井冈山大学附属医院血液肿瘤科江西吉安343000 井冈山大学附属医院科技教育科江西吉安343000

目的:探讨大蒜素对多发性骨髓瘤侧群细胞(side population,SP)增殖的影响及其作用机制。方法:培养RPM I-8226和NCI-H929细胞,应用Hoechst33342染色分析其侧群细胞的含量;对培养的侧群细胞,应用10μg/ml大蒜素处理,采用CCK8法分析大蒜素... 详细信息

目的:探讨大蒜素对多发性骨髓瘤侧群细胞(side population,SP)增殖的影响及其作用机制。方法:培养RPM I-8226和NCI-H929细胞,应用Hoechst33342染色分析其侧群细胞的含量;对培养的侧群细胞,应用10μg/ml大蒜素处理,采用CCK8法分析大蒜素对侧群细胞增殖的影响,应用平板集落形成法分析大蒜素对侧群细胞集落形成能力的影响,流式细胞术分析大蒜素对侧群细胞周期的影响,Western blot法分析大蒜素对周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E、CDK2和CDK4的表达。结果:在RPM I 8226和NCI-H929中均存在有侧群细胞,其所占比例分别为(3.17±0.98)%和(2.65±0.61)%。大蒜素能够呈时间依赖性抑制侧群细胞的增殖并显著抑制集落形成;大蒜素能够抑制周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E、CDK2和CDK4的表达并诱导细胞发生G1/S周期阻滞。结论:大蒜素可以抑制多发性骨髓瘤侧群细胞增殖和集落的形成,并可能通过下调细胞周期相关蛋白的表达诱导细胞发生G1/S阻滞。

关键词：多发性骨髓瘤大蒜素侧群细胞细胞增殖集落形成细胞周期

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多发性骨髓瘤侧群细胞的研究进展

中国实验血液学杂志 2017年第4期25卷 1250-1254页

作者：王蕾李艳中国医科大学附属第一医院血液科辽宁沈阳110001

侧群细胞具有高致瘤性、自我更新、多向分化和耐药的潜能。这些特性与肿瘤干细胞相似,因此侧群细胞渐渐成为研究肿瘤干细胞的切入点,为进一步研究肿瘤干细胞的生物学功能和分子机制奠定了基础。多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)病人... 详细信息

侧群细胞具有高致瘤性、自我更新、多向分化和耐药的潜能。这些特性与肿瘤干细胞相似,因此侧群细胞渐渐成为研究肿瘤干细胞的切入点,为进一步研究肿瘤干细胞的生物学功能和分子机制奠定了基础。多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)病人及其细胞系中均可以检测到侧群细胞,通过流式细胞仪加以分选,对其致瘤性,细胞周期,分化潜能,表面标记和耐药性进行了研究,更深入地了解多发性骨髓瘤的发病机制,并应用于临床早期诊断,为深入研究多发性骨髓瘤的治疗手段提供新的思路。本文将就多发性骨髓瘤侧群细胞的研究进展进行总结。

关键词：多发性骨髓瘤侧群细胞细胞周期

四君子汤对胃癌细胞株SGC-7901侧群细胞增殖的影响

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中国中西医结合杂志 2014年第6期34卷 704-709页

作者：李靖钱军贾建光金鑫喻大军谢波钱立宇张立功郭晨旭安徽省蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外三科蚌埠233000 安徽省蚌埠医学院研究生部蚌埠233000

目的对胃癌细胞株SGC-7901侧群(side population,SP)细胞、非侧群(non-side population,NSP)细胞及未分选(Total)细胞进行四君子汤药物血清干预,观察药物血清干预后胃癌细胞株SGC-7901的SP、NSP及Total细胞增殖能力的变化。方法 16只纯... 详细信息

目的对胃癌细胞株SGC-7901侧群(side population,SP)细胞、非侧群(non-side population,NSP)细胞及未分选(Total)细胞进行四君子汤药物血清干预,观察药物血清干预后胃癌细胞株SGC-7901的SP、NSP及Total细胞增殖能力的变化。方法 16只纯种新西兰家兔按随机数字表法分为对照组及四君子汤低[7 mL/(kg·d)]、中[14 mL/(kg·d)]、高[28 mL/(kg·d)]剂量组,每组4只,每组动物给予对应等体积灌胃,每天2次,持续2周。提取兔血清,应用高效液相色谱法对药物血清进行鉴定;应用流式细胞仪对人胃癌细胞株SGC-7901的SP细胞进行检测并分选出SP及NSP细胞;应用CCK-8法检测SP、NSP及Total细胞的增殖曲线及药物血清干预后的SP、NSP及Total细胞增殖能力变化。结果在制备的药物血清中检测到四君子汤的有效成分人参皂苷Rg1;胃癌细胞株SGC-7901 SP细胞的增殖能力明显高于NSP及Total细胞(P细胞株SGC-7901 SP、NSP及Total细胞的增殖具有抑制作用,但对SP细胞的增殖抑制作用明显低于NSP及Total细胞(P细胞株SGC-7901的SP、NSP及Total细胞增殖,但对3组细胞抑制程度存在明显差异。

关键词：四君子汤胃癌侧群细胞细胞增殖

在胃癌BGC-823细胞中侧群细胞的分选及其干细胞特性研究

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中国临床药理学杂志 2019年第9期35卷 873-876页

作者：耿嘉刘越敏罗慧英甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730101 甘肃省中药药理与毒理重点实验室甘肃兰州730101

目的对胃癌BGC-823细胞株中的侧群(SP)细胞进行分选,并对其干细胞特性进行研究。方法将胃癌BGC-823细胞株传代培养至呈对数生长期后,取适量细胞悬液分为2组:对照组(加入SP抑制剂——终浓度为50μmol·L^(-1)维拉帕米,分离NSP细胞)和实验... 详细信息

目的对胃癌BGC-823细胞株中的侧群(SP)细胞进行分选,并对其干细胞特性进行研究。方法将胃癌BGC-823细胞株传代培养至呈对数生长期后,取适量细胞悬液分为2组:对照组(加入SP抑制剂——终浓度为50μmol·L^(-1)维拉帕米,分离NSP细胞)和实验组(不加维拉帕米,分离SP细胞),用流式细胞仪分选出SP细胞和非侧群(NSP)细胞,研究SP细胞的干细胞特征:用噻唑蓝(MTT)法比较2种细胞的增殖能力;用细胞划痕实验比较2种细胞的迁移能力;用Transwell小室实验比较2种细胞的侵袭能力。结果从胃癌BGC-823细胞中分选得到约2%SP细胞。孵育后第4天,NSP细胞和SP细胞的增殖水平(光密度值)分别为0. 62±0. 42,0. 93±0. 17;第7天,这2种细胞的增殖水平(光密度值)分别为0. 81±0. 21,1. 96±0. 42;实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P 细胞比例分别降为(52. 03±2. 08)%,(3. 07±0. 88)%和(2. 16±0. 15)%;而对照组中SP细胞比例在21 d内基本维持在0. 03%左右,表明SP细胞不断通过分裂进行自我更新和分化,而NSP细胞基本不具有自我更新及分化的能力。经2 d孵育后,实验组与对照组在聚碳酸酯膜上每个视野中细胞数分别为(75. 22±4. 31),(22. 15±1. 77)个,组间比较差异有统计学意义(P 细胞具有更强的侵袭能力。结论在胃癌BGC-823细胞株中,存在一定比例的SP细胞。与NSP细胞比较,SP细胞具有更强的增殖、分化、迁移和侵袭能力,提示胃癌BGC-823细胞株中分选所得的SP细胞具有肿瘤干细胞的特性。

关键词：胃癌BGC-823细胞株侧群细胞增殖迁移侵袭

喉癌细胞株Hep-2中侧群细胞分选条件优化

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2014年第15期28卷 1137-1141页

作者：于锋艾毛毛广州市耳鼻咽喉头颈外科医院广州510620

目的：探讨喉癌细胞株Hep-2中侧群细胞分选的条件优化。方法：取对数生长期的Hep-2细胞,予胰酶消化后,制成1×106个/ml单细胞悬液。①实验组中加入Hoechst33342至终浓度分别为5、9、10、11μg/ml,37℃水浴90min。②取单细胞悬液,分别于3... 详细信息

目的：探讨喉癌细胞株Hep-2中侧群细胞分选的条件优化。方法：取对数生长期的Hep-2细胞,予胰酶消化后,制成1×106个/ml单细胞悬液。①实验组中加入Hoechst33342至终浓度分别为5、9、10、11μg/ml,37℃水浴90min。②取单细胞悬液,分别于37°水浴中孵育Hoechst 50、70、90、110、130min。③实验组喉癌细胞悬液加入Hoechst后,分两管分别孵育于37°水浴及37°恒温箱中。两管保持Hoechst浓度及细胞密度一致。④取汇合度分别为100%、70%的2瓶细胞,同上制成单细胞悬液。染色结束后,重悬PBS中,上流式细胞仪进行检测鉴定。以上各组均设阴性对照组于Hoechst染色前加维拉帕米,37℃中孵育30min,其他各条件保持与相应实验组一致。结果：①当Hoechst33342浓度分别为5、9、10、11μg/ml时,SP比例分别为（39.96±0.24）%、（26.23±0.39）%、（18.79±0.02）%、（19.01±0.14）%;死细胞比例分别为（30.45±0.63）%、（49.90±0.42）%、（50.12±0.68）%、（64.16±0.39）%。②Hoechst在37°水浴中孵育90min时,流式细胞图形最典型,SP比例为（17.37±1.42）%;③孵育于37°水浴较孵育恒温箱中,实验组未被Hoechst33342标记的细胞分别为（18.67±0.45）%、（22.6±0.50）%;④汇合度90%以上较汇合度70%的细胞,SP比例由（19.08±0.46）%降到（16.073±0.52）%。以上结果均经SPSS 13.0分析,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：在流式细胞仪分选喉癌Hep-2侧群细胞中Hoechst33342的最佳浓度为10μg/ml,最佳孵育时间为90min,且水浴优于恒温箱中孵育,细胞密度最好选择80%~90%。

关键词：喉肿瘤侧群细胞流式细胞术细胞分选条件 Hoechst33342

腹水来源卵巢上皮性癌细胞系中侧群细胞的分离、鉴定及耐药性分析

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中华妇产科杂志 2015年第6期50卷 452-457页

作者：魏振彤王医术于晓伟张松灵吉林大学第一医院妇产科长春130021 病理生物学教育部重点实验室

目的由已建立的腹水来源卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系中分离侧群（SP）细胞，鉴定SP细胞作为肿瘤干细胞样细胞的生物学特征，并对其进行耐药性分析。方法采用流式细胞仪分选该卵巢癌细胞系中的SP细胞；分别在体外分化条件下培养SP及非... 详细信息

目的由已建立的腹水来源卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系中分离侧群（SP）细胞，鉴定SP细胞作为肿瘤干细胞样细胞的生物学特征，并对其进行耐药性分析。方法采用流式细胞仪分选该卵巢癌细胞系中的SP细胞；分别在体外分化条件下培养SP及非侧群（NSP）细胞，并分别测定其SP细胞比例用于比较其体外分化及自我更新能力；将SP及NSP细胞接种于非肥胖性糖尿病－严重免疫缺陷（NOD—SCID）小鼠的皮下及腹腔，比较SP及NSP细胞的成瘤率；采用活细胞计数法（CCK-8法）检测SP、NSP及未分选卵巢癌细胞（未分选细胞）对顺铂的耐药性，以50％抑制浓度（IC50）表示。结果分选前的腹水来源卵巢癌细胞中，SP细胞比例为（4．81±0．43）％，从该卵巢癌细胞系中可持续、稳定地分离出SP细胞。SP细胞经体外分化培养，3周后其中sP细胞比例为（4．89±0．33）％，与分选前SP细胞比例相近，两者比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；而NSP细胞经体外分化培养，3周后其中sP细胞比例仅为（0．10±0．03）％，明显低于分选前SP细胞比例（P〈0．01）。皮下接种1．0×104个sP细胞6周后3只小鼠全部成瘤，皮下成瘤率为3／3，而接种1．0×104个NSP细胞12周后3只小鼠均未成瘤，皮下成瘤率为0，两者皮下成瘤率比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；同时，腹腔接种相同数量的SP、NSP细胞后其成瘤能力与皮下接种后相似；原发肿瘤与移植瘤经HE染色和免疫组化染色显示，原发肿瘤与移植瘤均为卵巢低分化浆液性乳头状囊腺癌，均表达卵巢浆液性乳头状囊腺癌标志物CA125。SP、NSP、未分选细胞的顺铂IC50值分别为（2．33±0．14）、（1．60±0．04）、（1．81±0．03）μg／m]，SP细胞的顺铂IC50值明显高于NSP及未分选细胞（P〈0．05）；以上述未分选细胞的顺铂IC50进一步处理后，未分选细胞中SP细胞比例为（40．10±4．22）％，明显高于顺铂处理前的SP细胞比例[为（4．81±0．43）％；P〈0．01]；以上述SP细胞的顺铂IC50进一步处理后，SP细胞的存活率为（58．7±3．3）％，再予维拉帕米拮抗后其存活率下降为（7．2±1．3）％，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论腹水来源卵巢癌细胞系中可持续、稳定地分离出SP细胞，分离出的SP细胞占整个肿瘤细胞群体中的极少数，具有自我更新和分化能力，可再现原发肿瘤的表型。具有干细胞样细胞的生物学特征。并且对卵巢癌一线化疔药物顺铂耐药。

关键词：卵巢肿瘤肿瘤干细胞侧群细胞抗药性肿瘤细胞系肿瘤 ATP结合匣式转运子

多发性骨髓瘤侧群细胞分选及其生物学特征分析

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中国实验血液学杂志 2014年第3期22卷 747-752页

作者：张晓丽张丽娜黄红铭丁润生施维徐瑞容于晓棠姜胜华江苏省南通大学附属医院血液科江苏南通226001 江苏省南通大学附属医院外科综合实验室江苏南通226001

本研究旨在从人多发性骨髓瘤细胞株中分选出侧群(SP)细胞并对其生物学特性进行分析。细胞经Hoechst33342染色后,应用荧光显微镜观察细胞内Hoechst荧光染色情况,采用流式细胞荧光激活分选(FACS)技术,将细胞分选为SP细胞与主群(main popul... 详细信息

本研究旨在从人多发性骨髓瘤细胞株中分选出侧群(SP)细胞并对其生物学特性进行分析。细胞经Hoechst33342染色后,应用荧光显微镜观察细胞内Hoechst荧光染色情况,采用流式细胞荧光激活分选(FACS)技术,将细胞分选为SP细胞与主群(main population,MP)细胞,用细胞生长曲线法比较两群细胞的体外增殖能力、集落形成试验比较细胞集落形成能力、流式细胞术分析两群细胞CD138的表达情况,应用RT-PCR法检测ABCG2mRNA在两群细胞中的表达不平、硼替佐米对CCK-8法和集落形成试验检测对两群细胞增殖、活力和细胞集落形成能力的影响。结果表明,骨髓瘤细胞株中存在小部分比例的SP细胞,RPMI 8226细胞株中SP细胞高达(7.10±2.69)%,在荧光显微镜下也检测到SP细胞;SP细胞增殖活力、细胞集落形成能力明显高于MP细胞(P细胞的CD138表达率无明显差异(P>0.05);SP细胞表达耐药基因ABCG2,而MP细胞几乎不表达该基因;SP细胞的硼替佐米抑制率明显低于MP细胞(P0.05);硼替佐米均能降低两群细胞的集落形成能力,但MP细胞降低更为明显。结论:骨髓瘤细胞系中存在少量SP细胞,具有肿瘤干细胞的相关生物学特性。

关键词：多发性骨髓瘤肿瘤干细胞侧群细胞主群细胞