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白藜芦醇对U937细胞基质金属蛋白酶-9转录的抑制作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第11期24卷 105-109+114页

作者：李怡棠沈放刘柏合程桂芳中国医学科学院协和医科大学药物研究所药理室中国医学科学院协和医科大学药物研究所药理室北京 100050 中国

目的:观察白藜芦醇对佛波酯诱导的U937细胞中基质金属蛋白酶-9活性的影响,并从蛋白、mRNA及核转录因子激活蛋白-1(AP-1)水平对其影响进行分析。方法:酶谱法测定U937细胞培养上清中MMP-9的活性;Western blot法考察MMP-9蛋白的生成;RT-PC... 详细信息

目的:观察白藜芦醇对佛波酯诱导的U937细胞中基质金属蛋白酶-9活性的影响,并从蛋白、mRNA及核转录因子激活蛋白-1(AP-1)水平对其影响进行分析。方法:酶谱法测定U937细胞培养上清中MMP-9的活性;Western blot法考察MMP-9蛋白的生成;RT-PCR法检测MMP-9 mRNA的表达;电泳迁移率变动分析法(EMSA)研究核转录因子SP-1的活性。结果:PMA 10nmol/L 可显著诱导无血清培养的U937细胞中MMP-9活性(P<0.01);白藜芦醇在1和10 μmol/L浓度下可抑制 PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9活性(P<0.05 和P<0.01);PMA 10 nmol/L可显著诱导U937细胞中MMP-9蛋白生成(P<0.01)和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01),白藜芦醇在1、10μmol/L浓度下可抑制PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9蛋白生成和MMP-9 mRNA的表达(P<0.05);白藜芦醇在10、1和0.1μmol/L浓度下可抑制PMA诱导的U937细胞中AP-1的活化。结论:白藜芦醇可有效地抑制PMA诱导的U937细胞中MMP-9的活性,其作用可能是通过抑制PMA诱导的U937细胞核转录因子AP-1活化,进而降低MMP-9 mRNA表达,减少MMP-9蛋白生成而实现的。

关键词：白藜芦醇基质金属蛋白酶佛波醇酯类 U937细胞转录因子AP-1

三氧化二砷联合佛波酯对Kasumi-1细胞增殖的抑制作用及其机制

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中华血液学杂志 2014年第6期35卷 537-541页

作者：袁芳芳许锦霞米瑞华范瑞华尹青松魏旭东郑州大学附属肿瘤医院(原河南省肿瘤医院)血液科 450008

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合佛波酯（TPA）对急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1细胞的增殖抑制作用及机制.方法用200 nmol/L TPA、不同浓度As2O3单独及联合作用于Kasumi-1细胞,用CCK-8法观察细胞增殖抑制率,Annexin Ⅴ法测定... 详细信息

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合佛波酯（TPA）对急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1细胞的增殖抑制作用及机制.方法用200 nmol/L TPA、不同浓度As2O3单独及联合作用于Kasumi-1细胞,用CCK-8法观察细胞增殖抑制率,Annexin Ⅴ法测定细胞凋亡率,集落形成实验检测集落形成率,流式细胞术检测细胞分化及细胞周期改变,Western blot法检测P38及磷酸化P38蛋白的表达.结果 TPA联合不同浓度As2O3（0.2、2.0、20.0 μmol/L）作用于Kasumi-1细胞48 h的增殖抑制率分别为（25.56±7.29）％、（60.63±6.64）％、（73.37±2.15）％,细胞凋亡率为（61.65±2.62）％、（75.39± 1.04）％、（89.95±1.46）％,集落形成率为（76.17±2.06）％、（38.50±1.87）％、（18.53±2.20）％,与不同浓度As2O3单药组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）;TPA可促使Kasumi-1细胞向单核巨噬细胞分化;TPA可使Kasumi-1细胞阻滞于G1期,As2O3可使Kasumi-1细胞阻滞于G2期,TPA可增强As2O3对细胞周期的影响;TPA与As2O3联用可增强As2O3促磷酸化P38蛋白表达.结论 TPA与As2O3联合作用能增强As2O3的促凋亡作用及对细胞周期的影响,增强其抗白血病作用.

关键词：白血病,早幼粒细胞,急性佛波醇酯类砷剂 Kasumi-1细胞细胞凋亡

佛波醇脂和溴脱氧尿嘧啶核苷促进鼻咽癌细胞中CD133的表达

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肿瘤 2010年第2期30卷 100-104页

作者：江庆萍方唯意姚开泰广州医学院第三附属医院病理科广州510150 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广州510515

目的:了解促癌剂佛波醇酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)和非放射性标记物溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)对鼻咽癌细胞5-8F中CD133表达的影响。方法:BrdU、TPA单独作用和Brdu+TPA联合作用处理鼻咽癌细胞株5-8F,不同药物处理组细胞采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)及Western印迹法检测CD133基因mRNA和蛋白水平的表达,FCM法分离并观察CD133+细胞含量的变化,Boyden小室侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:与未处理组细胞相比,BrdU单独作用组和BrdU+TPA联合作用组细胞的CD133 mRNA表达量都有不同程度升高(P值分别为0.037和0.003),TPA单独作用组的CD133 mRNA表达量则降低;Western印迹法检测结果提示,3组药物处理组细胞CD133蛋白的表达量均增高;FCM法检测结果显示,CD133+细胞的含量增加;细胞侵袭能力增强,以BrdU+TPA联合作用组效果最显著。结论:在鼻咽癌细胞中,TPA和BrdU均能提高CD133蛋白的表达,并且有相互协同作用。

关键词：鼻咽肿瘤佛波醇酯类溴脱氧尿苷 CD133

肝素增强佛波酯对人鼻咽癌CNE2细胞的作用 :上调c-jun ,p53 ,p21的表达(英文)

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中国病理生理杂志 2002年第3期18卷 250-255页

作者：李红良陈丹丹张海伟钟玲李小红罗英儒任先达司徒锐暨南大学药学院药理教研室广东广州510632 中山大学第一附属医院心内科广东广州510089 暨南大学医学院病理教研室广东广州510632

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与... 详细信息

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与佛波酯联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用。结果 :肝素与佛波酯联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强的作用 ,同佛波酯单独应用于诱导细胞凋亡相比 ,低剂量的肝素与佛波酯联合应用后发现 :TUNEL阳性细胞明显增多 ;G1 期细胞阻止 ,S期细胞明显减少 ,凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化更加明显 ;c-jun ,p53 ,p2 1基因表达明显升高 ,而c-fos在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素增强佛波酯对人鼻咽癌细胞的抗增殖及促凋亡 ,这可能与c-jun ,p53 ,p2

关键词：肝素细胞周期细胞凋亡佛波醇酯类 CNE2细胞鼻咽癌 c-jumn p53 p21

佛波醇酯加离子霉素诱导脐血和成人外周血CD4^+CD25^+ T细胞分泌IL-2的相关机制研究

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中国病理生理杂志 2006年第6期22卷 1133-1137页

作者：肇静娴曾耀英李海仙曾祥凤季煜华何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510630

目的:以佛波醇酯加离子霉素作为刺激剂,验证CD4+CD25+调节性T细胞本身并不存在分泌IL-2障碍;同时通过对脐血和成人外周血的比较性研究,了解脐血CD4+CD25+T细胞的成熟度。方法:以autoMACS从足月婴儿脐血(CB)和成人外周血(PB)分选CD4+CD25... 详细信息

目的:以佛波醇酯加离子霉素作为刺激剂,验证CD4+CD25+调节性T细胞本身并不存在分泌IL-2障碍;同时通过对脐血和成人外周血的比较性研究,了解脐血CD4+CD25+T细胞的成熟度。方法:以autoMACS从足月婴儿脐血(CB)和成人外周血(PB)分选CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,以PDB+ionomycin作为刺激剂,培养45h后流式细胞术检测各组细胞表达CD69和CD25水平,并以Luminex多重细胞因子检测技术检测培养上清中7种细胞因子的浓度。结果:经PDB+ionomycin刺激后,CB、PB的CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均发生增殖,但在培养45h后CD4+CD25+T细胞均出现细胞状态变差或死亡倾向。CB、PB的CD4+CD25+T细胞活化后CD25分子表达进一步上调,高于CD25-细胞活化后的CD25分子密度。经PDB+ionomycin刺激后,PB CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞均分泌高水平的IFN-γ、IL-2和TNF-α,但CD25+细胞分泌IL-5、IL-4和IL-10水平远远高于CD25-细胞;CBCD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞亦分泌高水平的IL-2和TNF-α,但IFN-γ水平远远低于PB,基本不分泌IL-5、IL-4和IL-10。结论:CD4+CD25+T细胞本身并不存在合成和分泌IL-2障碍,其可能具有与传统T细胞不同的T细胞受体信息转导模式;脐血CD4+CD25+T细胞功能尚未完全成熟。

关键词： CD4^+CD25^+T细胞佛波醇酯类白细胞介素2 胎血离子霉素

斯伐他汀对佛波酯诱导的人肾小球系膜细胞A型清道夫受体表达的作用

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中华肾脏病杂志 2006年第6期22卷 343-347页

作者：叶文玲李学旺许彩民李航李艳段琳金晶中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院肾内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础研究所北京100730

目的观察斯伐他汀(Simv)对佛波酯(PMA)诱导的人肾小球系膜细胞(HMC)A 型清道夫受体(SR-A)表达的作用。方法激光共聚焦显微镜检测HMC对荧光Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)的摄取。RT-PCR法检测HMC SR-A mRNA表达。瞬时转染带有SR-A... 详细信息

目的观察斯伐他汀(Simv)对佛波酯(PMA)诱导的人肾小球系膜细胞(HMC)A 型清道夫受体(SR-A)表达的作用。方法激光共聚焦显微镜检测HMC对荧光Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)的摄取。RT-PCR法检测HMC SR-A mRNA表达。瞬时转染带有SR-A 启动子片段的荧光素报告质粒,观察斯伐他汀对HMC SR-A启动子活性的影响。结果 (1)斯伐他汀(10μmol／L)明显抑制PMA(16．2 nmol／L)诱导的HMC对Dil-ac-LDL的摄取,100μmol／L 甲羟戊酸(Mev)基本阻断斯伐他汀的抑制作用。(2)斯伐他汀作用48 h,剂量依赖性(1-10 μmol／L)抑制PMA诱导的HMC SR-A mRNA表达,10 μmol／L组HMC SR-A mRNA表达量为对照组的54．7％;Mev可部分逆转斯伐他汀对SR-A mRNA的作用。(3)斯伐他汀抑制PMA诱导的 HMC SR-A启动子活性,处理组与对照组荧光素酶活性相比,差异具有统计学意义(P<0．01); 斯伐他汀加甲羟戊酸组荧光酶活性与对照组相比,无显著性差异。(4)斯伐他汀直接抑制转染 SR-A cDNA的人肾小球系膜细胞系SR-A mRNA表达。结论 (1)斯伐他汀抑制HMC SR-A 基因表达和活性可能为其延缓慢性肾小球疾病进展的机制之一;(2)斯伐他汀通过抑制甲羟戊酸代谢途径而抑制HMC SR-A的表达。

关键词：斯伐他汀佛波醇酯类肾小球肾炎系膜细胞 A型清道夫受体

层粘连蛋白与佛波醇酯对人肝癌细胞粘连和增殖特性的影响

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中国病理生理杂志 2003年第7期19卷 927-929,T002页

作者：张海伟邝珉陈小琳郑佩娥暨南大学医学院病理解剖学教研室广东广州510632 暨南大学医学院第一附属医院外科广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的 :探讨层粘连蛋白 (Ln)与佛波醇酯 (PMA)对人肝癌细胞粘连和增殖特性的影响及其相关机制 ,提供肝癌治疗的新线索。方法 :体外以人肝癌细胞系 (BEL - 74 0 2 )为靶细胞 ,在揭示靶细胞是否存在内源性Ln(enLn)表达的同时 ,利用促癌剂PM... 详细信息

目的 :探讨层粘连蛋白 (Ln)与佛波醇酯 (PMA)对人肝癌细胞粘连和增殖特性的影响及其相关机制 ,提供肝癌治疗的新线索。方法 :体外以人肝癌细胞系 (BEL - 74 0 2 )为靶细胞 ,在揭示靶细胞是否存在内源性Ln(enLn)表达的同时 ,利用促癌剂PMA(phorbol- 12 -myristate - 13-acetate)与外源性Ln(exLn)的作用来比较研究enLn及细胞蛋白激酶C -α(cPKC -α)活性表达变化与细胞粘连和增殖特性的关系。结果 :靶细胞呈现enLn的阳性表达 ,exLn能加强其细胞粘连及增殖能力 ;当PMA作用时 ,其细胞呈现enLn的更高程度表达 ,其细胞粘连性亦得到更明显地加强 ;而仅PMA的单独作用却能使其细胞呈现明显的增殖抑制 ,但PMA与exLn的共同作用 ,其细胞增殖力呈现在exLn单独作用得到加强的基础上获得更进一步的加强 ,显示出了协同效应。并且 ,PMA的单独作用能下调其细胞cPKC -α的表达 ,而外源性Ln的作用则能加强其细胞cPKC -α的表达。结论 :内、外源性Ln的作用与人肝癌细胞的粘连、增殖密切相关 ,其与癌细胞的cPKC -α的活性密切关联。

关键词：肝肿瘤粘连增殖信号转导层粘连蛋白蛋白激酶C 佛波醇酯类

地塞米松对PMA诱导CD18表达的抑制作用

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中国病理生理杂志 2002年第6期18卷 607-610页

作者：何晓文刘宇健李峻潘真钟纪根卢建海军医学研究所第二军医大学基础部病理生理教研室第二军医大学海医系上海200433

目的 :研究GC抑制CD18表达的作用。方法 :选用PMA刺激下的U937细胞为实验模型 ,运用定量RT -PCR、Northern杂交检测U937细胞CD18mRNA的表达水平。结果 :Dex能明显抑制PMA诱导CD18mRNA的表达 ,这种抑制作用具有明显的剂量依赖性 ,GR的拮... 详细信息

目的 :研究GC抑制CD18表达的作用。方法 :选用PMA刺激下的U937细胞为实验模型 ,运用定量RT -PCR、Northern杂交检测U937细胞CD18mRNA的表达水平。结果 :Dex能明显抑制PMA诱导CD18mRNA的表达 ,这种抑制作用具有明显的剂量依赖性 ,GR的拮抗剂RU384 86能够明显扭转Dex的抑制作用。结论 :Dex通过GR介导能在转录水平上抑制PMA诱导的CD18mRNA的表达 ,该作用可能与糖皮质激素受体 (GR)在转录水平拮抗NF-κB有关。

关键词：地塞米松佛波醇酯类 NF-kappaB 糖皮质激素 CD18蛋白质炎症反应

蛋白激酶C对生长激素释放激素调节人垂体腺瘤激素分泌作用的影响

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中国现代神经疾病杂志 2006年第4期6卷 288-290页

作者：刘暌刘勤雷霆白祥军薛德麟华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科同济医学院附属协和医院儿科

目的旨在探讨蛋白激酶C调节剂对原代培养人垂体腺瘤细胞分泌生长激素和催乳素作用的影响。方法经原代培养的人垂体腺瘤细胞与佛波醇酯共同培养,通过放射免疫学方法检测生长激素和催乳素水平,评价佛波醇酯对生长激素释放激素调节垂体腺... 详细信息

目的旨在探讨蛋白激酶C调节剂对原代培养人垂体腺瘤细胞分泌生长激素和催乳素作用的影响。方法经原代培养的人垂体腺瘤细胞与佛波醇酯共同培养,通过放射免疫学方法检测生长激素和催乳素水平,评价佛波醇酯对生长激素释放激素调节垂体腺瘤激素分泌作用的影响;同时应用DNA序列分析确定gsp癌基因突变率。结果gsp癌基因鉴定显示,18例垂体腺瘤组织标本中6例gsp癌基因表达阳性,5例突变位于201密码子,1例位于207密码子。佛波醇酯强烈刺激生长激素和催乳素的分泌并增强生长激素释放激素的刺激分泌作用,最大效应浓度为100nmol/L,使生长激素分泌水平增加2～30倍;Staurosporine作用则相反,大多数肿瘤细胞表现为明显的抑制效应,而且与gsp癌基因不相关;联合应用生长激素释放激素和佛波醇酯后使刺激分泌的作用增强,但与gsp癌基因亦无关。结论蛋白激酶C可能参与垂体腺瘤激素分泌的调控。

关键词：垂体肿瘤蛋白激酶C 佛波醇酯类信号传递腺瘤