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林业科学研究 2022年第3期35卷 9-17页

作者：胡珊杨春霞谷振军杜强肖平江李火根江西省林业科学院江西南昌330013 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 安福县武功山林场江西吉安343200

[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系,为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料,从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组... 详细信息

[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系,为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料,从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化;选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团(ESM)的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验,选择发育正常的子叶胚进行萌发,8周后移栽。[结果]基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素(PGR)组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高,达63.33%;处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期(7月20日左右);6种基本培养基中,在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,达40.00%;不同PGR组合及浓度中,以0.5 mg·L^(−1)6-BA+1.0 mg·L^(−1)2,4-D+2.0 mg·L^(−1) NAA+5.0 mg·L^(−1) ABA的胚性愈伤组织诱导率最高,达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养14 d后,转入含有ABA 8.0 mg·L^(−1)、PEG 8000140 g·L^(−1)以及麦芽糖40.0 g·L^(−1)的体胚成熟分化培养基上,体胚发生数平均为411个·g^(−1),体胚萌发率可达93.33%;体胚苗移栽成活率可达86.30%。[结论]本研究优化了火炬松胚性愈伤组织诱导与体胚发生技术体系,体胚诱导率显著提升,为火炬松良种规模化繁育及遗传转化提供技术支撑。

关键词：火炬松未成熟合子胚胚性愈伤组织体细胞胚胎发生体胚萌发

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氨基酸对荔枝愈伤组织增殖及体胚发生体系优化的研究

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果树学报 2023年第11期40卷 2466-2476页

作者：王果刘耀婷王家保李焕苓中国热带农业科学院环境与植物保护研究所·农业农村部儋州农业环境科学观测实验站海南儋州571737 海南大学热带作物学院海口570228

【目的】探究氨基酸对荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【方法】采用L9(34)正交设计,分别在妃子笑荔枝愈伤组织继代及体胚诱导阶段添加不同氨基酸,比较其对愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【结果】在愈伤组织增殖阶段培养基中添加氨... 详细信息

【目的】探究氨基酸对荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【方法】采用L9(34)正交设计,分别在妃子笑荔枝愈伤组织继代及体胚诱导阶段添加不同氨基酸,比较其对愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【结果】在愈伤组织增殖阶段培养基中添加氨基酸均显著提高愈伤组织增殖率,最优处理为基础继代培养基添加0.1 g·L^(-1)γ-氨基丁酸+0.2 g·L^(-1)谷氨酰胺,愈伤组织增殖率为初始接种量的14.04倍。与对照相比,氨基酸处理组的胚性愈伤组织淡黄,颗粒较小,细胞呈椭圆形,细胞质浓厚,多为正在分裂状态;非胚性愈伤组织浅白,水渍严重,着生于顶部或者边缘,易于剔除。在愈伤组织增殖阶段培养基中添加γ-氨基丁酸、谷氨酰胺和丙氨酸对后续的体胚发生及萌发影响极显著(p体胚,77株组培苗。在体胚发生阶段培养基中添加氨基酸,获得的体胚发生及萌发最优配方为基础诱导培养基添加0.3 g·L^(-1)γ-氨基丁酸+0.4 g·L^(-1)谷氨酰胺+0.05 g·L^(-1)丙氨酸,每克愈伤组织可获得270个体胚,72株组培苗。【结论】氨基酸可调节愈伤组织胚性,提高愈伤组织增殖率,促进体胚发生及萌发。

关键词：荔枝愈伤组织体胚发生体胚萌发氨基酸

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‘宁杞8号’体细胞胚胎发生体系建立

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广西植物 2018年第9期38卷 1183-1190页

作者：刘静袁婷倪细炉朱强王翠平宁夏林业研究院股份有限公司银川750004 种苗生物工程国家重点实验室银川750004

以宁夏枸杞新品种‘宁杞8号’幼嫩叶片为外植体,探讨激素组合及添加物对‘宁杞8号’体细胞胚胎诱导、体胚增殖、萌发和植株再生的影响,并建立高效稳定的体细胞胚胎发生体系。结果表明:通过对6-BA、2,4-D和IAA进行正交分析,筛选出‘宁杞... 详细信息

以宁夏枸杞新品种‘宁杞8号’幼嫩叶片为外植体,探讨激素组合及添加物对‘宁杞8号’体细胞胚胎诱导、体胚增殖、萌发和植株再生的影响,并建立高效稳定的体细胞胚胎发生体系。结果表明:通过对6-BA、2,4-D和IAA进行正交分析,筛选出‘宁杞8号’体细胞胚诱导最优激素组合:6-BA 1.0 mg·L^(-1)+2,4-D0.3 mg·L^(-1)+IAA 0.4 mg·L^(-1),体胚诱导率达88.67%。极差分析比较各激素间的影响,6-BA对体胚诱导影响最显著。当高浓度的生长素及低浓度细胞分裂素浓度适宜的配比时,才能诱导产生形态正常数量多的‘宁杞8号’体细胞胚。在体胚增殖培养中,6-BA的浓度过高易导致玻璃化,不利于‘宁杞8号’体胚增殖生长。随着激素浓度的增高,体胚增殖倍数增加,玻璃化率也越高,综合分析得到‘宁杞8号’最佳体胚增殖培养基为6-BA 0.4 mg·L^(-1)+NAA 0.6 mg·L^(-1)。当添加IBA 0.3 mg·L^(-1)+GA_30.4 mg·L^(-1)+蔗糖10 g·L^(-1)时,‘宁杞8号’体胚萌发率最高,萌发率达89.17%。添加GA_3及低浓度蔗糖能促进成熟的体胚萌发。对‘宁杞8号’体萌发的影响程度依次是IBA>蔗糖>GA_3。活性炭能有效提高‘宁杞8号’体胚再生植株率,同时对萌发体胚的根的发育也有促进作用,当IBA 0.1 mg·L^(-1)+KT 0.4 mg·L^(-1)+活性炭1 g·L^(-1)时,‘宁杞8号’体胚再生植株效果最佳,体胚再生率达91.67%。

关键词： '宁杞8号’ 体细胞胚胎发生体胚诱导增殖体胚萌发植株再生

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麻栎体细胞胚胎发生与快速繁殖技术研究

麻栎体细胞胚胎发生与快速繁殖技术研究

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作者：廖婧南京林业大学

学位级别：硕士

麻栎(Quercus acutissima Carr.)既是重要的造林树种，也是经济价值很高的树种。本文综述了国内外栎属植物体胚发生和快速繁殖方面的研究现状，探索了麻栎快速繁殖技术新途径。以麻栎种子、成熟合子胚、幼苗茎叶组织和成年植株茎段为外... 详细信息

麻栎(Quercus acutissima Carr.)既是重要的造林树种，也是经济价值很高的树种。本文综述了国内外栎属植物体胚发生和快速繁殖方面的研究现状，探索了麻栎快速繁殖技术新途径。以麻栎种子、成熟合子胚、幼苗茎叶组织和成年植株茎段为外植体，对麻栎体胚发生和快速繁殖技术进行了研究和探讨。成功获得了大量麻栎体胚，建立了麻栎体胚发生技术体系，为栎属植物体胚发生提供了重要参考。主要结论如下： (1)麻栎成熟合子胚体胚诱导最适培养基为MS+IBA(1.0mg L)+6-BA(1.0mg L-1)+谷氨酰胺(1.0g L)+脯氨酸(0.5g L)，诱导率达到70.0%;最适的成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mg L)+6-BA(2mg L)+ABA(2mg L-1)+谷氨酰胺(4g L-1)+脯氨酸(2g L);经4℃冷处理后，培养基1/2MS+6-BA(0.2mg L)+山梨醇(10g L-1)萌发效果最佳。 (2)麻栎幼苗茎、叶外植体体胚诱导最适培养基为MS+TDZ(0.1m g L)+谷氨酰胺(1g L)+脯氨酸(0.6g L)+IBA(1.0mg L)+6-BA(1.0m g L);在1/2MS+6-BA(2.0mg L)+IBA(0.5mg L)+ABA(2mg L)+谷氨酰胺(4g L)+脯氨酸(2g L-1)培养基中，观察到体胚由白色或淡黄色逐渐转为绿色，呈颗粒球状，但没有观察到心形胚或鱼雷胚。 (3)麻栎成熟植株茎段体胚诱导最适培养基为MS+TDZ(0.1m g L)+谷氨酰胺(1g L)+脯氨酸(0.6g L)+IBA(0.5mg L)+6-BA(2.0m g L);最适成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mg L)+6-BA(2.0mg L)+ABA(2mg L)+谷氨酰胺(4g L)+脯氨酸(2g L);未见体胚萌发，可能由于外植体存在生理老化现象。 (4)麻栎体胚发生经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段，成熟体胚和愈伤组织结合较松散，容易分离或自行脱落，分化出胚芽和胚根，独立形成完整小植株。观察结果表明，麻栎体胚具有明显的两极性和相对独立性，这两点完全符合判断体胚的两个重要特征。因此，本研究成功建立了麻栎体胚发生体系。 (5)麻栎种子外植体芽增殖最适培养基为MS+IBA(0.1mg L)+6-BA (4.0mg L);壮苗培养基MS+IBA(0.1mg L)+水解酪蛋白(1.5g L)。麻栎幼苗茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mg L)+6-BA(3.0m g L)。麻栎成熟茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mg L)+6-BA(3.0mg L)。

关键词：麻栎体胚发生体胚成熟体胚萌发快速繁殖

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利用间歇浸没式生物反应器进行橡胶组培快繁研究

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热带生物学报 2024年第6期15卷 737-744页

作者：董礼昊陈健妙王凯旋郭佳忻海南大学南繁学院/三亚南繁研究院海南三亚572024 海南大学热带农林学院海南儋州571737

为了寻找橡胶树组培育苗的高效途径,以‘RRIM 600’橡胶果内珠被初萌体胚为材料,通过筛选激素配比、优化接种密度和间歇频率等培养条件,探索RITA®间歇浸没式生物反应器培养橡胶果内珠被体细胞胚的适宜条件。结果表明,‘RRIM 600’果内... 详细信息

为了寻找橡胶树组培育苗的高效途径,以‘RRIM 600’橡胶果内珠被初萌体胚为材料,通过筛选激素配比、优化接种密度和间歇频率等培养条件,探索RITA®间歇浸没式生物反应器培养橡胶果内珠被体细胞胚的适宜条件。结果表明,‘RRIM 600’果内珠被初萌体胚间歇浸没式培养的最佳条件为:MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)NAA+50 g·L^(-1)蔗糖,营养液间歇浸没频率为每6 h浸没处理1 min,接种密度为每个容器15个体胚。与固体培养相比,该条件下体胚再生植株的株高、茎粗、根长、生根数和单株鲜质量分别显著增加了30%、91.7%、34.8%、53.3%和97.2%;再生植株的SOD、CAT和POD协调作用能力更强。RITA®间歇浸没培养方式是提高橡胶树初萌体胚形成再生植株效率的有效途径,可缩短橡胶树体胚再生植株形成周期及提高体胚苗生长质量。

关键词：间歇浸没式培养 RITA® 橡胶树体胚萌发植株再生

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马尾松幼胚培养体细胞胚胎发生研究简报

马尾松幼胚培养体细胞胚胎发生研究简报

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第二届中国林业学术大会——S2 功能基因组时代的林木遗传与改良

作者：杨模华靳小翠张冬林李志辉中南林业科技大学林学院美国缅因大学植物、土壤和环境科学系

2008年在湖南长沙以7月中下旬马尾松未成熟幼果为材料,剥取带胚乳的未成熟幼胚置于LP培养基上,添加适量的植物激素A、B、C、D,经胚性愈伤组织的诱导、增殖、体细胞胚胎的分化与成熟各阶段,"爆发式"地产生了大量完整的马尾松体细胞胚胎... 详细信息

2008年在湖南长沙以7月中下旬马尾松未成熟幼果为材料,剥取带胚乳的未成熟幼胚置于LP培养基上,添加适量的植物激素A、B、C、D,经胚性愈伤组织的诱导、增殖、体细胞胚胎的分化与成熟各阶段,"爆发式"地产生了大量完整的马尾松体细胞胚胎。已获得的马尾松胚性愈伤组织质量较好,其生长旺盛,增殖速度快;这些胚性愈伤组织在添加适量的ABA的LP分化培养基上,经过3个多月的分化、成熟培养,于2009年3月中下旬在培养皿中观察到分化成型的纺锤状马尾松体细胞胚,并在本实验中出现大量"爆发"成熟体胚的现象,这些体细胞胚能在无激素培养基上正常萌发。但在壮苗和移栽成活中还未获成功。

关键词：马尾松幼胚体细胞胚胎发生体胚萌发

来源： cnki会议评论

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