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遗传 2009年第5期31卷 540-545页

作者：张蕾齐力旺韩素英中国林业科学研究院林业研究所细胞生物学实验室北京100091 国家知识产权局专利审查协作中心北京100193 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所北京100091

为研究落叶松体细胞胚胎发生的分子机理,文章以日本落叶松×华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y35体细胞胚成熟阶段培养物的cDNA为实验组,继代培养阶段胚性愈伤组织的cDNA为对照组,利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybrid... 详细信息

为研究落叶松体细胞胚胎发生的分子机理,文章以日本落叶松×华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y35体细胞胚成熟阶段培养物的cDNA为实验组,继代培养阶段胚性愈伤组织的cDNA为对照组,利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)构建了体细胞胚成熟阶段的差异表达基因文库。随机选取800个阳性克隆进行测序,共获得468个UniGenes,共将其分为19类,功能分析结果表明:这些UniGenes可能参与代谢、转录、信号转导、转运、细胞生长分裂、细胞结构、细胞命运、蛋白质合成与降解、防御等与个体发育密切相关的生物学过程。对部分ESTs的表达谱进行分析,结果表明这些ESTs均在落叶松体细胞胚胎发生的不同阶段特异表达。

关键词：落叶松体细胞胚成熟差异表达基因抑制性消减杂交

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渗透剂对白刺花体细胞胚成熟及萌发的影响

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广西植物 2019年第8期39卷 1107-1114页

作者：吴丽芳魏晓梅曲靖师范学院生物资源与食品工程学院云南高原生物资源保护与利用研究中心

该研究以蔗糖、麦芽糖、山梨醇及PEG(6000)为渗透剂,探讨了不同渗透剂对白刺花体细胞胚发育、胚成熟及萌发的影响。结果表明:白刺花下胚轴形成的胚性愈伤组织接种至MS+2,4-D 0.2 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+TDZ 1.0 m... 详细信息

该研究以蔗糖、麦芽糖、山梨醇及PEG(6000)为渗透剂,探讨了不同渗透剂对白刺花体细胞胚发育、胚成熟及萌发的影响。结果表明:白刺花下胚轴形成的胚性愈伤组织接种至MS+2,4-D 0.2 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+TDZ 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L-1+谷氨酰胺100 mg·L^-1+植物凝胶3 g·L-1的培养基上,体细胞胚发生率高达66.21%,总胚数为79个;7%蔗糖可使体细胞胚成熟率高达64.36%,同时也可提高多子叶畸形胚形成;2%麦芽糖+2%山梨醇+4%蔗糖组合使体细胞胚成熟率最高达88.89%,畸形胚比例最低;30 g·L-1 PEG培养时,体细胞成熟率最高,为82.35%;鱼雷期的体细胞胚最合适转接,可使体胚萌发率达90.58%,复合糖上培养得到的成熟体细胞胚生根率最高,为87.47%。这为实现白刺花体细胞胚育苗奠定了理论基础,并提供了可行的方案。

关键词：白刺花渗透剂体细胞胚体细胞胚成熟体细胞胚萌发

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天山云杉体细胞胚成熟与萌发培养的技术研究

天山云杉体细胞胚成熟与萌发培养的技术研究

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作者：依巴代提·木合旦尔新疆师范大学

学位级别：硕士

天山云杉体细胞胚成熟与萌发培养的技术研究,为实现云杉属树种的体细胞胚大规模繁殖及工厂化生产提供实验依据和理论基础。以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导的14个株系中,挑选体细胞胚发生数量较好的4个株系(T6,T36,T43,T48)为试验材... 详细信息

天山云杉体细胞胚成熟与萌发培养的技术研究,为实现云杉属树种的体细胞胚大规模繁殖及工厂化生产提供实验依据和理论基础。以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导的14个株系中,挑选体细胞胚发生数量较好的4个株系(T6,T36,T43,T48)为试验材料,4种不同成熟培养基(BM4、MSG、1/2BLG+3%蔗糖和1/2BLG+3%麦芽糖)、不同接种量(100、150、200 mg的胚性愈伤组织)、不同浓度的(1.9、3.8、7.6、19、38μmol·L)ABA(脱落酸)与类似ABA等因素为体细胞胚成熟的培养条件,以及对体细胞胚、裸子合子胚和种子的幼苗形态特征的比较,筛选出最佳的天山云杉体细胞胚成熟与萌发条件。主要结果如下:1)天山云杉14个株系诱导体细胞胚结果表明,不同株系在同一成熟培养基上成熟体细胞胚的数量存在差异;其中4个株系及其接种量对体细胞胚形成数量影响的结果表明,不同株系及其接种量对体细胞胚成熟数量有一定的影响,形成的成熟体细胞胚数量也存在差异,当接种量为100 mg时,T36株系的体细胞胚成熟数量最高,为3470±546个,显著高于其他接种量和株系(P成熟培养基上,均形成了体细胞胚,在1/2BLG+3%麦芽糖培养基上,形成的体细胞胚数量高于其他培养基,分别为2044个(T6株系)和2282个(T36株系),且与其他培养基差异显著(P体细胞胚成熟数量的影响无显著差异(P>0.05),当ABA浓度为1.98μmol·L时,其体细胞胚成熟的平均数量为2850913个,其中以ABA的浓度为7.6μmol·L时,处理效果相当较好,获得的正常体细胞胚平均数量为2913个,高于其他处理。4)不同浓度ABA与三种类似ABA进行体细胞胚成熟的对比研究,结果表明,不同浓度的(A、B、C)三种类似ABA对体细胞胚成熟数量的影响均无显著差异(P>0.05),(B)类似ABA的体细胞胚成熟的平均数量高于对照ABA。说明(B)类似ABA可以替代ABA。5)将不同浓度ABA与三种类似ABA对体细胞胚成熟数量的相关性分析,结果表明,不同浓度ABA与三种类似ABA影响下所获得的成熟体细胞胚数量之间显著相关关系。6)将体细胞胚、裸子合子胚和成熟种子萌发的小植株进行对比,结果表明,种子幼苗的发育相对快,比体细胞胚和裸子合子胚幼苗更具生长优势。裸子合子胚的幼苗高度(根、颈部、叶)高于体细胞胚,但之间无显著差异(P>0.05)。体细胞胚与裸子合子胚子叶的平均数量一致,两者间无显著差异(P>0.05),多数幼苗子叶数量为7个。综上所述,天山云杉体细胞胚成熟培养中,T36(株系)胚性愈伤组织的接种量为100 mg,添加7.6μmol·L的ABA及75%PEG4000、3%麦芽糖,并添加750 mg·L的L-谷氨酰胺及50 mg·L11 L-天冬酰胺的1/2BLG培养基是体细胞胚成熟培养的最佳成熟培养基。ABA与三种类似ABA对比研究中,由于(B)类似ABA对体细胞胚成熟数量高于对照ABA,所以可以替代ABA。天山云杉体细胞胚的萌发培养中,无添加任何植物生长调节剂,含有铁盐、有机成分、蔗糖、7.5%PEG4000、活性炭和L-谷氨酰胺组成的BMG-2培养基是体细胞胚萌发培养的最佳萌发培养基。体细胞胚的再生小植株与裸子合子胚的小植株在形态上相近一致。

关键词：天山云杉体细胞胚体细胞胚成熟体细胞胚萌发培养基

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