检索结果-南通市图书馆

中国生物制品学杂志 2023年第6期36卷 687-692,699页

作者：车耀健胡妍朱艳阳胡莉福建医科大学免疫治疗研究院福建福州350108

目的制备同时靶向胞外5'-核苷酸酶(cluster of differentiation 73,CD73)与程序性细胞死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)的双特异性抗体,并对其体外结合能力和杀伤能力进行评价。方法采用基因工程方法,将PD-L1单链抗体(s... 详细信息

目的制备同时靶向胞外5'-核苷酸酶(cluster of differentiation 73,CD73)与程序性细胞死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)的双特异性抗体,并对其体外结合能力和杀伤能力进行评价。方法采用基因工程方法,将PD-L1单链抗体(single-chain fragment variable,scFv)插入至CD73单抗铰链区中,构建抗CD73/PD-L1双特异性抗体(BS-21),通过CHO GS表达系统进行筛选,获得高表达量细胞株,经Protein A及分子筛纯化后,采用分子排阻高效液相色谱法(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测抗体纯度;流式细胞术检测抗体体外结合能力;通过外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外杀伤人肺癌细胞Calu 1检测抗体体外杀伤能力。结果经加压筛选获得了高产的细胞株;经纯化获得纯度为99.6%的双特异性抗体BS-21,该抗体能同时结合CD73和PD-L1分子;与anti CD73和anti PD-L1组相比,BS-21组显著提高免疫细胞对Calu 1肿瘤细胞的杀伤率(F均为30.36,P均<0.001)。结论双特异性抗体BS-21能同时降低CD73和PD-L1对免疫细胞的免疫抑制作用,具有较好的抗肿瘤功能。

关键词：肿瘤微环境双特异性抗体 5'-核苷酸酶程序性细胞死亡配体1 体外结合能力体外杀伤能力

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