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双氢青蒿素与雷公藤甲素对神经胶质瘤细胞的抑制作用

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第9期35卷 1252-1257页

作者：叶富跃郑传宜马春阳王子珍陈政纲吴然杨堃海南医学院附属医院神经外科海口570101

目的探讨两种天然药物双氢青蒿素(DHA)与雷公藤甲素(TP)单独及联合用药对神经胶质瘤细胞体外抑制和体内治疗的作用。方法 CCK-8法检测DHA与TP单独及联合用药对神经胶质瘤细胞活性的抑制作用。Hochest 33258染色观察给药后细胞核的形态变... 详细信息

目的探讨两种天然药物双氢青蒿素(DHA)与雷公藤甲素(TP)单独及联合用药对神经胶质瘤细胞体外抑制和体内治疗的作用。方法 CCK-8法检测DHA与TP单独及联合用药对神经胶质瘤细胞活性的抑制作用。Hochest 33258染色观察给药后细胞核的形态变化,采用Rhodamine123和PI染色技术在流式细胞仪下分别检测细胞线粒体膜电位和细胞周期的情况。建立神经胶质瘤小鼠移植瘤模型,给药后分别监测小鼠体质量以及肿瘤体积大小并作统计学分析。苏木精-伊红(H-E)染色主要脏器的病理切片,观察药物的在体毒性。结果 12μg/m L的DHA与TP单独及联合用药处理神经胶质瘤C6和U87细胞48 h可明显抑制细胞的活性,抑制率分别达到85%和80%。DHA与TP单独及联合用药组分别都引起细胞核固缩,细胞线粒体膜电位下降明显,联合用药组的细胞线粒体膜电位的下降明显高于单独用药组(P治疗效果也非常显著,为临床使用天然药物治疗神经胶质瘤提供一个新的方法和思路。

关键词：双氢青蒿素雷公藤甲素联合用药神经胶质瘤体内治疗凋亡

转染外源性p16基因对大鼠恶性胶质瘤的生长抑制作用

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基础医学与临床 2003年第1期23卷 63-67页

作者：焦保华浦佩玉吴立华河北医科大学第二医院神经外科石家庄050000 天津医科大学总医院神经外科天津300052

探讨p16基因在体内对恶性胶质瘤的生长抑制作用。将外源性p16基因导入C6细胞内 ,应用立体定向技术将C6细胞种植于SD大鼠颅内尾状核头部 ,用核磁共振 (MR)扫描技术 ,动态观察颅内肿瘤生长情况。并通过免疫组化、原位杂交和细胞凋亡检测... 详细信息

探讨p16基因在体内对恶性胶质瘤的生长抑制作用。将外源性p16基因导入C6细胞内 ,应用立体定向技术将C6细胞种植于SD大鼠颅内尾状核头部 ,用核磁共振 (MR)扫描技术 ,动态观察颅内肿瘤生长情况。并通过免疫组化、原位杂交和细胞凋亡检测肿瘤细胞的增殖活性。结果显示 ,转染组和治疗组大鼠生存期较对照组明显延长。治疗组肿瘤随时间的延长逐渐缩小。免疫组化显示转染组和治疗组p16蛋白表达明显增强。原位杂交和细胞凋亡检测表明 ,转染组和治疗组大鼠肿瘤细胞增殖活性降低。本实验表明 ,p16基因在体内有抑制恶性胶质瘤生长的作用 ;瘤体内注入p16cDNA质粒脂质体复合物 ,可使肿瘤生长受到明显抑制。

关键词：外源性p16基因脑胶质瘤体内治疗

Ni3C和Fe5C2纳米粒子在体内和体外的热疗

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Ni3C和Fe5C2纳米粒子在体内和体外的热疗

作者：刘伟上海师范大学

学位级别：硕士

癌症也叫恶性肿瘤,破坏组织器官的结构和功能,已经成为目前引起人类死亡最主要的原因之一,目前治疗癌症的主要方式是化疗和放疗,但是这两种方法对正常组织的副作用较大,因此需要研究新的治疗方法来对抗癌症。肿瘤热疗是利用热的生物效... 详细信息

癌症也叫恶性肿瘤,破坏组织器官的结构和功能,已经成为目前引起人类死亡最主要的原因之一,目前治疗癌症的主要方式是化疗和放疗,但是这两种方法对正常组织的副作用较大,因此需要研究新的治疗方法来对抗癌症。肿瘤热疗是利用热的生物效应来治疗癌症的方法,1985年热疗被美国FDA (Food and Drug Administration)认证为继手术、放疗、化疗、生物治疗后的第五大治疗手段。发展新型的热疗材料,成为了当今临床治疗癌症的重要任务。本文致力于研究新型且具有良好生物相容性纳米材料作为热疗试剂,通过探索将Ni3C和Fe5C2作为热疗材料,并取得了一些有意义的成果。第一部分以乙酰丙酮铁和乙酰丙酮镍为前驱体,以油胺和十八烯为溶剂,采用热分解方法得到粒径为50nm的油溶性Ni3C纳米材料,通过配体交换的方法将单羧酸聚乙二醇交换掉覆盖在Ni3C表面的油胺分子。水溶性的Ni3C在400-1000nm波长范围内有广泛的吸收,并且用808nm激光,功率密度为0.5W/cm2光照强度下有很好的升温效果。体内和体外的毒性试验证明Ni3C纳米粒子具有良好的生物相容性,HeLa细胞实验和小鼠的肿瘤治疗实验证明Ni3C是种潜在的光热材料。第二部分在借鉴第一部分的工作基础上,将碳化物Fc5C2发展作为热疗材料,通过高温热解法制备出了粒径为13nm的Fe5C2纳米粒子,用磷脂将油溶性材料变成水溶性,紫外吸收光谱看出Fe5C2纳米粒子在400-1000nm范围内有广泛的吸收,说明其可以作为光热材料。用808nm,功率密度为1.5W/cm2的激光照射,浓度为0.5mg/mL时,温度可以升高20.2℃。Fe5C2纳米粒子溶液在激光照射下,紫外吸收和形貌都没有发生改变,表现出优异的稳定性,为治疗实验奠定了基础。Fe5C2的磁饱和强度为33.1Am2/Kg,可以作为T2造影剂。在磁场强度为60.6KA/m(200KHz)下,当浓度为2mg/mL时,溶液温度上升19℃,说明Fe5C2同时是一种潜在的磁热疗材料。小鼠体内的治疗实验效果说明Fe5C2是一种较好的具备光热和磁热双功能的材料。

关键词：纳米材料热疗金属碳化物体内治疗体外治疗

广谱抗菌肽RW-BP100-4D的杀菌活性及安全性评价研究

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广谱抗菌肽RW-BP100-4D的杀菌活性及安全性评价研究

作者：童星琦江苏大学

学位级别：硕士

不断增长的细菌耐药性成为全球关注的焦点,它不仅影响人和动物的临床治疗、还给食品安全、人民生命健康和公共卫生安全造成巨大威胁。然而与耐药性快速增长形成鲜明对比的是,新型抗生素和药物研发速度严重滞后。抗菌肽由于其多靶点和非... 详细信息

不断增长的细菌耐药性成为全球关注的焦点,它不仅影响人和动物的临床治疗、还给食品安全、人民生命健康和公共卫生安全造成巨大威胁。然而与耐药性快速增长形成鲜明对比的是,新型抗生素和药物研发速度严重滞后。抗菌肽由于其多靶点和非特异性杀菌作用、以及不易引起细菌耐药产生的特点,被认为是目前最有前途的抗生素替代品。本研究针对典型的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的致病菌,在抗菌肽数据库中的抗菌肽进行筛选和改造,获得了一种具有广谱抗菌活性和低毒性的抗菌肽RW-BP100-4D,并通过实验评估了抗菌肽RW-BP100-4D的抗菌效果以及安全性。本研究从抗菌肽数据库(DBAASP)中筛选出21条抗菌效果较好的抗菌肽。通过微量肉汤稀释法药敏实验测试以上抗菌肽对典型革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌ATCC29213和典型革兰氏阴性细菌大肠杆菌ATCC25922的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,抗菌肽RW-BP100对金黄色葡萄球菌ATCC29213和大肠杆菌ATCC25922的MIC最低(MIC=12μg/m L)。为了获得抑菌活性更好的抗菌肽,对RW-BP100进行改造了得到一系列衍生物,其中RW-BP100-4D的抗菌效果最好,其对金黄色葡萄球菌ATCC29213和大肠杆菌ATCC25922的MIC分别为3μg/m L和6μg/m L,杀菌效果良好。针对抗菌肽RW-BP100-4D开展了其杀菌效果实验研究。通过微量肉汤稀释法药敏实验测试了RW-BP100-4D对多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性菌和真菌的杀菌效果,测定了其MIC和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明对靶细菌的MIC范围为3-12μg/m L,MBC范围为6-50μg/m L,说明抗菌肽RW-BP100-4D为高活性广谱杀菌作用的抗菌肽。通过体外细菌生物膜实验研究了抗菌肽RW-BP100-4D对金黄色葡萄球菌ATCC29213生物膜的杀菌活性,结果说明抗菌肽RW-BP100-4D不仅能较好地抑制金黄色葡萄球菌ATCC29213形成生物膜,还能有效清除金黄色葡萄球菌ATCC29213形成的成熟生物膜,其抗生物膜活性与应用浓度呈正相关。我们还进一步考察了抗菌肽RW-BP100-4D对条件性胞内菌的杀菌活性,抗菌肽RW-BP100-4D可以有效地杀灭进入奶牛乳腺上皮细胞MAC-T的金黄色葡萄球菌ATCC29213和沙门氏菌ATCC13076,杀菌率超过99.9%。同时,我们考察了抗菌肽RW-BP100-4D应用的安全性。溶血实验和细胞毒性实验表明当抗菌肽浓度≤100μg/m L时,其对绵羊红细胞的溶血率治疗效果,结果表明,在小鼠皮肤感染模型中,抗菌肽RW-BP100-4D可杀灭99.99%的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株,杀菌效率显著高于抗生素氨苄西林。而在小鼠菌血症模型中,发现抗菌肽RW-BP100-4D不能有效杀灭小鼠大部分器官的细菌,说明其对小鼠系统感染的治疗效果不佳。综上所述,本研究筛选改造出一条具有广谱抗菌活性的短肽RW-BP100-4D。RW-BP100-4D分子量小,细胞毒性较低,基本不具溶血性,因此安全性高;RW-BP100-4D可有效抑制食源性病原菌、腐败菌在食品表面的污染,对小鼠皮肤感染的MRSA菌株具有良好的杀灭作用,因此在针对以上病原菌引起的食品污染或感染防控中具有良好的应用潜力。

关键词：抗菌肽杀菌活性食品灭菌胞内杀菌体内治疗

肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒用于乳腺癌多模态多功能精准诊疗的实验研究

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肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒用于乳腺癌多模态多功能精准诊疗的...

作者：罗远利重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒的制备和表征的实验研究目的制备肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd),检测纳米粒的基本表征如:粒径、电位、表面形态、包封率等,并检测其体内外靶向性和安全性等。方法1.纳米粒的... 详细信息

第一部分肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒的制备和表征的实验研究目的制备肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd),检测纳米粒的基本表征如:粒径、电位、表面形态、包封率等,并检测其体内外靶向性和安全性等。方法1.纳米粒的制备及表征:采用薄膜水化法、声振法制备肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒,即PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)。用Malvern粒径电位测量仪检测粒径和电位;透射电子显微镜观察其形态;紫外分光光度计检测包封率。2.体内外靶向性1)体外靶向性:分别用流式细胞仪及激光共聚焦显微镜观察PFP@LIP-H(Gd)和PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)对MDA-MB-231细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的靶向性。2)体内靶向性:建立MDA-MB-231乳腺癌荷瘤模型,经尾静脉注射Di I标记的非靶向组(PFP@LIP-H(Gd))和靶向组(PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd))纳米粒,以注射生理盐水为对照组,不同时间(1,2,4,6,12,24h)后处死裸鼠,剥离肿瘤组织制成冰冻切片,用荧光显微镜观察两种纳米粒在肿瘤组织的分布情况。3.体内外安全性1)体外安全性:将不同浓度的PFP@LIP、PFP@LIP-H(Gd)、PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)与MDA-MB-231细胞共孵育24h后,用CCK-8法评价各组纳米粒对MDA-MB-231细胞的细胞毒性。2)体内安全性:将Balb/c小鼠随机分为对照组和实验组(n=3)。对照组为注射生理盐水后14d处死小鼠,实验组为注射纳米粒后(第1,5,7,14d)处死小鼠,收集小鼠血液样本,将收集的血液样本进行血常规和血生化分析。结果1.纳米粒表征:透射电子显微镜可见PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)为球形;Malvern粒径电位测量仪粒径为(260.93±5.28)nm,电位为(-15.7±2.646)m V;紫外分光光度计测得HMME-Gd包封率约为93.33%。2.体内外靶向性1)体外靶向性:激光共聚焦显微镜显示,Di I标记的PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)可靶向聚集到MDA-MB-231细胞膜周围,且随着时间的延长进入到细胞质内越多,而正常的HUVEC细胞周围未见明显的聚集;同时,由于没有t Ly P-1的靶向和穿膜作用,Di I标记的PFP@LIP-H(Gd)在MDA-MB-231细胞周围也未见明显的聚集;流式细胞仪检测结果与激光共聚焦显微镜保持一致。2)体内靶向性:荧光显微镜显示,靶向组注射1h后可在肿瘤区域观测到大量红色荧光富集,随着时间的延长,红色荧光越多(P0.05)。3.体内外安全性1)体外安全性:CCK-8法显示不同浓度的纳米粒对MDA-MB-231细胞均无明显细胞毒性(P体内安全性:小鼠的血液检测指标显示各实验组与对照组相比未见明显异常(P>0.05)。结论成功制备肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒,即PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd),其大小均一、分散性较好,包封率较高,对MDA-MB-231细胞和MDA-MB-231乳腺癌荷瘤鼠具有明显的靶向效果,体内外安全性好。第二部分肽功能化载HMME-Gd相变纳米粒多模态成像的实验研究目的观察该纳米粒在体内外的超声成像、光声成像、荧光成像及MRI成像效果。方法1.体内外超声成像1)体外超声成像:(1)声致相变:将稀释后的PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)用LIFU(1.6W/cm2,脉冲模式)辐照不同时间(辐照前,1,2,3,4min),用光学显微镜观察纳米粒相变情况;(2)声致相变增强超声成像:将PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)稀释数倍后放进凝胶模型内,采用不同功率LIFU(0.8,1.6,3.2W/cm2;脉冲模式)辐照不同时间(辐照前,1,2,3,4min)为实验组,以不含PFP的t Ly P-1-LIP-H(Gd)经LIFU(1.6W/cm2,脉冲模式)辐照不同时间(辐照前,1,2,3,4min)为对照组,超声诊断仪观察实验组和对照组的超声模式(US-mode)和造影模式(CEUS-mode)显影情况,用DFY定量分析诊断仪测量各组超声图像的灰度值。2)体内超声成像:建立MDA-MB-231移植瘤模型,随机分为两组:对照组(PFP@LIP-H(Gd))和实验组(PFP@t Ly P-1-LIP-H(Gd)),用超声诊断仪采集经尾静脉注射纳米粒前(Pre),注射2h后(2h)及注射2h用LIFU(1.6W/cm2,2min,脉冲模式)辐照后(2h+LIFU)

关键词： HMME-Gd tLyP-1 靶向性安全性表征纳米粒超声成像光声成像荧光成像 MRI成像 ROS 声动力空化效应体外治疗体内治疗

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干细胞移植方法注释医学治疗新概念

中国新技术新产品 2004年第3期 56-57页

作者：张芳

新技术往往引发医学界的重大突破.不治之症成为可治之病.丢弃之物转而变废为宝。国外研究人员发现.以往人们常常废弃的脐带血,有着惊人的医学功用。新技术往往引发医学界的重大突破.不治之症成为可治之病.丢弃之物转而变废为宝。国外研... 详细信息

新技术往往引发医学界的重大突破.不治之症成为可治之病.丢弃之物转而变废为宝。国外研究人员发现.以往人们常常废弃的脐带血,有着惊人的医学功用。新技术往往引发医学界的重大突破.不治之症成为可治之病.丢弃之物转而变废为宝。国外研究人员发现.以往人们常常废弃的脐带血,有着惊人的医学功用。将其中的干细胞移植入人体内治疗一些疾病.能达到比骨髓移植更好的疗效。

关键词：脐带血干细胞干细胞移植脐带血库新概念治疗法医学新技术重大突破体内治疗骨髓移植

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移植——治疗糖尿病的新方法

求医问药 2006年第1期 5-6页

作者：李长玉解放军404医院

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新型超声造影剂成分临床诊疗应用探究

新型超声造影剂成分临床诊疗应用探究

转染外源性p16基因对恶性胶质瘤生长抑制作用的动物体内实验研究

中国超声医学工程学会成立四十周年暨第十四次全国超声医学学术大会

作者：王泰霞上海市第十人民医院超声医学科

研究目的:普鲁士蓝纳米颗粒(PBNP)在生物医学成像方面上兼具光声成像和磁共振成像性能。PBNP在超声作用下能生成氧气泡可改变氧化应激组织的声阻抗,已被探究可以作为超声造影剂来增强超声成像效果。同时,纳米颗粒表面Fe3+中心易于与H2O... 详细信息

研究目的:普鲁士蓝纳米颗粒(PBNP)在生物医学成像方面上兼具光声成像和磁共振成像性能。PBNP在超声作用下能生成氧气泡可改变氧化应激组织的声阻抗,已被探究可以作为超声造影剂来增强超声成像效果。同时,纳米颗粒表面Fe3+中心易于与H2O进行交换及具有顺磁性的氧气泡能够缩短T1弛豫时间,使PBNP还能作为T1磁共振造影剂,在多模态疾病诊断方面具有巨大的应用优势。近年来发现的纳米酶活性,进一步促进了PBNP在抗炎、抗肿瘤及超声成像等方面的应用。

关键词：口含片临床诊疗体内治疗口腔黏膜炎应用探究

来源： cnki会议评论

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中国临床神经科学 2002年第4期10卷 338-341页

作者：焦保华浦佩玉吴立华河北医科大学第二医院神经外科 050000 天津医科大学总医院神经外科 300052

目的 :探讨p16基因在体内对恶性胶质瘤的生长抑制作用。方法 :将外源性p16基因导入C6 细胞内 ,应用立体定向技术将C6细胞种植于SD大鼠尾状核头部 ,用核磁共振 (MR)扫描技术 ,动态观察颅内肿瘤生长情况。并通过免疫组化、原位杂交和细胞... 详细信息

目的 :探讨p16基因在体内对恶性胶质瘤的生长抑制作用。方法 :将外源性p16基因导入C6 细胞内 ,应用立体定向技术将C6细胞种植于SD大鼠尾状核头部 ,用核磁共振 (MR)扫描技术 ,动态观察颅内肿瘤生长情况。并通过免疫组化、原位杂交和细胞凋亡检测肿瘤细胞的增殖活性。结果 :转染组和治疗组大鼠生存期较对照组明显延长。治疗组肿瘤随时间的延长逐渐缩小。免疫组化显示转染组和治疗组P16蛋白表达明显增强。原位杂交和细胞凋亡检测表明 ,转染组和治疗组大鼠肿瘤细胞增殖活性降低。结论 :p16基因在体内有抑制恶性胶质瘤生长的作用 ;瘤体内注入p16cDNA质粒脂质体复合物 ,可使肿瘤生长受到明显抑制。

关键词：外源性p16基因脑胶质瘤体内治疗