检索结果-南通市图书馆

中国生物工程杂志 2016年第10期36卷 35-44页

作者：公颜慧马三梅张云王永飞胡云峰暨南大学生物工程学系广州510632 中国科学院南海海洋研究所中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室广州510301 中国科学院南海海洋研究所广东省海洋药物重点实验室广州510301

从假单胞菌Pseudonocardia antitumoralis HUP007基因组中克隆了一个1 041bp的酯酶基因Est P8,编码的蛋白具有377个氨基酸残基。在*** BL21(DE3)中实现酯酶Est P8的高效异源表达和纯化。Est P8为脂肪酶家族Ⅳ中的一员,具有HGGG保守序列... 详细信息

从假单胞菌Pseudonocardia antitumoralis HUP007基因组中克隆了一个1 041bp的酯酶基因Est P8,编码的蛋白具有377个氨基酸残基。在*** BL21(DE3)中实现酯酶Est P8的高效异源表达和纯化。Est P8为脂肪酶家族Ⅳ中的一员,具有HGGG保守序列。Est P8最适底物为对硝基苯酚乙酸酯(p-NPO),最适温度和p H分别为50℃和8.0。Est P8催化p-NPO水解反应的活性、Vmax和Km分别达到105.19U/mg、89.4μM/min、1.144m M。Est P8在p H7.0~8.0范围内具有良好的p H稳定性;在4℃时,酯酶相对活力为41.78%,在10~40℃内具有很好温度稳定性。Est P8对大部分金属离子有很好的耐受性,低浓度的Cu^(2+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)对该酶的活性有激活作用。辛烷、庚烷、甲苯、丙酮、DMF等有机溶剂对Est P8的活性同样具有激活作用。酯酶Est P8还可以通过水解拆分高效地制备手性(R)-1-苯基乙醇;添加有机溶剂可以很好地促进该酯酶的光学选择性和产率,在共溶剂甲苯的存在下,所制备的(R)-1-苯基乙醇的e.e.和产率可达91%和18%;在共溶剂DMSO的存在下,所制备的(S)-乙酸苏合香酯的e.e.和产率可达98%和60%。酯酶Est P8在手性生物催化等诸多工业领域有很好的应用潜力。

关键词：低温酯酶金属离子耐受性有机溶剂耐受性手性拆分高对映选择性

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微生物酯酶的开发及其在食品工业中的应用现状

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食品与发酵工业 2019年第17期45卷 272-277页

作者：毕文慧桂伦姚健山东农业工程学院食品科学与工程学院山东济南250100 江西省农业科学院农业应用微生物研究所江西南昌330200

微生物酯酶是一种在食品领域应用广泛的工业酶,开发和应用微生物酯酶资源对食品工业发展具有重要意义。借助分离纯化、宏基因组学、宏转录组学等技术手段开发具有化学试剂抗性、热稳定性或低温耐受性的高温酯酶和低温酯酶既丰富了酶学... 详细信息

微生物酯酶是一种在食品领域应用广泛的工业酶,开发和应用微生物酯酶资源对食品工业发展具有重要意义。借助分离纯化、宏基因组学、宏转录组学等技术手段开发具有化学试剂抗性、热稳定性或低温耐受性的高温酯酶和低温酯酶既丰富了酶学知识又扩展了潜在工业酯酶种类;将各类酯酶用于食品加工及食品农残检测,能够有效提高生产效率、产品质量,保障食品安全。该文综述了新型微生物酯酶的开发及其在食品加工、农残检测中的应用研究进展,以期为酯酶的开发及其工业化应用提供参考。

关键词：高温酯酶低温酯酶宏组学食品加工农残检测

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深海沉积物微生物元基因组文库来源的新的酯酶基因的克隆、表达及酶学性质

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微生物学报 2010年第7期50卷 891-896页

作者：徐士庆胡永飞袁爱花朱宝利中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

【目的】从深海沉积物微生物元基因组文库中克隆新的酯酶基因,并进行酶学性质研究。【方法】利用含有三丁酸甘油酯的酯酶选择性筛选培养基,从深海沉积物微生物元基因组文库中筛选得到酯酶阳性Fosmid克隆。对筛选得到的fosmid FL10进行... 详细信息

【目的】从深海沉积物微生物元基因组文库中克隆新的酯酶基因,并进行酶学性质研究。【方法】利用含有三丁酸甘油酯的酯酶选择性筛选培养基,从深海沉积物微生物元基因组文库中筛选得到酯酶阳性Fosmid克隆。对筛选得到的fosmid FL10进行部分酶切构建亚克隆文库,筛选得到酯酶阳性亚克隆pFLS10。PCR扩增目的片段后与pET28a连接构建酯酶基因原核表达质粒,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21。纯化表达产物并对其进行活性测定及酶学性质研究。【结果】序列分析显示该pFLS10亚克隆质粒含有一段924bp的ORF(Open Reading Frame),与一海洋元基因组文库中筛选出的酯酶ADA70030序列一致性为71%。该酶为一新的低温酯酶,对C4底物(对硝基苯丁酸酯)水解能力最强。该酶最适作用温度为20℃,最适作用pH为7.5,20℃时较为稳定,pH8-10的范围内有良好的pH稳定性,K+、Mg2+对该酶具有一定的激活作用,Mn2+等对其具有不同程度的抑制作用。【结论】应用元基因组技术筛选到了新的酯酶基因fls10并进行了克隆表达,该酶在低温及碱性条件下较为稳定且活力较高,对于工业化生产具有一定的应用潜力。关键词:深海沉积物;元基因组文库;低温酯酶;

关键词：深海沉积物元基因组文库低温酯酶酶学特征

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