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细胞骨架在皮肤低温损伤中的重要作用及低温保护剂的相关研究

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细胞骨架在皮肤低温损伤中的重要作用及低温保护剂的相关研究

作者：蔡宏中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

研究背景及目的:低温保存是低温生物学研究中的一项重要技术,近年来的迅速发展为临床医学带来了许多突破性的进展,现在速冻玻璃化已被认为是大多数生物组织低温下保存的最佳方法,但是如何进一步提高储存皮肤的活力,却一直没有得到非常... 详细信息

研究背景及目的:低温保存是低温生物学研究中的一项重要技术,近年来的迅速发展为临床医学带来了许多突破性的进展,现在速冻玻璃化已被认为是大多数生物组织低温下保存的最佳方法,但是如何进一步提高储存皮肤的活力,却一直没有得到非常满意的答案,其关键在于解决低温的损伤作用。已有学者认为组织低温保存后产生的效应包括细胞间和细胞质内部的改变,而且这些转变均可被细胞骨架系统所介导。但是,对于皮肤细胞骨架蛋白在低温冷冻损伤中的一些基础性研究和低温干预剂的相关保护性研究尚少。众所周知,皮肤的功能高度依赖于表皮的细胞骨架结构,任何损坏或使其功能降低的生物学行为将导致皮肤活力下降,在低温医学中充分认识和研究表皮细胞骨架结构的作用机制是非常关键的。本研究的目的旨在研究皮肤低温储存后表皮层细胞骨架蛋白的变化,从而分析其低温生物学效应,并将几种低温保护剂(Cryoprotectant, CPA)进行比较,以期为探索低温组织保存液的有效成分提供科学依据。方法:在本论文的第一部分实验中,将皮肤组织采用不同的温度组(4℃组、-20℃组、-80℃组和-196℃组)进行保存,并在保存7天、14天、21天、28天后进行实验观察,设新鲜皮肤为对照组。首先通过H.E.染色和免疫组织化学染色两种病理学方法在光镜观察细胞形态和蛋白的改变,并用图像分析仪测定表皮组织中的含量变化。研究的骨架蛋白包括α-微管蛋白(α-tubulin)、β-微管蛋白(β-tubulin)、β-肌动蛋白(β-actin)、高分子量角蛋白(cytoskeratin)。其次,采用透射电镜观察微丝、微管和中间丝的变化并进行图象分析。最后我们进一步采用RT-PCR和免疫印记法(Western-blot)对不同方法保存后的β-actin含量进行了深入的研究。力求从细胞骨架系统的重要组成部分中寻找到低温损伤的位点,从而寻觅更多关于抗低温损伤的机理。

关键词：低温低温保存皮肤细胞骨架低温损伤低温保护剂海藻糖

真鲷（Pagrosomus major）精液超低温保存及其低温损伤研究

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真鲷（Pagrosomus major）精液超低温保存及其低温损伤研究

作者：刘清华中国海洋大学

学位级别：硕士

鱼类精液的超低温保存在鱼类养殖、遗传育种以及种质资源保存都具有重要的意义。鱼类精液的超低温保存可以使种质的长距离运输得以实现,同时有利于鱼类的杂交、选育、优良的形状的获得以及基因多样性的保护,而且鱼类精液冷冻库的建立可... 详细信息

鱼类精液的超低温保存在鱼类养殖、遗传育种以及种质资源保存都具有重要的意义。鱼类精液的超低温保存可以使种质的长距离运输得以实现,同时有利于鱼类的杂交、选育、优良的形状的获得以及基因多样性的保护,而且鱼类精液冷冻库的建立可以为水产养殖业和试验生物学研究长期稳定地提供材料。自从50年前Blaxter成功冷冻保存大西洋鲱鱼精巢以来,鱼类精液的超低温保存取得很大的进展。目前已经有200多种淡水鱼类的精液,40多种海水鱼类的精液成功的获得保存,然而对于所有的硬骨鱼类的精液的超低温保存还没有得到一个统一的方法,鱼类精液的超低温保存技术有待于进一步的发展。真鲷为我国、日本及韩国重要海水养殖鱼种,具有较高地经济价值,然而最近几年,由于过渡捕捞、海洋污染、以及栖息环境的改变导致真鲷资源量下降,因此,建立真鲷精液超低温保存的可靠方法对海水养殖业的发展以及生物多样性的保护具有重要意义。本文采用2-mL的冷存管和程序降温法超低温保存真鲷精液。共实验了六种稀释液(Cortland、Hank’s balanced salt solution、Modified Mounib’s medium、 Mounib’s medium、Mounib’s NaCl medium、Ringer),六种抗冻剂(二甲基亚砜、二甲基乙酰胺、丙二醇、乙二醇、甲醇、甘油),四种降温速率(10、20、30、40℃/min),和三种解冻温度(35、40、45℃)对真鲷精液超低温保存效果的影响。将超低温保存前后精子的活动率,受精率和孵化率的变化作为筛选真鲷精液超低温保存方法的指标。试验结果表明,采用Cortland作为稀释液,15%—20%二甲基亚砜,9%和12%乙二醇,20℃/min的降温速率对精液进行超低温保存,液氮保存1周后,40℃水浴解冻,获得理想的活动率(79.4±4.7 to 88.6±8.0%),受精率(89.6±2.9 to 95.6±1.9%)以及孵化率(85.3%±5.1%to 91.4±4.3%),

关键词：真鲷超低温保存超微结构低温损伤 CASA FCM 长期保存

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低温损伤细胞的机制研究进展

国际检验医学杂志 2012年第13期33卷 1618-1620页

作者：杨鹏飞刘宝林国家食品药品监督管理局医疗器械审评中心北京100020 上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093

低温医疗即利用低温治疗疾病。早在公元前2500年之前,埃及人就利用低温治疗头部的复杂骨折和胸部的炎性反应,也有记载曾利用冰治疗出血和浮肿。19世纪中期,英国医生Arnott首次利用温度为-24～-18℃的含有碎冰的盐水溶液治疗乳腺癌和宫颈... 详细信息

低温医疗即利用低温治疗疾病。早在公元前2500年之前,埃及人就利用低温治疗头部的复杂骨折和胸部的炎性反应,也有记载曾利用冰治疗出血和浮肿。19世纪中期,英国医生Arnott首次利用温度为-24～-18℃的含有碎冰的盐水溶液治疗乳腺癌和宫颈癌,这是组织冷冻技术在治疗疾病方面的最早尝试。

关键词：低温损伤细胞机制综述

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冬季运动中低温损伤的发生与处理

冰雪运动 2024年第5期46卷 1-9,16页

作者：刘诗杰瞿超艺赵杰修国家体育总局体育科学研究所北京100061 河北师范大学体育学院河北石家庄050024

我国现代冰雪运动起步较晚,人们普遍缺乏关于冬季运动低温损伤防治的知识。低温损伤常见于冬季户外运动项目,一般以预防为主,低温损伤如果得不到正确的现场处理,严重时可能危及生命。为此,根据不同冬季运动项目可能发生的低温损伤类型,... 详细信息

我国现代冰雪运动起步较晚,人们普遍缺乏关于冬季运动低温损伤防治的知识。低温损伤常见于冬季户外运动项目,一般以预防为主,低温损伤如果得不到正确的现场处理,严重时可能危及生命。为此,根据不同冬季运动项目可能发生的低温损伤类型,研究系统梳理了冻伤、非结冻性损伤、失温,以及冷休克、雪盲症、低温结合低氧损伤等其他风险症状,并提出相应的预防及现场处理原则。由于冬季运动低温损伤的预防和处理策略尚未形成共识,建议相关人员充分根据运动环境、专项特点、低温损伤分类等实际情况,选择适当的预防及处理措施;而关于冷习服训练、低温与缺氧交互效应等课题可以作为未来的研究方向。研究旨在为教练员、运动员、科研医务人员、赛事主办方和业余爱好者等提供全面的低温损伤预防与处理指南,保障人们更安全地参与冰雪运动。

关键词：冬季运动低温损伤医务监督

FLNG甲板上部天然气管线破断低温损伤后果研究

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中国海洋平台 2016年第4期31卷 37-44页

作者：赵保磊余建星刘源天津大学水利工程仿真与安全国家重点实验室天津300072 高新船舶与深海开发装备协同创新中心上海200240

为了研究浮式液化天然气(FLNG)生产储卸装置甲板上部区域天然气产品输送管线发生泄漏的低温损伤后果,建立了甲板上部区域的泄漏扩散模型,将泄漏分为了低温气态天然气泄漏和液态LNG泄漏两大类,运用计算流体力学(CFD)软件和API相关规范确... 详细信息

为了研究浮式液化天然气(FLNG)生产储卸装置甲板上部区域天然气产品输送管线发生泄漏的低温损伤后果,建立了甲板上部区域的泄漏扩散模型,将泄漏分为了低温气态天然气泄漏和液态LNG泄漏两大类,运用计算流体力学(CFD)软件和API相关规范确定了其泄漏扩散范围和低温区域。结果表明:当发生低温气态天然气泄漏时不会造成设备的低温损伤,但是时甲板人员有低温损伤风险;当发生液态LNG泄漏时,造成设备损坏和人员受伤。

关键词：浮式液化天然气生产储卸装置计算流体力学天然气泄漏低温损伤

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喜温作物的低温损伤及其抗冷性的研究进展

山东农业科学 2004年第2期36卷 74-79页

作者：刘鹏刘庆忠王勇李新华山东省果树研究所山东泰安271000 泰安市公路局山东泰安271000 莱芜市农业局山东莱芜271100

在我国北方农业生产中,农作物特别是一些热带或亚热带起源的喜温植物如玉米、水稻、棉花、甘薯、黄瓜、甜椒等经常发生冷害现象,出现苗弱、植株生长缓慢、叶片黄化萎焉、局部坏死、坐果率低等形态特征的变化,光合速率明显降低,导致产量... 详细信息

在我国北方农业生产中,农作物特别是一些热带或亚热带起源的喜温植物如玉米、水稻、棉花、甘薯、黄瓜、甜椒等经常发生冷害现象,出现苗弱、植株生长缓慢、叶片黄化萎焉、局部坏死、坐果率低等形态特征的变化,光合速率明显降低,导致产量降低和品质下降.

关键词：喜温作物低温损伤抗冷性自由基伤害学说膜脂过氧化膜脂相变理论类囊体膜低温光抑制脱落酸蛋白质

加强研究皮肤低温损伤机制以提高皮肤储存质量

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2023年第2期18卷 93-97页

作者：李东杰贾晓明解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部全军烧伤研究所北京100048 解放军总医院海南医院烧伤整形科三亚572013

异体皮是救治大面积深度烧伤患者首选的创面覆盖物,速冻玻璃化储存皮肤较好地保持了皮肤的活性,高质量的皮肤储存为烧伤外科临床救治提供了保障。皮肤组织库的发展、皮肤低温损伤机制和低温保护剂的研究进展,将使皮肤储存的规模和质量... 详细信息

异体皮是救治大面积深度烧伤患者首选的创面覆盖物,速冻玻璃化储存皮肤较好地保持了皮肤的活性,高质量的皮肤储存为烧伤外科临床救治提供了保障。皮肤组织库的发展、皮肤低温损伤机制和低温保护剂的研究进展,将使皮肤储存的规模和质量有进一步的提升。

关键词：烧伤异体皮皮肤储存低温损伤

内皮细胞的低温损伤及少腹逐瘀汤挥发油干预研究

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中医药信息 2009年第6期26卷 73-76页

作者：马宏跃唐于平段金廒刘立宿树兰朱维娜詹臻南京中医药大学江苏南京210046

目的：考察低温对内皮细胞的损伤作用及用于寒凝血瘀证的方剂少腹逐瘀汤（SFD）挥发油部位的干预效果。方法：低温损伤人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）6~24h后,MTT法检测细胞活力,ho-echst33342、碘化丙啶（PI）染色观察细胞形态变化;生... 详细信息

目的：考察低温对内皮细胞的损伤作用及用于寒凝血瘀证的方剂少腹逐瘀汤（SFD）挥发油部位的干预效果。方法：低温损伤人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）6~24h后,MTT法检测细胞活力,ho-echst33342、碘化丙啶（PI）染色观察细胞形态变化;生化测定细胞丙二醛（MDA）及胞内超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化。并在该模型中采用SFD及组方药材的挥发油部位进行干预。结果：低温损伤18h后与正常组比较,内皮细胞活力显著下降;荧光染色出现核固缩、碎裂等凋亡和坏死的形态变化;氧化损伤标志物MDA含量显著升高,但胞内SOD水平无显著差异。SFD总挥发油及川芎油、当归油及有效成分藁本内酯和桂皮醛,对低温造成细胞活力下降有显著保护作用。结论：持续低温可造成血管内皮细胞活力下降、凋亡和坏死,且伴有氧化损伤;少腹逐瘀汤及组方药材挥发油部位能够提高低温受损内皮细胞的活力,这种有益作用为其临床提供部分药理学依据。

关键词：低温损伤血管内皮细胞少腹逐瘀汤挥发油

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细胞深低温冷冻损伤机制探讨

山东医药 2010年第14期50卷 19-21页

作者：何波王增涛段永壮郝丽文沈芸朱庆棠刘小林中山大学附属第一医院广州510080 山东大学附属省立医院郑州大学第一附属医院

目的探讨深低温冷冻损伤导致细胞死亡的机制。方法用不同电解质及不同浓度的冷冻保护剂(DMSO)对人肝癌细胞株BEL-7402进行程序降温,至深低温后复苏。采用AnnexinV/PI荧光标记双染色、DNA-Prep stain荧光标记染色,流式细胞术分析冻存前... 详细信息

目的探讨深低温冷冻损伤导致细胞死亡的机制。方法用不同电解质及不同浓度的冷冻保护剂(DMSO)对人肝癌细胞株BEL-7402进行程序降温,至深低温后复苏。采用AnnexinV/PI荧光标记双染色、DNA-Prep stain荧光标记染色,流式细胞术分析冻存前后细胞凋亡、坏死、存活、细胞碎片及BEL-7402细胞周期变化。结果无冷冻保护剂时,冷冻后细胞坏死、碎片明显(P0.05);冷冻前后细胞周期变化不显著(P>0.05)。结论在冷冻过程中,胞内冰损伤和溶质损伤是导致细胞损伤的独立因素;前者引起细胞死亡的方式是坏死,后者(包括电解质与DMSO)是导致细胞凋亡。冷冻导致的细胞死亡无周期特异性。

关键词：低温损伤细胞凋亡细胞周期 BEL-7402