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被膜蛋白VP22抑制ZBP1介导的NLRP3炎症小体可促进伪狂犬病病毒感染

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中国兽医科学 2025年第2期 279-280页

作者：《中国兽医科学》编辑部刘星《中国兽医科学》编辑部

VP22是一种保守的被膜蛋白，广泛存在于伪狂犬病病毒（PRV）和HSV-1等α-疱疹病毒中。HSV-1的VP22是病毒的重要毒力因子，它通过调节病毒蛋白和宿主蛋白的亚细胞定位，增强病毒的神经毒性；HSV-1 VP22还能够抑制AIM2炎症小体的激活，进... 详细信息

VP22是一种保守的被膜蛋白，广泛存在于伪狂犬病病毒（PRV）和HSV-1等α-疱疹病毒中。HSV-1的VP22是病毒的重要毒力因子，它通过调节病毒蛋白和宿主蛋白的亚细胞定位，增强病毒的神经毒性；HSV-1 VP22还能够抑制AIM2炎症小体的激活，进而促进病毒的复制。然而，PRV VP22与HSV-1 VP22的同源性仅为26%，其在病毒感染和致病中的作用尚不明确。近期，m Bio杂志发表了题为“Suppression of ZBP1-mediated NLRP3 inflammasome by the tegument protein VP22 facilitates pseudorabies virus infection”的研究论文，论文的通讯作者为南京农业大学动物医学院姜平教授和刘星教授，第一作者为博士后马梓承。本研究揭示了ZBP1介导的NLRP3炎症小体在PRV感染中的作用，并发现PRV VP22通过抑制该途径介导的炎症反应，促进病毒的复制和致病性。该研究成果为理解PRV复制和致病机制提供了新的视角。

关键词：伪狂犬病病毒被膜蛋白VP22 Z-DNA结合蛋白(ZBP1) NLRP3炎症小体

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伪狂犬病病毒UL4蛋白促进ASC依赖性炎性小体活化和细胞焦亡从而加剧炎症

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中国兽医科学 2025年第1期55卷 141-141页

作者：《中国兽医科学》编辑部黄勇《中国兽医科学》编辑部

伪狂犬病病毒(PRV)是一种对猪和其他哺乳动物造成严重危害的病原体,它能够引发宿主的系统性炎症反应和炎症损伤。尽管已知PRV感染与炎性小体的激活和焦亡有关,但PRV促进炎性小体激活的具体分子机制尚不清楚。2024年9月24日,西北农林科... 详细信息

伪狂犬病病毒(PRV)是一种对猪和其他哺乳动物造成严重危害的病原体,它能够引发宿主的系统性炎症反应和炎症损伤。尽管已知PRV感染与炎性小体的激活和焦亡有关,但PRV促进炎性小体激活的具体分子机制尚不清楚。2024年9月24日,西北农林科技大学研究团队在PLoS Pathogens在线发表了题为“Pseudorabies virus UL4 protein promotes the ASC-dependent inflammasome activation and pyroptosis to exacerbate inflammation”的最新研究成果,鉴定出PRV非结构蛋白UL4的关键功能,揭示其如何增强ASC依赖性的炎性小体激活,促进焦亡,并加剧炎症反应。这一研究成果对于开发新的疫苗和治疗策略具有重要意义。

关键词：炎性小体伪狂犬病病毒 UL4蛋白

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伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段在Pichia pastoris中的表达

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生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 629-633页

作者：敖敬群王瑾雯陈新华王珣章龙綮新娄高明中山大学生物防治国家重点实验室广州510275 国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005 广东省兽医生物技术重点实验室广州510640

伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白 .将伪狂犬病病毒闽A株 gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαA中 ,获得的重组表达载体pPICZαA FL电击转化野生型酵母菌SM... 详细信息

伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白 .将伪狂犬病病毒闽A株 gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαA中 ,获得的重组表达载体pPICZαA FL电击转化野生型酵母菌SMD116 8后 ,得到多株酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL .经高浓度ZeocinTM筛选、表型鉴定、工程菌的诱导表达及表达产物的鉴定 ,最后得到高效表达 gE基因去信号肽片段的酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL 7.工程菌 72h培养上清的SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质印迹结果显示 ,gE基因去信号肽片段表达产物大小约为 80ku ,比预期的 6 3 8ku大 .凝胶薄层扫描结合Bradford蛋白质总含量测定结果表明 ,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的 13 4 9% ,表达量可达 11 7mg/L .间接ELISA结果表明重组表达产物具有良好的抗原性。

关键词：伪狂犬病病毒闽A株 gE基因信号肽表达

伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因在杆状病毒载体系统中的表达研究

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生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 415-419页

作者：陈新华杨林龙綮新王章陈曲侯洪文洲陈焕春国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室厦门361005 中山大学生物防治国家重点实验室广州510275 华中师范大学昆虫学研究所武汉430079 华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070

克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白... 详细信息

克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹均证明了表达产物为 71ku的GST gD融合蛋白 ,其产量占细胞不溶蛋白量的 2 0 %左右 .以GST gD融合蛋白作为抗原进行小鼠免疫保护实验 ,结果表明表达的GST gD融合蛋白具有较好的免疫原性 ,不仅能诱导小鼠产生血清抗体 (1∶12 8) 。

关键词：伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因杆状病毒载体系统表达免疫原性

伪狂犬病病毒TK^-/gG^-缺失株的构建及其生物学特性研究

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生物工程学报 2004年第4期20卷 532-535页

作者：徐晓娟徐高原陈焕春刘正飞何启盖华中农业大学动物医学院病毒室武汉430070

将伪狂犬病病毒TK- gG- LacZ+ 突变株的基因组DNA与含有缺失的gG基因的转移质粒pUSKBB共转染猪肾传代细胞PK 1 5 ,待完全病变后收获病毒进行空斑试验 ,用PCR筛选gG缺失的重组病毒。空斑纯化 3次后 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所... 详细信息

将伪狂犬病病毒TK- gG- LacZ+ 突变株的基因组DNA与含有缺失的gG基因的转移质粒pUSKBB共转染猪肾传代细胞PK 1 5 ,待完全病变后收获病毒进行空斑试验 ,用PCR筛选gG缺失的重组病毒。空斑纯化 3次后 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所获得的病毒为均一的TK- gG- 缺失株。遗传稳定性试验表明该重组病毒能在PK 1 5细胞上稳定遗传 ,动物试验表明该缺失株对Balb c小鼠极为安全且能保护Balb c小鼠抵抗致死量PRV强毒的攻击。

关键词：伪狂犬病病毒 TK^-/gG^-/LacZ^+突变株 TK^-/gG^-缺失株

伪狂犬病病毒基因编码区碱基组成与密码子使用偏差(英文)

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Acta Genetica Sinica 2005年第6期32卷 616-624页

作者：马相如肖少波方六荣陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室中国地质大学环境学院武汉430074

由于伪狂犬病病毒(PRV)中G+C含量高达74%,至今尚没有一个毒株完成全基因组测序。对已知的68 个PRV基因编码区序列碱基组成及密码子使用现象进行了统计分析,结果发现PRV基因中存在非常强的密码子使用偏差。所有68个PRV基因编码区密码子... 详细信息

由于伪狂犬病病毒(PRV)中G+C含量高达74%,至今尚没有一个毒株完成全基因组测序。对已知的68 个PRV基因编码区序列碱基组成及密码子使用现象进行了统计分析,结果发现PRV基因中存在非常强的密码子使用偏差。所有68个PRV基因编码区密码子第三位总的G+C含量为96.24%,其中UL48基因高达99.52%。PRV基因偏向于使用富含GC的密码子,特别是以C或G结尾的密码子。此外,还发现PRV中G+C含量变化较大的UL48、UL40、UL14和IE180等基因附近正好与已知的PRV基因组复制起始区相对应。根据基因功能将PRV基因分为6类进行分析发现,基因功能相同或相近的基因其密码子使用模式相似,其中调节基因的同义密码子相对使用度(RSCU)与其他基因有显著差异,在调节基因中以C结尾的密码子的RSCU值远大于其他同义密码子。最后,对PRV基因氨基酸组成差异进行多元分析,发现不同功能的PRV基因在对应分析图上分布不同,表明PRV基因密码子使用模式可能与基因功能相关。

关键词：伪狂犬病病毒 G+C含量同义密码子相对使用度(RSCU) 偏差调节基因

伪狂犬病病毒鄂A株包膜糖蛋白gD基因的克隆与表达

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微生物学报 2001年第3期41卷 329-333页

作者：陈新华杨林洪文洲陈焕春陈曲侯龙綮新王珣章中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心广州510275 华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070 华中师范大学昆虫学研究所武汉430079

克隆了伪狂犬病病毒鄂A株编码包膜糖蛋白gD的基因并进行了序列测定 ,与国外报道的Rice株相比 ,其核苷酸序列具有 98%的同源性 ,推导氨基酸序列同源性为 97%。将此基因克隆于具有全期启动子盒的杆状病毒转移载体pSX35A中 ,构建成重组转... 详细信息

克隆了伪狂犬病病毒鄂A株编码包膜糖蛋白gD的基因并进行了序列测定 ,与国外报道的Rice株相比 ,其核苷酸序列具有 98%的同源性 ,推导氨基酸序列同源性为 97%。将此基因克隆于具有全期启动子盒的杆状病毒转移载体pSX35A中 ,构建成重组转移质粒pSX35A gD ,与致死缺失型线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV OCC- )基因组DNA一起共转染粉纹夜蛾Hi5细胞 ,经同源重组 ,获得含gD基因的重组病毒AcMNPV OCC+ gD。重组病毒经空斑纯化后感染Hi5细胞进行表达分析 ,细胞裂解物的SDS PAGE及Western Blot ting均显示分子量约 47kD的gD蛋白得到了特异性表达 ,其表达量占细胞总蛋白的 6 2 % ,表达的gD蛋白具有免疫原性。

关键词：伪狂犬病病毒 gD基因杆状病毒表达系统包膜糖蛋白

伪狂犬病病毒荧光标签毒株构建及其在抗病毒药物筛选中的初步应用

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3600-3611页

作者：呙会会张浩杨丹旷燕李亚菲刘绍蒙刘青芸王湘如华中农业大学动物医学院生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070

为筛选针对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的有效抗病毒药物,本研究以PRV人源分离毒株hSD-1/2019和经典猪源流行毒株Ea为亲本病毒,采用同源重组技术将mCherry报告基因插入到PRV的UL 35基因终止子之前位点,构建了表达红色荧光蛋白... 详细信息

为筛选针对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的有效抗病毒药物,本研究以PRV人源分离毒株hSD-1/2019和经典猪源流行毒株Ea为亲本病毒,采用同源重组技术将mCherry报告基因插入到PRV的UL 35基因终止子之前位点,构建了表达红色荧光蛋白mCherry的荧光标签毒株PRV-mCherry。基于构建的荧光标签病毒,以荧光强度为指标,建立高通量药物筛选平台,对天然产物库中1621种化合物进行抗病毒药物筛选,并初步探索药物特性。结果表明,mCherry标签插入位置正确且稳定遗传,荧光标签毒株PRV-mCherry与亲本毒株在PK-15细胞上的增殖曲线趋势一致,且荧光强度可反映病毒增殖情况。使用PRV-mCherry从天然产物库中成功筛选出3种可在体外有效抑制PRV增殖的药物,根据测定的50%细胞毒性浓度和50%抑制浓度,计算出3种药物的选择指数范围为203.63~564.58μmol·L^(-1),表明其具有良好的成药性。本研究为临床防治PRV感染的抗病毒药物发掘提供了新的策略和思路。

关键词：伪狂犬病病毒人源分离株荧光标签毒株抗病毒药物

伪狂犬病病毒Fa株胸苷激酶基因缺失株的构建

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病毒学报 1996年第4期12卷 348-354页

作者：王琴郭万柱娄高明颜其贵汪铭书余广海四川农业大学动物科技学院四川畜牧兽医学院微生物室解放军农牧大学传染病室

采用外切除缺失法对已克隆于ｐＢＲ３２２中包含伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）胸苷激酶（ＴＫ）基因的ＢａｍＨＩ－１１片段（ｐＰＢ１１）进行改建，经筛选获得４株ＴＫ基因缺失重组质粒（ｐＤＴＫ３－１、ｐＤＴＫ３－６、ｐＤＴＫ３－８和... 详细信息

采用外切除缺失法对已克隆于ｐＢＲ３２２中包含伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）胸苷激酶（ＴＫ）基因的ＢａｍＨＩ－１１片段（ｐＰＢ１１）进行改建，经筛选获得４株ＴＫ基因缺失重组质粒（ｐＤＴＫ３－１、ｐＤＴＫ３－６、ｐＤＴＫ３－８和ｐＤＴＫ５－６），对其进行酶切鉴定和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交，结果其１１片段迁移率均发生改变，缺失的碱基数分别约１２５０、１１００、１２５０和２００ｂｐ。用ＰＲＶＦａ－ＤＮＡ或ＰＲＶＦａ细胞毒与重组质粒ｐＤＴＫ３－６ＤＮＡ和ｐＤＴＫ５－６ＤＮＡ通过磷酸钙法和脂质体法转染ＴＫ－１４３细胞，增殖后经５＇－溴脱氧尿嘧啶（５＇－ＢＵＤＲ）筛选得到ＰＲＶＦａＴＫ缺失株ＰＦＤＴＫＰ３－６、ＰＦＤＴＫＰ５－６、ＰＦＤＴＫＬ３－６和ＰＦＤＴＫＬ５－６。以斑点杂交技术和胸腺嘧啶核苷蚀斑放射自显影法检测证明这些缺失株均无ＴＫ活性。免疫小鼠以ＥＬＩＳＡ检测其免疫血清，抗体滴度可高达１：６４。对ＰＲＶＦａ强毒攻击有一定保护率。

关键词：伪狂犬病病毒胸苷激酶基因缺失疫苗家畜病毒